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雞馬立克氏病火雞皰疹病毒活疫苗的性狀檢驗作用用途用法用量等相關(guān)知識
雞馬立克氏病火雞皰疹病毒活疫苗
JiMalikeshibingHuojiPaozhenbingduHuoyimiao
Marek’sDiseaseVaccine(HVT)，Living
本品系用火雞皰疹病毒Fc-126株，接種于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)，收獲感染細(xì)胞，加入適宜穩(wěn)定劑，經(jīng)裂解、冷凍真空干燥制成。用于預(yù)防雞馬立克氏�。∕D)。
本品為乳白色海綿狀疏松團塊，易與瓶壁脫離，加稀釋液后迅速溶解。
依法檢驗(附錄169頁)，應(yīng)無菌生長。
依法檢驗(附錄172頁)，應(yīng)無支原體生長。
依法檢驗(附錄173頁第二項)，應(yīng)符合規(guī)定。
將含100～200PFU的疫苗用抗火雞皰疹病毒特異性血清等量混合，18～22℃中和30分鐘后，接種單層細(xì)胞上培養(yǎng)測定蝕斑，與接種病毒對照組比，蝕斑減少率應(yīng)不低于95%。
下列方法任選其一。
(1)用l～3日齡易感成SPF雛雞20羽，其中10羽肌肉注射疫苗0.2ml(含10個使用劑量)，觀察14日，對照組至少存活8只，免疫組非特異死亡數(shù)不得超過對照組，判合格。
(2)用10日齡易感成SPF雞胚10只，每胚尿囊腔接種疫苗0.1ml(含10個使用劑量)，接種后24～4B小時內(nèi)雞胚非特異死亡不超過20%，死亡雞胚尿囊液對雞紅細(xì)胞凝集試驗應(yīng)為陰性，120小時，收集活胚尿囊液混合，對雞紅細(xì)胞凝集試驗應(yīng)為陰性。
每批疫苗抽樣3瓶，分別用SPG稀釋，取適當(dāng)稀釋度，每個稀釋度接種3個已長成良好單層細(xì)胞的30ml容量瓶，每瓶加入0.2ml，在37～38℃吸附60分鐘，加入含2%牛血清199營養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)24小時，棄去營養(yǎng)液，覆蓋含5%牛血清的E-MEM或199營養(yǎng)瓊脂(糖)，每瓶加3ml，待凝固后，將瓶倒置，繼續(xù)培養(yǎng)5～7日，進行蝕斑計數(shù)。蝕斑應(yīng)典型，清晰，形態(tài)不規(guī)則，邊緣不整齊，直徑0.5～l.5mm，呈乳白色，與同時設(shè)立的參照品蝕斑一致。計數(shù)時，一般選蝕斑數(shù)在30～150個之間的細(xì)胞瓶進行計數(shù)，用肉眼以蠟筆或記號筆在瓶底面點
數(shù)，求出同一稀釋度3瓶中平均蝕斑數(shù)，計算出每瓶疫苗所含蝕斑數(shù)。以3瓶疫苗各稀釋滴度中的最低平均數(shù)核定該批疫苗每羽份中所含的蝕斑數(shù)，每羽份應(yīng)不低于200OPFU。
依法檢驗(附錄175頁)，應(yīng)符合獸用生物制品通則的規(guī)定。
依法檢驗(附錄181頁)，應(yīng)符合獸用生物制品通則的規(guī)定。
用于預(yù)防雞馬立克氏玻
按瓶簽或說明書稀釋疫苗，每羽肌肉或皮下注射0.2ml(至少合2000PFU)。
(1)已發(fā)生過馬立克氏病的雞場，雛雞應(yīng)在出殼后立即進行項防接種。
(2)疫苗應(yīng)隨配隨用，用專用稀釋液稀釋。稀釋后放入盛有冰塊的容器中，必須在l小時內(nèi)用完。
(1)200羽份／瓶(2)500羽份／瓶(3)1000羽份／瓶(4)1500羽份／瓶(5)2000羽份／瓶
-15℃以下保存，有效期為1年6個月。
附注
1.SPGA配制
蔗糖76.62gL-谷氨酸單鈉0.83g
磷酸二氫鉀0.52g牛血清白蛋白10g
磷酸氫二鉀(含3個結(jié)晶水)1.64g
(或磷酸氫二鉀1.25g
補滅菌無離子水或蒸餾水至1000ml，濾過除菌，冷凍保存?zhèn)溆谩?/P>
2.SPG配制同上，但不加牛血清白蛋白。
3.SPG的檢驗
(payment-defi.com/shouyi/yang/wenda/1)物理性狀為無色或微黃色、透明、不含雜質(zhì)和沉淀的液體。
(2)無菌檢驗依法按附錄169頁進行，應(yīng)無菌生長。
(3)pH值6.7±0.1
(4)復(fù)原疫苗后的穩(wěn)定性測定用SPG將疫苗作適當(dāng)稀釋，取稀釋后當(dāng)時和20℃±2℃靜止l小時后的疫苗接種細(xì)胞單層，進行蝕斑計數(shù)。稀釋后20℃±2℃放1小時，疫苗滴度損失不應(yīng)超過40%，為合格。
用同批號試劑配制多批稀釋液，只需檢驗第一批稀釋液，當(dāng)更換任何試劑的批號時，則重新抽樣進行稀釋液對疫苗病毒的穩(wěn)定性試驗。
