幽門螺桿菌（Helicobacterpyloir，Hp)是慢性B型胃炎的主要原因，與非潰瘍性消化不良，胃和十二指腸潰瘍及胃癌關(guān)系密切。流行病學研究表明，在國人無癥狀或健康人群Hp總感染率在33.9％～49.6％；在慢性胃炎Hp檢出率為50％～80％，胃潰瘍為70％～80％，十二指腸潰瘍?yōu)?0％～100％。但Hp感染缺乏臨床表現(xiàn)的特征，因而目前仍主要靠實驗室診斷。以前國內(nèi)外診斷Hp的方法無外三大類，一是直接從胃粘膜中檢測Hp，包括細菌培養(yǎng)、組織涂片和切片染色；二是尿素酶試驗或呼吸試驗診斷Hp；三是免疫學方法，如酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA)等。近年來通過多項研究和方法改進，可克服某些不足之處，下面將國內(nèi)Hp感染的診斷方法研究近況作一簡述。
1 通過胃鏡
1.1 病灶沖洗法下接涂片
組織涂片革蘭染色法檢測Hp感染簡便、快速、敏感性可達80％以上，但也有低于50％的檢出率，除與檢驗醫(yī)師經(jīng)驗有關(guān)，還與取材部位和Hp數(shù)量有關(guān)。新近何松等對52例慢性胃炎患者在切取胃竇部病變區(qū)組織活檢的同時，內(nèi)鏡下用生理鹽水對病灶沖洗，將總洗液離心后制成涂片比較。結(jié)果發(fā)現(xiàn)涂片Hp陽性率明顯高于切片方法（53.9％比38.5％)，認為沖洗法覆蓋面大，可廣泛、反復沖洗，取材較活檢更全面，可提高Hp檢出率。
1.2 胃鏡下直接顯色法
Hp菌體內(nèi)含豐富尿素酶能分解尿素，改變pH值。根據(jù)這一原理，李增燦等用粉紅色素噴灑胃粘膜方法對100例慢性胃炎研究結(jié)果顯示，粉紅色素噴灑法著色率68％；傳統(tǒng)切片法HP陽性率為60％；胃潰瘍25例著色法陽性率80％，切片法72％；十二指腸潰瘍50例，著色法陽性率90％，切片法為80％，表明切片法存在假陰性，而胃鏡下直接顯色法可提高Hp的檢出率。
1.3 尿素酶活性測定Hp
目前診斷Hp常采用的細菌培養(yǎng)，組織染色及尿素酶試驗等方法均需內(nèi)鏡取材，且方繁瑣，費時，并且結(jié)果受Hp斑片狀分布的影響。崔東來等根據(jù)Hp產(chǎn)生大量尿素酶的原理，采用尿素酶活性診斷Hp，Hp感染者尿素酶活性明顯高于無Hp感染者，以尿素酶活性0.31作為截斷值，其診斷Hp的敏感性、特異性和準確性分別為95％、84％和93％，而且認為尿素酶活性診斷Hp快速、簡便，不受血尿素氮影響等優(yōu)點，也比測定胃液尿素氮方法優(yōu)越。
2 血清學
2.1 ELISA法
通過血清中Hp抗體測定Hp感染的方法比較多，有ELISA法、補體結(jié)合試驗、單克隆抗體測定法、免疫印跡試驗、被動血凝試驗和細菌凝集試驗等，尤其是ELISA法應用最廣。Hp感染后很快會激發(fā)機體產(chǎn)生特異性體免疫，血清中出現(xiàn)IgG，IgA，IgM抗體，國內(nèi)外多采用ELISA法檢測HpIgG抗體。
2.1.1 HpIgG測定
在廣州地區(qū)一項流行病學調(diào)查Hp感染率研究中，經(jīng)1848例人群Hp感染分析，并經(jīng)組織病理學和細菌培養(yǎng)比較，認為測定HpIgG抗體診斷Hp感染其敏感性和特異性分別達100％和91％。劉勤儉等對235例人群及20多個家庭Hp感染調(diào)查時，用間接ELISA法檢測血清HpIgG抗體，其敏感性和特異性分別達94％和85％。新近童明慶等介紹了一種斑點—ELISA技術(shù)，經(jīng)對18例慢性胃炎、消化性潰瘍患者，19例兒童和22例正常成人行HpIgG抗體測定，患者組抗體檢出率72.2％，與快速尿素酶法相比，符合率為83.3％，診斷的敏感性和特異性分別為91.7％和66.7％。認為本法克服了快速尿素酶法需胃鏡取材的缺點，因而較適合臨床Hp感染的初篩檢查和流行病學研究。
2.1.2 HpIgA測定
最近王正祥等經(jīng)用間接ELISA法檢查血清HpIgG抗體和IgA抗體比較，結(jié)果在胃炎抗HpIgG陽性率達82.3％(93/113);Hp現(xiàn)感染率74.3％(84/113);在抗HpIgG陽性標本中有11.8％(11/93)經(jīng)Hp培養(yǎng)和(或)涂片陽性，而在抗HpIgA陽性標本中僅2.6％(2/78)經(jīng)Hp培養(yǎng)和(或)涂片陰性，因而認為抗HpIgA升高比抗HpIgG升高更能反映機體正被Hp感染.可作為Hp現(xiàn)感染的診斷指標，而抗HpIgG可作為胃炎患者初篩及Hp感染的流行病學研究的指標。
2.1.3 尿素酶檢測
在行ELISA試驗時最重要的是抗原的選擇，以前使用的一些抗原制備是應用全菌或全菌超聲粉碎物作抗原，這種抗原制備含有多種菌體及鞭毛蛋白，其中有些物質(zhì)或不具備抗原性、或為其它菌種所共有，如Hp與空腸彎曲菌有血清交叉反應等因素。因而試驗的敏感性高，但缺乏特異性，酸提取法雖較純凈，但特異性和敏感性不理想。有研究人員，采用柱層析法純化了Hp的尿素酶，并用該尿素酶作ELISA測定包被抗原，對120例有消化不良癥狀的血清www.med126.com進行檢測，平均光密度值在Hp陽性組明顯高于Hp陰性組，如以0.3光密度值為標準，診斷的敏感性和特異性分別為95％和91％。因而認為用尿素酶作為抗原應用于ELISA試驗具有良好的特異性和敏感性。
2.1.4 單克隆抗體測定法
有研究人員介紹了HpmAbs（單克隆抗體)免疫過氧化物酶染以法診斷Hp感染，用ELISA法將HpmAbs與已知細菌反應，結(jié)果HpA值明顯高于其它細菌，因而認為HpmAbs為Hp分離純化后的鑒定提供了手段。
2.2 聚合酶鏈反應法
診斷Hp感染的方法很多，但他們有一共同特點是不能達到足夠的敏感性，尤其是不能準確判斷治療后Hp是否被徹底清除。王蔚虹等采用聚合酶鏈反應（Polymerase chainreaction，PCR)探討其在Hp診斷和評價治療后根治效果中的意義，結(jié)果PCR方法檢測胃粘膜活檢標本中的Hp，簡便、快速、具有高度敏感性，可檢出最小HpDNA量為0.1pg，特異性達100％，對其它細菌及無Hp感染人胃粘膜呈陰性反應。PCR用于Hp感染診斷與尿素酶試驗、細菌培及銀染色法比較，更敏感，而且PCR可檢出常規(guī)方法不能檢出的Hp。楊海濤等將巢式PCR在牙斑中檢出Hp，其特異性達100％，敏感性達到可檢測0.1fg細菌DNA的水平。
由于不同實驗方法可得出不同結(jié)論，因而需要正確加以評價。如牙斑中存在Hp是否為主要傳染源意見尚不一致。1991年Desai等用尿素酶試驗對43例消化不良患者的牙斑中、胃竇及胃粘膜標本標進行檢測陽性率分別為98％，67％和70％，認為牙斑中Hp是主要傳染源。宋群生等用尿素酶試驗、細菌培養(yǎng)和免疫熒光抗體染色和電鏡觀察，也發(fā)現(xiàn)消化性潰瘍、慢性胃炎及胃癌等患者牙斑中可有大量Hp存在，其形態(tài)學、生化特性和免疫特性均與胃粘膜Hp相似。從牙斑的直接快速尿互酶試驗和抗Hp免疫熒光抗體染色結(jié)果看，胃粘膜上有Hp，牙斑中也有Hp ；胃粘膜上未發(fā)現(xiàn)Hp者，牙斑中也有Hp寄生，且牙斑中的Hp數(shù)量、密度均高于胃粘膜。但相反意見認為，Hp有尿素酶，可分解尿素，使pH升高，當pH高于6.8時，酚紅由黃色變紅色，而單純口腔內(nèi)的pH值足以使尿素酶試驗呈陽性結(jié)果并不能肯定是Hp感染。根據(jù)對21例患者用N-PCR法測定胃粘膜Hp 陽性者，8例牙斑中也檢出Hp，而胃粘膜陰性者，牙斑Hp均陰性，提示牙斑中僅有少量Hp存在。
3 核素標記呼氣試驗
Hp具有較強的內(nèi)源性尿素酶，能分解胃內(nèi)及核素標記的尿素，產(chǎn)生CO2和NH3，CO2被吸收后經(jīng)肺呼出，因此只需分析呼氣中的14C或13C即可診斷Hp的存在。國內(nèi)也采用13C－尿素為示蹤劑診斷Hp感染，認為具有較好診斷價值，但受技術(shù)條件和價格所限，不適合國內(nèi)payment-defi.com，尤其基層醫(yī)院開展。
綜上的述，Hp感染的診斷方法比較多，快速尿素酶試驗、尿素酶活性試驗、直接顯色法、涂片革蘭染色法、組織切片染色等簡便、易行；血清學檢查尤適用于流行病學調(diào)查，而PCR主法對判斷治療后Hp的根除情況更為準確，不同研究目的，采用不同方法似乎更妥善。
