藥物分析的基礎知識
第一節(jié) 藥品檢驗的基本知識
一、藥品檢驗工作的程序
1.取樣：應考慮取樣的科學性、真實性和代表性。
樣品總件數(shù)為X，
n≤3，應每件取樣
n≤300，取樣件數(shù)為 +1
n＞300，取樣件數(shù)為 /2+1
2.檢驗：鑒別、檢查、含量測定。
3.記錄和報告：檢驗記錄應有供試品信息、檢驗依據(jù)；取樣、報告日期；檢驗項目、數(shù)據(jù)、結(jié)果；結(jié)論判定；檢驗者簽字或蓋章。
檢驗報告書內(nèi)容有供試品信息，檢驗依據(jù)、取樣、報告日期，檢驗結(jié)果、結(jié)論，檢驗者、復核者及有關(guān)負責人簽名或蓋章。醫(yī) 學全,在線.搜集.整理payment-defi.com
二、計量儀器認證的要求
國家對社會公用計量標準器具、企業(yè)、部門用最高計量標準器具，以及列入強制檢定目錄的工作計量器具實行強制檢定。其他計量標準器具，使用單位應當自行定期檢定或送計量檢定機構(gòu)檢定，縣級以上政府計量行政部門監(jiān)督檢查。
三、常用分析儀器的使用和校正
1．分析天平
稱量的相對誤差應小于千分之一，根據(jù)取樣量選用感量0.1、0.01、0.001mg三種。
方法有減量法、增量法兩種。
2．玻璃儀器
容量瓶：允差為容積的千分之一
移液管：100ml(±0.10ml)；50ml(±0.08ml)；25ml(±0.05ml)
滴定管：50ml(±0.05ml)；25ml(±0.03ml)；10ml(±0.02ml)
5ml(±0.01ml)
第二節(jié) 藥物分析數(shù)據(jù)的處理
一、誤差
1.真值 指某物理量客觀存在的確定值，它通常是未知的。由于誤差的客觀存在，真值一般是無法測得的。
測量次數(shù)無限多時，根據(jù)正負誤差出現(xiàn)的概率相等的誤差分布定律，在不存在系統(tǒng)誤差的情況下，它們的平均值極為接近真值。故在實驗科學中真值的定義為無限多次觀測值的平均值。
2.誤差 測量值和真實值的偏離。誤差越小，準確性越高
(1)絕對誤差：測量值和真實值之差�？梢允钦�，也可以是負值，其單位與測量值單位相同。
以χ代表測量值，μ代表真實值，絕對誤差δ為：
δ＝χ－μ
(2)相對誤差：誤差在測量值中所占比例，相對誤差沒有單位，便于比較。
相對誤差＝絕對誤差/真實值×100%
3. 誤差的分類
根據(jù)誤差的性質(zhì)和產(chǎn)生的原因，可將誤差分為系統(tǒng)誤差、隨機誤差二類。
二、有效數(shù)字
1.有效數(shù)字：實驗測量中所使用的儀器儀表只能達到一定的精度，因此測量或運算的結(jié)果不可能也不應該超越儀器儀表所允許的精度范圍。payment-defi.com分析工作中實際能測量到的數(shù)字稱為有效數(shù)字，只能具有一位存疑值。
有效數(shù)字的表示：應注意非零數(shù)字前面和后面的零。0.009140km前面的三個零不是有效數(shù)字，它與所用的單位有關(guān)。非零數(shù)字后面的零是否為有效數(shù)字，取決于最后的零是否用于定位。
2.有效數(shù)字的修約
(1) 四舍六入五成雙
(2) 只允許對原測量值一次修約至所需位數(shù)
(3) 運算過程中可多保留一位有效數(shù)字，計算出結(jié)果后再修約至應有有效數(shù)字位數(shù)。
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誤差分類 |
誤差性質(zhì) |
產(chǎn)生原因 |
減小或消除方法 | |
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系統(tǒng)誤差 |
儀器誤差 |
分析過程中由于某些恒定的或按一定規(guī)律起作用的因素所形成的誤差。相同條件下作平行測定。 |
由于儀器或工具本身不精密而造成，即指示的數(shù)值不準確。 |
校正儀器，采用校正值。 |
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試劑誤差 |
測定時必然會重復出現(xiàn)，使測定結(jié)果系統(tǒng)偏高或偏低�？赏ㄟ^實驗設法減小。決定測試的準確度。 |
試劑純度不夠或標定欠準確。 |
進行空白試驗，采用高純度試劑，準確予以標定。 | |
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方法誤差 |
測定的方法本身不完善，如反應不完全或有副反應，計算公式不完全符合真實情況等 |
采用標準方法與所用方法進行對照。 | ||
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操作誤差 |
由于操作人員的主觀偏見或視覺辨別能力差，以及操作不當而造成的，如滴定時讀數(shù)方法，滴定終點的判斷等。 payment-defi.com |
嚴格訓練，提高操作人員的技術(shù)水平。 | ||
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隨機誤差 |
在測試過程中一系列的有關(guān)因素微小的隨機波動而形成的，不可避免且無法校準的。決定分析結(jié)果的精密度 |
由偶然的、難以預料的和無法控制的因素而造成，如環(huán)境溫度波動、空氣濕度、氣壓的變化等 |
對同一試樣進行多次重復測量，如已對系統(tǒng)誤差進行校準，則多次測量的平均值將接近真實值。 | |
3.運算法則
(1)加、減法運算
有效數(shù)字進行加、減法運算時，按照小數(shù)點后位數(shù)最少的保留其他個數(shù)位數(shù)。
(2)乘、除法運算
兩個量相乘(相除)的積(商)，其有效數(shù)字位數(shù)與各數(shù)中有效數(shù)字位數(shù)最少的相同。
第三節(jié) 藥品質(zhì)量標準分析方法的驗證
一般常用的分析效能評價指標包括：準確度、精密度、專屬性、檢測限、定量限、線性與范圍、耐用性等；測定法的效能指標可評價分析測定方法，也可作為建立新的測定方法的實驗研究依據(jù)。
1.準確度 是指測得結(jié)果與真實值接近的程度，表示分析方法測量的正確性。
由于“真實值”無法準確知道，因此，通常采用回收率試驗來表示。
制劑的含量測定時，采用在空白輔料中加入原料藥對照品的方法作回收試驗及計算RSD。
回收率＝測定值/加入量×100％
2.精密度 系指用該法測定同一勻質(zhì)樣品的一組測量值彼此符合的程度。它們越接近就越精密。在藥物分析中，常用標準偏差(SD或S)； payment-defi.com相對標準偏差(RSD)，也稱變異系數(shù)(CV)表示。
3.專屬性 是指在樣品介質(zhì)中有其他組分共存時該分析方法對供試物質(zhì)準確而專屬的測定能力。
4.檢測限 是指分析方法能夠從背景信號中區(qū)分出藥物時，所需樣品中藥物的最低濃度，無需定量測定。
當用儀器分析方法時，可用已知濃度的樣品與空白試驗對照，記錄測得的被測藥物信號強度S與噪音(或背景信號)強度N，以能達到S／N＝2或S／N＝3時的樣品最低藥濃為檢測限。
5.定量限 是指在保證具有一定可靠性(一定準確度和精密度)的前提下，分析方法能夠測定出的樣品中藥物的最低濃度。
它反映了分析方法測定低藥物濃度樣品時具有的可靠性。用儀器分析方法時，則往往將多次空白試驗測得的背景響應的標準差(即空白標準差)乘以10，作為定量限的估計值。
6.線性 在給定范圍內(nèi)測試結(jié)果與樣品中供試物濃度成正比的程度。即是供試物濃度的變化與試驗結(jié)果(或測得的響應信號)成線性關(guān)系。
7.范圍 是指利用一種方法取得精密度、準確度均符合要求的試驗結(jié)果，而且成線性的供試物濃度的變化范圍，對于含量測定要求一般濃度上限為樣品最高濃度的120％，下限為樣品最低濃度的80％ (但應高于LOQ)。
8.耐用性 是指利用相同的方法在各種正常實驗條件下對同一樣品進行分析所得結(jié)果的重現(xiàn)程度。包括不同的實驗室、不同的分析人員、不同的儀器、不同批號的試劑、不同的測試耗用時間、不同的分析溫度、不同的測定日期等等。
評價一種分析方法的效能，一般根據(jù)方法的使用對象區(qū)別。有以下四種情況：
A．用于原料藥中主要組分或制劑中有效組分含量測定的方法：除了檢測限和定量限二項指標外，對精密度、準確度、選擇性、線性與范圍、耐用性等均應有所要求；醫(yī)學全在線,搜集整,理payment-defi.com
B．用于原料藥中雜質(zhì)測定或制劑中降解產(chǎn)物測定：
①用于含量測定，除檢測限不必要求外，對準確度、精密度、線性與范圍、定量限、耐用性等均應有所要求；
②用于限度檢查，只對檢測限、專屬性和耐用性三項指標有所要求，其余均無需要求。
