2013年度公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試輔導(dǎo):多能干細(xì)胞
多能干細(xì)胞是由Till和McCulloch等在60年代初,應(yīng)用脾集落形成細(xì)胞定量法,首先在小鼠體內(nèi)證明的。他們給經(jīng)射線照射的小鼠輸入同系鼠骨髓細(xì)胞,在10~14天后在脾內(nèi)形成可見的結(jié)節(jié),它是由單一骨髓細(xì)胞發(fā)育分化而成的細(xì)胞集落,稱之為脾集落形成單位(colony forming unit-spleen,CFU-S)。集落數(shù)與輸入的細(xì)胞數(shù)成正比,它可分化發(fā)育為紅細(xì)胞、粒細(xì)胞及巨核細(xì)胞。CFU-S長期以來用體內(nèi)集落法進(jìn)行檢測。
在70年代后Johnson和Metcalf等應(yīng)用鼠胎肝細(xì)胞體外培養(yǎng)法,證明具有CFU-S性質(zhì)的干細(xì)胞可在體外培養(yǎng)成功,這是在研究干細(xì)胞方法學(xué)上的重大改進(jìn)。
其后,Haral等用小鼠骨髓細(xì)胞在甲基纖維素中加入紅細(xì)胞生成素(erythropoietin,EPO)及脾細(xì)胞培養(yǎng)上清,進(jìn)行體外培養(yǎng),可形成含有紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞的集落,稱為混合集落形成單位(CFU-Mix)。其后,小林登等在80年代用人骨髓細(xì)胞亦報(bào)告CFU-Mix培養(yǎng)成功。即由多能干細(xì)胞可進(jìn)一步分化為定向髓系多能干細(xì)胞及淋巴系干細(xì)胞。淋巴系干細(xì)胞是T和B細(xì)胞的共同祖先細(xì)胞,但目前尚不能用脾集落實(shí)驗(yàn)證明其存在。