二、進行微循環(huán)動物實驗的幾個原則
�。ㄒ�)動物的麻醉
遠(yuǎn)在1944年曾有人在微循環(huán)的研究中發(fā)現(xiàn)：給小動物進行戊巴比妥鈉注入時，劑量若超過3mg/100g體重，則不能得到預(yù)期的血管動物。也有人報導(dǎo)，快速注入烏拉坦能誘發(fā)血栓形成。因此，動物麻醉藥物的選擇和劑量，以及麻醉藥的配伍都是實驗中的重要環(huán)節(jié)。
微循環(huán)實驗研究中幾種常用動物的麻醉藥配伍和劑量用法：
1．貓：35mg/kg體重戊巴比妥鈉腹腔注入：70mg/kg體重氯醛糖或700mg/kg體重烏拉坦腹腔注入；75mg/kg體重α氯醛糖，靜脈注射。
2．金黃地鼠：30mg/kg體重戊巴比妥鈉腹腔注入（如實驗時間短可25mg/kg重體)。
3．家兔：35-40mg/kg體重戊巴比妥鈉腹腔注入。
4．大白鼠、小白鼠等小動物：25mg/kg體重戊巴比妥鈉腹腔注入或肌注，或130mg/100g體重烏拉坦肌注。
動物處于正常麻醉狀態(tài)時，角膜反射抑制，保持平穩(wěn)的胸式呼吸。如出現(xiàn)呼吸抑制或深腹式呼吸，則說明用藥過量。以上麻醉劑量可維持2～3小時較好的麻醉狀態(tài)。如需繼續(xù)麻醉，可追加原用藥量的三分之一。
有些實驗動物不需麻醉，可在動物清醒狀態(tài)下進行，如兔眼球結(jié)膜微循環(huán)的檢查方法等。
（二)恒溫灌流
原則上，動物器官或組織的灌流液應(yīng)是與該器官或組織周圍體液環(huán)境的成份和pH完全一樣，例如對腸系膜來說應(yīng)有腹腔內(nèi)液的環(huán)境，但是很難做到的。
Zweifach認(rèn)為：無論應(yīng)用什么灌流液，首先應(yīng)使它成為膠體狀態(tài)，即在灌流液中加入明膠，使之成為1%的明膠溶液。
灌流液中應(yīng)該通過適量的氧和二氧化碳。灌流液的pH應(yīng)以緩沖液調(diào)至中性（pH為7.35)灌流液的溫度應(yīng)以控制器控制在動物正常體溫范圍。灌流液在整個實驗過程中應(yīng)不停地慢速更換。常用的灌流液有林格氏液、臺氏液、凱氏液、生理鹽水等。灌流裝置和所觀察的動物應(yīng)放在裝有可調(diào)節(jié)的恒溫實驗觀察箱中進行，此點在冬季顯得尤為重要。將實驗觀察箱中的溫度調(diào)節(jié)到與實驗動物體表溫度相近的溫度，最好在25～30℃。
（三)照明裝置
照明裝置的溫度一般不能超過動物體溫。最好保持在25～30℃，否則會引起血管擴張及微血流異常。照射燈光最好不改變血液自然的色調(diào)，否則不易辨別血氧飽和程度。最理想的照明裝置是纖維光束冷光源，尤其在進行肝、脾、腎等臟器的微循環(huán)觀察時，沒有可以伸進腹腔去的冷光源照明棒是很難進行實驗的。
實驗時用的照明光源，應(yīng)該具備三個條件，即強、聚、“冷”。目前常用的有兩種照明裝置，一種是高壓水銀燈（220V，80W)，此光源的優(yōu)點是光線強，產(chǎn)熱較少，血管與底色間反差強，缺點是血色不真實，光源觸發(fā)啟動慢。另一種是鎢鹵素?zé)簦?～12V，40～100W)，后者具有體積小巧，光線白亮，啟動快的優(yōu)點。鎢鹵素?zé)艨捎蔑@微鏡燈加以改裝，因其有透鏡，能調(diào)節(jié)焦距，又能達(dá)到“聚光”的目的，再在此燈前加上藍(lán)綠色的隔熱濾光片，即可控制光源溫度，達(dá)到相對“冷光”的要求。此種照明光源能在普通室內(nèi)保證顯微鏡下視野清晰，而且對觀察指標(biāo)影響較小。
�。ㄋ�)記錄系統(tǒng)
動物微循環(huán)的瞬間變化常采用顯微攝影裝置來記錄。選擇好顯微照相裝置及相應(yīng)的洗相設(shè)備。為了保證攝影的成功，凡是活體攝影，均需要使用拆射光源，要使用快片（24定以上的微粒膠卷)攝影，這是一個關(guān)鍵問題，還要增強反差（用綠色濾光片增強血管與底色間的的反差)。
照相機是一般的記錄工具，它只能留下瞬間的圖象，有條件最好能拍攝電影或進行彩色磁帶錄像。
對于管徑掃描的曲線、血流流態(tài)曲線或微壓力曲線要用示波器或多導(dǎo)記錄器進行記錄，如能用微處理機記錄并貯存上述信號則更理想。
