（一)標本的采集
應(yīng)符合以下幾個原則：①注意無菌操作，盡量避免雜菌污染；②在患者不同病程，根據(jù)不同病原菌在體內(nèi)的分布和排出部位，采取不同的標本；③應(yīng)在發(fā)病急性期和使用抗生素之前采集；④盡可能采取病變明顯部位的材料；⑤標本必須新鮮，盡快送檢；⑥多數(shù)菌冷藏運送，少數(shù)菌需保溫；⑦標本應(yīng)做好標簽，化驗單上填寫檢驗?zāi)康摹吮痉N類和臨床診斷。
（二)病原菌的檢驗程序
1．直接涂片鏡檢 凡在形態(tài)和染色性上具有特征的病原菌，直接涂片染色后鏡檢有助于初步診斷。
2．分離培養(yǎng) 原為無菌部位采取的血液、腦脊液等標本，可直接接種至營養(yǎng)豐富的液體或固體培養(yǎng)基；從正常菌群存在部位采取的標本，應(yīng)接種至選擇或鑒別培養(yǎng)基。同時要注意滿足氣體的要求。
3．生化試驗 如腸道桿菌包括多個菌屬，可利用不同基質(zhì)進行生化試驗予以區(qū)別。
4．血清學試驗 采用含有已知特異性執(zhí)業(yè)藥師抗體的免疫血清與分離培養(yǎng)出的未知純種細菌進行血清學試驗，可以確定病原菌的種或型。
5．動物試驗 主要用于分離、鑒定病原菌，測定菌株產(chǎn)毒性等。
6．藥物敏感試驗 對臨床選擇用藥有指導意義。
7．分子生物學技術(shù) 應(yīng)用核酸雜交和PCR技術(shù)檢測病原菌核酸�；蛐酒夹g(shù)已成為研究開發(fā)熱點。
用已知的細菌或其特異性抗原檢測患者血液中有無相應(yīng)特異抗體和其效價的動態(tài)變化，可作為某些傳染病的輔助診斷，主要適用于抗原性較強的致病菌和病程較長的感染性疾病。
血清學診斷試驗最好取患者急性期和恢復期雙份血清標本，當后者的抗體效價比前者升高≥4倍者方有意義。
表7-1 血清學試驗種類與應(yīng)用
| 血清學試驗 | 舉例 |
| 凝集試驗 直接凝集試驗 乳膠凝集試驗 冷凝集試驗 沉淀試驗 對流免疫電泳 補體結(jié)合試驗 中和試驗 | 檢查流感嗜血桿菌的抗體 支原體性原發(fā)性非典型肺炎 流行性腦膜炎 風濕熱（抗O試驗) |
1．特異性免疫獲得方式 ①主動免疫：通過患病、隱性感染獲得自然感染，或給機體接種疫苗（vaccine)、類毒素（toxoid)進行人工免疫payment-defi.com/zhuyuan/。②被動免疫：通過胎盤、初乳等自然免疫獲得抗體，或是給機體注射抗毒素（antitoxin)等進行人工免疫。
2．人工免疫的概念和臨床常用制劑
①人工主動免疫（artificial active immunity)：是將疫苗或類毒素等抗原物質(zhì)接種人體，使機體產(chǎn)生特異性免疫力的一種措施。疫苗可分為死疫苗、減毒活疫苗、基因工程疫苗、核酸疫苗，從功能上又可分為預防性疫苗和治療性疫苗。免疫出現(xiàn)時間慢（2～4周)，維持時間長（數(shù)月～數(shù)年)，主要用于預防。
②人工被動免疫（artificial passive immunity)：是注射含有特異性抗體的免疫血清或細胞因子，使機體立即獲得特異性免疫，因而作用及時，但維持時間短，僅2～3周，主要用于治療或緊急預防。常用的生物制品是抗毒素、抗菌血清、胎盤球蛋白、丙種球蛋白和細胞免疫制劑。
【A型題】
1.有關(guān)“病原菌檢測的標本采集”的敘述，哪一項是錯誤的：
A.最好在使用抗生素前采集標本 B.采集的標本應(yīng)盡快送檢
C.應(yīng)注意無菌操作D.采集的標本應(yīng)在低溫下保存
E.按病變部位和病期決定采集不同的標本
2.目前可用類毒素進行預防的疾病是：
C.破傷風與結(jié)核病 D.白喉與破傷風
E.百日咳與白喉
3.抗毒素：
A.為外毒素經(jīng)甲醛處理后獲得
B.用于人工主動免疫
C.可中和與易感細胞結(jié)合的外毒素的毒性作用
D.可中和內(nèi)毒素的毒性作用
E.使用原則是早期、足量、防過敏反應(yīng)
4.類毒素：
A.為內(nèi)毒素經(jīng)甲醛處理后獲得 B.能中和外毒素的毒性作用
C.可刺激機體產(chǎn)生抗毒素D.為抗毒素經(jīng)甲醛處理后獲得
E.可用于人工被動免疫
5.類毒素:
A.有抗原性，有毒性 B.無抗原性，有毒性
C.有抗原性，無毒性 D.無抗原性，無毒性
E.僅有半抗原性，無毒性
6.對細菌種屬的鑒定，下列哪一項不是必須的:
A.形態(tài)染色觀察 B.分離培養(yǎng)
C.生化反應(yīng)D.血清學試驗
E.藥敏試驗
7.直接涂片鏡檢:
A.不能快速診斷細菌感染
B.適用于所有細菌感染疾病的初步檢查
C.只適用于形態(tài)和染色性上具有特征的病原菌
D.其結(jié)果必須結(jié)合臨床表現(xiàn)方有診斷價值
E.以上都不是
8.哪一項不能獲得有效的特異性免疫:
A.新生兒吸吮初乳 B.注射丙種球蛋白
C.接種卡介苗D.破傷風病愈后
E.流腦流行期無癥狀感染者
9.使用時要注意防止發(fā)生Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的制劑是:
A.干擾素 B.類毒素
C.抗毒素 D.丙種球蛋白
E.滅活疫苗
10.滅活疫苗優(yōu)于減毒活疫苗表現(xiàn)在：
A.免疫效果較好且持久 B.接種次數(shù)及劑量較少
C.可產(chǎn)生局部免疫作用 D.疫苗保存期長,易于運輸
E.注射的局部和全身性副反應(yīng)輕微
11.診斷風濕熱的抗O試驗屬于：
A.中和試驗 B.沉淀試驗
C.補體結(jié)合試驗 D.直接凝集試驗
E.乳膠凝集試驗
12.有關(guān)“核酸疫苗”的敘述，哪一項是錯誤的：
A.包括DNA疫苗和RNA疫苗B.熱穩(wěn)定性差
C.免疫維持時間長 D.誘發(fā)機體產(chǎn)生細胞免疫和體液免疫
E.由免疫原編碼基因與載體(如質(zhì)粒DNA)組成
【X型題】
13.有關(guān)“疾病━血清學診斷方法”的組合，哪幾項是正確的:
A.傷寒━肥達反應(yīng)B.風濕病━抗“O”試驗
C.斑疹傷寒━外斐反應(yīng) D.結(jié)核病━結(jié)核菌素試驗
E.梅毒━USR試驗
14.注射或接種哪一項而獲得免疫的方式稱為人工被動免疫。
A.破傷風抗毒素（TAT) B.卡介苗（BCG)
C.百日咳疫苗 D.脊髓灰質(zhì)炎疫苗（OPV)
E.免疫球蛋白
15.下述哪一項檢查能協(xié)助臨床診斷:
A.膿汁涂片找到革蘭陽性葡萄球菌 B.咽拭子涂片找到革蘭陰性雙球菌
C.腦脊液涂片找到革蘭陰性桿菌 D.痰標本涂片找到抗酸桿菌
E.淤斑血涂片找到革蘭陰性雙球菌
16. 有關(guān)“減毒活疫苗與滅活疫苗”的敘述，哪幾項是錯誤的：
A.滅活疫苗需接種多次，減毒活疫苗一般只需接種一次
B.滅活疫苗的免疫效果優(yōu)于減毒活疫苗
C.滅活疫苗不能誘導機體產(chǎn)生SIgA，而減毒活疫苗可誘導產(chǎn)生
D.滅活疫苗的保存期比減毒活疫苗長
E.滅活疫苗的免疫力維持時間比減毒活疫苗長
17.人工被動免疫的特點包括:
A.免疫物質(zhì)為類毒素 B.免疫物質(zhì)是丙種球蛋白
C.免疫物質(zhì)是抗毒素 D.可用于緊急預防
E.主要用于治療
18.利用微生物的毒力變異制成的活疫苗不包括：
A.卡介苗 B.麻疹疫苗
C.流腦疫苗 D.脊髓灰質(zhì)炎口服疫苗
E.乙型肝炎疫苗
[思考題]
19．對一疑似傷寒（或流行性腦脊髓膜炎)的患者，你如何進行微生物學檢查？
20．試述核酸疫苗、亞單位疫苗、滅活疫苗和減毒活疫苗的主要區(qū)別。
【A型題】
1.D 2.D 3.E 4.C5.C
6.E 7.D 8.D 9.C 10.D
11.B 12.B
【X型題】
13.A B C D 14.A E 15.A C D E
16.BE 17.B C D E 18.C E
【題1】 標本不能及時送檢時一般應(yīng)置于4℃保存，但少數(shù)不耐寒冷的腦膜炎球菌、淋球菌等要保暖，否則將不能分離出該菌。
【題7】 凡是在形態(tài)和染色性上具有特征的致病菌，直接涂片染色后鏡檢有助于初步診斷。在少數(shù)情況下，對形態(tài)無特征的細菌也可用免疫熒光抗體染色鏡檢進行快速鑒定，其結(jié)果均必須結(jié)合臨床表現(xiàn)方才有診斷價值。
