臨床免疫學(xué)及檢驗(yàn)授課教案-理論課教案:免疫細(xì)胞分離與檢測(cè)

課程名稱

臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)

授課題目（章節(jié)或主題)

免疫細(xì)胞的分離與檢測(cè)

授課教師

王慧

所屬二級(jí)學(xué)院

第一臨床學(xué)院

所屬教研室

檢驗(yàn)系臨床免疫

職稱

講師

授課時(shí)間

2006 年10月 16 日第7 周星期一 第6-7 節(jié)第1 次課

授課時(shí)數(shù)

2學(xué)時(shí)

授課班級(jí)

  醫(yī)學(xué)  檢驗(yàn) 專業(yè)（本科√□ 專科□)   2003   級(jí) 1、2、3  班

教學(xué)課型

理論課√□ 實(shí)驗(yàn)課□ 習(xí)題課□ 討論課□ 實(shí)習(xí)（踐)課□  其它□

教材名稱、作者、出版社及出版時(shí)間

<臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)>，呂世靜主編，中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2004年

教學(xué)目標(biāo)與要求：

1、  掌握內(nèi)容：外周血單個(gè)核細(xì)胞分離的原理及操作要點(diǎn)，淋巴細(xì)胞的純化與亞群分離，T細(xì)胞的特異性抗原的檢測(cè)，T細(xì)胞增殖試驗(yàn)，B細(xì)胞功能的檢測(cè)(溶血空斑試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法)。

2、  熟悉內(nèi)容：吞噬細(xì)胞的分離，細(xì)胞的保存技術(shù)胸、細(xì)胞活力測(cè)定，T、B細(xì)胞數(shù)量的檢測(cè)，T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)，T細(xì)胞體內(nèi)試驗(yàn)，B細(xì)胞功能的檢測(cè)(體內(nèi)試驗(yàn)、增殖試驗(yàn))

3、了解內(nèi)容：NK細(xì)胞功能的檢測(cè)，吞噬細(xì)胞功能檢測(cè)

主要知識(shí)點(diǎn)、重點(diǎn)與難點(diǎn)：

主要知識(shí)點(diǎn)：

一、免疫細(xì)胞的分離與純化：采用何種分離方法，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的及所需細(xì)胞的種類、純度及數(shù)量等要求來(lái)確定。

1、  白細(xì)胞的分離:自然沉降法，聚合物加速沉淀法

2、  外周血單個(gè)核細(xì)胞 的分離：Ficoll、Percoll分層液法

3、  淋巴細(xì)胞的純化：紅細(xì)胞的去除，血小板的去除，單核細(xì)胞和粒細(xì)胞的去除(粘附貼壁法，吸附柱過(guò)濾法、羰基鐵粉吞噬法)

4、 淋巴細(xì)胞亞群的分離：E花環(huán)分離法，尼龍棉柱分離法，親和板結(jié)合分離法，免疫磁珠分離法

5、  吞噬細(xì)胞的分離和收集

6、  淋巴細(xì)胞的保存

二、T細(xì)胞數(shù)量的檢測(cè)：T細(xì)胞表面主要CD抗原的檢測(cè)(間接免疫熒光法，酶免疫組織化學(xué)法， 微量細(xì)胞毒試驗(yàn)， 花環(huán)技術(shù))

三、B細(xì)胞數(shù)量的檢測(cè)：mIg的檢測(cè)，CD抗原檢測(cè)，F(xiàn)c受體和補(bǔ)體受體的檢測(cè)，小鼠紅細(xì)胞受體的檢測(cè)

四、T細(xì)胞功能的檢測(cè)：T細(xì)胞增殖試驗(yàn)(形態(tài)法，同位素計(jì)數(shù)法，MTT比色法)，T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)，體內(nèi)試驗(yàn)

五、B細(xì)胞功能的檢測(cè)：體內(nèi)試驗(yàn)，B細(xì)胞增殖試驗(yàn)，溶血空斑試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法

二、重點(diǎn)：

1 、 免疫細(xì)胞分離及檢測(cè)的原理；

2 、 免疫細(xì)胞活力的檢測(cè)及保存

3、 細(xì)胞增殖試驗(yàn)

三、難點(diǎn)：

1、密度梯度離心法的原理

2、溶血空斑試驗(yàn)

教學(xué)方法（請(qǐng)打√選擇)：

講授法□√　 討論法□ 　演示法□　 自學(xué)輔導(dǎo)法□　 　練習(xí)法(習(xí)題或操作) 　讀書指導(dǎo)法□

ＰＢＬ（以問(wèn)題為中心的教學(xué)法)□√　　案例法□　 其他□

教學(xué)媒體（請(qǐng)打√選擇)：

教材□√ 板書□√ 實(shí)物□  標(biāo)本□  掛圖□ 模型□ 投影□√ 幻燈□   錄像□   CAI（計(jì)算機(jī)輔助教學(xué))□

教學(xué)過(guò)程設(shè)計(jì)（包括講授內(nèi)容、講授方法、時(shí)間分配、媒體選用、板書設(shè)計(jì)等)：

1、概述 (3分鐘)

免疫細(xì)胞檢驗(yàn)-反應(yīng)機(jī)體細(xì)胞免疫功能 ，免疫細(xì)胞的分類（圖示)。

2、第一節(jié)  免疫細(xì)胞的分離與純化（掌握)（35min)

（一)白細(xì)胞的分離（圖示+講授法－一般講授)

（二)外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離（圖示+講授法－重點(diǎn)講授)

（三)淋巴細(xì)胞的純化與亞群分離（講授法－重點(diǎn)講授)

（四)吞噬細(xì)胞的分離（講授法－一般講授)

3、第二節(jié)  淋巴細(xì)胞數(shù)量檢測(cè)（熟悉)(16min)

（一)T細(xì)胞數(shù)量檢測(cè)（講授法－重點(diǎn)講授)

（二)B細(xì)胞數(shù)量檢測(cè)（講授法－重點(diǎn)講授)

4、第三節(jié)  淋巴細(xì)胞功能檢測(cè)（熟悉)(20min)

（一)T細(xì)胞功能檢測(cè)（圖示+講授法payment-defi.com/wsj/－重點(diǎn)講授)

（二)B細(xì)胞功能檢測(cè)（講授法－重點(diǎn)講授)

（三)NK細(xì)胞功能檢測(cè)（講授法－一般講授)

5、第四節(jié)  吞噬細(xì)胞功能檢測(cè)（自學(xué))

（一)中性粒細(xì)胞功能檢測(cè)

（二)巨噬細(xì)胞功能檢測(cè)

6、總結(jié)概括本堂內(nèi)容

提問(wèn)、課堂討論等師生互動(dòng)的設(shè)計(jì)：

1、  什么是免疫細(xì)胞？（顯示電鏡圖片，吸引學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣)

2、  免疫細(xì)胞的功能？

3、  為什么要進(jìn)行免疫細(xì)胞的分離？

4、  為什么分離外周血單個(gè)核細(xì)胞的最佳密度為1.077±0.001？

教學(xué)小結(jié)、復(fù)習(xí)思考及作業(yè)題布置：

歸納、概括本堂學(xué)習(xí)的重點(diǎn)，布置課后思考題

1、試述外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離方法？

2、試述T、B細(xì)胞數(shù)量檢測(cè)技術(shù)類型？

3、試述T、B細(xì)胞功能檢測(cè)技術(shù)原理與類型？

教學(xué)中的創(chuàng)新點(diǎn)（加強(qiáng)基礎(chǔ)與臨床聯(lián)系、外語(yǔ)運(yùn)用、啟發(fā)學(xué)生思維、指導(dǎo)學(xué)生自學(xué)、介紹學(xué)科新進(jìn)展等方面)：

1、課程一開始采用幾種電鏡圖片引起學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣

2、所有專業(yè)名詞均用英文標(biāo)注，并在講授過(guò)程中用英文念出該專業(yè)名詞。

3、第四節(jié)課內(nèi)容安排學(xué)生進(jìn)行自習(xí)，培養(yǎng)學(xué)生自學(xué)的能力。

參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻(xiàn)等)：

《臨床免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn)》人衛(wèi)出版社 第三版 王蘭蘭主編 

《免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn)》人民衛(wèi)生出版社 第二版 陶義訓(xùn)主編

《微生物學(xué)及微生物學(xué)檢驗(yàn)》  唐珊熙 主編  2002年人衛(wèi)出版社

教研室

意 見

教研室主任簽章： 年　　月　　日

教學(xué)后記（即教學(xué)實(shí)施情況總結(jié)分析，在課程結(jié)束后填寫)