臨床免疫學(xué)及檢驗(yàn)授課教案-理論課教案:酶免疫技術(shù)

授課內(nèi)容(章，節(jié))

題 目

第二十章 酶免疫技術(shù)

授課教師單位

廣醫(yī)附一院

教研室

檢驗(yàn)科

職稱

主任技師

授課方式

大課面授

授課時數(shù)

2

授課對象 檢驗(yàn)系2003本科班

授課時間

2006.09.19

授課地點(diǎn)

12-2A

采用教材版本

《臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)》呂世靜主編

教學(xué)目的與要求：

1  掌握：酶免疫測定的基本原理，ELISA技術(shù)類型，試劑

和材料，ELISA技術(shù)要點(diǎn)

2 熟悉：酶標(biāo)抗體的制備，常用酶和底物的理化性質(zhì)，方

法的標(biāo)準(zhǔn)化，酶標(biāo)儀的使用

3  了解：酶免疫技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。

授課內(nèi)容(要點(diǎn))

時間

分配

1  酶免疫技術(shù)和分類概念   （10 min)

2  酶免疫測定的基本原理，ELISA技術(shù)類型，試劑和材料，ELISA技術(shù)要點(diǎn)  （40 min)

3 酶標(biāo)抗體的制備，常用酶和底物的理化性質(zhì)，方法的標(biāo)準(zhǔn)化，酶標(biāo)儀的使用。  （20 min)

4 斑點(diǎn)-ELISA、BAS-ELISA 、免疫層析法和免疫印跡法。（5 min)

5 payment-defi.com/shouyi/ 酶免疫技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。  （5 min) 

2學(xué)時

講課重點(diǎn)和難點(diǎn)（采用何種方式或方法來解決)

重點(diǎn)：酶免疫測定的基本原理，ELISA技術(shù)類型，試劑和材

料，ELISA技術(shù)要點(diǎn)

難點(diǎn)：酶免疫測定的基本原理

介紹學(xué)生閱讀有關(guān)參考文獻(xiàn)，增加知識面，拓展視野，加深理解，易于記憶。

1)周光炎.免疫學(xué)，第六版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002

2)吳健民.免疫學(xué)檢驗(yàn)——理論與臨床.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

3)吳世靜.免疫學(xué)檢驗(yàn)，第二版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

教學(xué)過程設(shè)計(jì)：（授課中對以下內(nèi)容采取的措施)

1  采用提問的方式，復(fù)習(xí)標(biāo)記免疫技術(shù)的概念和分類，帶出酶免疫技術(shù)概念和分類。

2  應(yīng)用板書寫出反應(yīng)方程式，以解釋酶免疫均相法和異相法，讓學(xué)生理解兩種方法的異同點(diǎn)。

3  利用動畫演示均相法的檢測原理：均相酶免疫放大法和克隆酶法，形象展示兩種方法的異同點(diǎn)。

4  通過圖片展示異相法中ELISA法所必備的試劑，用流程圖解釋ELISA操作流程，用表格講授酶與作用的底物及顯色的關(guān)系。

5  用板書、動畫解釋免疫吸附劑、酶標(biāo)記抗體的制備過程，在講授過程中，應(yīng)詳細(xì)解釋每一步的影響因素與注意事項(xiàng)，例如包被的條件、封閉的作用等等。

6 利用直觀圖、動畫等多媒體技術(shù)，解釋ELISA的檢測原理，本內(nèi)容是學(xué)生撐握的難點(diǎn)，重點(diǎn)要展示微觀反應(yīng)原理。

7 利用視頻技術(shù)，展示ELISA檢測技術(shù)的操作過程和檢測流程。

8 用實(shí)際臨床例子，講解ELISA標(biāo)準(zhǔn)操作程序及各個環(huán)節(jié)的影響因素。

9 簡單介紹斑點(diǎn)-ELISA、BAS-ELISA 、免疫層析法和免疫印跡法。

10 簡單介紹酶免疫技術(shù)的進(jìn)展，例如酶免疫測定儀及自動化進(jìn)展。

2．啟發(fā)引導(dǎo)學(xué)生思維：

1)ELISA方法類型、測定原理與熒光免疫技術(shù)中的異同點(diǎn)。

2) 提問學(xué)生：熒光免疫技術(shù)中熒光素與抗體之間的反應(yīng)模式。比較ELISA方法中酶標(biāo)記抗體的制備的異同點(diǎn)。

3) 學(xué)生在充分理解EILSA反應(yīng)原理及特點(diǎn)的基礎(chǔ)上，引導(dǎo)學(xué)生設(shè)計(jì)臨床測定不同標(biāo)志物的方法。

4)針對不同的ELISA反應(yīng)類型，根據(jù)其反應(yīng)原理，臨床中如何防止假陽性和假陰性？

3．采用英語專業(yè)詞匯：

1) 酶免疫技術(shù)（Enzyme Immunoassay,EIA)

2) 酶免疫組織化學(xué)技術(shù)（Enzyme Immunohistochemistry Techenique, EIHCT)

3)辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)

4)堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)

5)b－半乳糖苷酶(b－galactosidase , b－Gal)

6) 酶增強(qiáng)免疫測定技術(shù)（enzyme－multipled  Immunoassay,EMIT)

7) 克隆酶供體免疫分析技術(shù)（cloned enzyme donor Immunoassay,CEDID)

8) 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme－Linked Immunosorbent Assay,ELISA)

9)膜載體的酶免疫測定技術(shù)（Membranced-Based Enzyme Immunoassay)

10) 免疫滲濾試驗(yàn)（Immunofiltration assay,IFA)

11) 免疫層析試驗(yàn)（Immunochromatography assay,ICA)

12) 免疫印跡法（Immunoblotting test,IBT)

13) 生物素－親和素系統(tǒng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Biotin-Avidin System

ELISA)

14) 酶免疫測定的應(yīng)用（Application of Enzyme Immunoassay)

4．指導(dǎo)學(xué)生自學(xué)：

1) 自學(xué)斑點(diǎn)-ELISA、BAS-ELISA 、免疫層析法和免疫印跡法的原理、影響因素及臨床應(yīng)用。

2)自學(xué)酶免疫payment-defi.com/kuaiji/組化技術(shù)的原理及技術(shù)類型。

3)自學(xué)常用酶和底物的選擇。

5．學(xué)科進(jìn)展內(nèi)容：

 簡單扼要介紹酶在自動化測定中（化學(xué)發(fā)光)的應(yīng)用。

課堂提問設(shè)計(jì)：

1 結(jié)合學(xué)生對熒光免疫的理解提問：酶免疫技術(shù)和熒光免疫技術(shù)的基本原

理？

2 結(jié)合學(xué)生對熒光標(biāo)記抗體制備的理解提問：兩種酶標(biāo)記抗體的制備方法

的異同。

3 講授ELISA技術(shù)類型時，提問熒光免疫反應(yīng)的技術(shù)類型，兩者進(jìn)行對比。

教師與學(xué)生互動的設(shè)計(jì)：

講授與提問結(jié)合，以臨床實(shí)例舉例說明問題，由淺入深，引導(dǎo)學(xué)生，提高學(xué)生學(xué)習(xí)興趣，調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)積極性。

教學(xué)方法與手段（采用何種直觀教具和數(shù)量)(請打√)

板書設(shè)計(jì)

1  酶標(biāo)記免疫技術(shù)：Ag+Ab^E-----AgAb^E―――測量E，

或：Ag^E+Ab-----Ag^EAb―――測量E，

2     

免疫吸附劑的制備――抗體固定原理

  封閉的原理

   Y  Y 

3  鉤狀效應(yīng)的原理及圖示

√CAI課件 √動畫  √視頻   √網(wǎng)絡(luò)

其它：

課時具體安排：

1 酶免疫技術(shù)概念、分類，均相免疫技術(shù)的概念分類和原理，8min

2 酶免疫測定的基本原理，ELISA技術(shù)類型和反應(yīng)原理，影響因素20min。

3 ELISA的技術(shù)要點(diǎn)：免疫吸附劑、酶標(biāo)記抗原或抗體、反應(yīng)條件的選擇，

20min

4操作標(biāo)準(zhǔn)化: 加樣、保溫、洗滌、比色和影響ELISA測定的因素20min。

5斑點(diǎn)ELISA、免疫印跡法、重組免疫結(jié)合試驗(yàn)、親和素-生物素系統(tǒng)的原

理、方法類型及影響因素。12min

教學(xué)改革措施（授課形式、課堂提問、思考題、復(fù)習(xí)提綱、測試題)

1)面授與提問結(jié)合，強(qiáng)調(diào)須掌握和熟悉的內(nèi)容，可課后給予思考題及測試題。

2)建議學(xué)生上網(wǎng)，通過我們自行制作的網(wǎng)絡(luò)課件，加深對課程內(nèi)容的理解。

3)建議學(xué)生上網(wǎng)，通過我們的網(wǎng)絡(luò)課件中的“測評系統(tǒng)”進(jìn)行自我測評，通過測

評考核學(xué)生自己對課程內(nèi)容的掌握程度。

4)對尚未理解的內(nèi)容，學(xué)生可在網(wǎng)上直接進(jìn)行提問，教師可在某時間段進(jìn)行問題

解答，通過師生互動，掌握課程內(nèi)容。

輔導(dǎo)的問題與難點(diǎn)：

1酶免疫技術(shù)各類型的反應(yīng)原理。

2 ELISA試劑制造過程對結(jié)果的影響。

備課主要參考資料（圖書、文獻(xiàn))：

1)周光炎.免疫學(xué)，第六版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002

2)吳健民.免疫學(xué)檢驗(yàn)——理論與臨床.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

3)吳世靜.免疫學(xué)檢驗(yàn)，第二版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

授課教師對此次授課的自我評價：

本課是臨床免疫檢驗(yàn)課程中基礎(chǔ)理論的主干課，要求教師有較扎實(shí)標(biāo)記免疫技術(shù)理論基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)。此次講授自己能緊緊抓住酶免疫技術(shù)特點(diǎn)這一主線，重點(diǎn)放在反應(yīng)原理和臨床應(yīng)用的講授上。通過多媒體中的圖片、動畫、視頻播放等更形象地展示抗原抗體反應(yīng)的微觀過程，通過彩圖及流線圖更清晰地講解ELISA的操作過程和影響因素。最后，結(jié)合臨床經(jīng)驗(yàn)介紹實(shí)際項(xiàng)目的檢測。

講授過程邏輯性強(qiáng)，條理性好，語言表達(dá)清晰，能適當(dāng)介紹相關(guān)的專業(yè)英語詞匯。在基礎(chǔ)理論講授的同時，向?qū)W生介紹臨床實(shí)際檢測中結(jié)果的判斷及臨床用藥情況對ELISA檢測的影響，溶血標(biāo)本、細(xì)菌污染標(biāo)本對結(jié)果的影響，以及目前EILSA檢測項(xiàng)目中常涉及到的醫(yī)療法律方面的知識等內(nèi)容，從而擴(kuò)大學(xué)生的知識面。在授課形式上，PPT結(jié)合多媒體播放及適當(dāng)?shù)陌鍟�有機(jī)的結(jié)合，使內(nèi)容更形象、更生動、更具體，學(xué)生更易于理解。同時檢驗(yàn)學(xué)生進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)學(xué)習(xí)，加深對課程內(nèi)容的理解。

學(xué)生評價：

條理清楚,邏輯性強(qiáng),講授深入淺出,能將晦澀難懂的內(nèi)容講授得通俗易懂.講課形式生動活潑,并結(jié)合臨床實(shí)際,使學(xué)生更加容易理解.加入新進(jìn)展內(nèi)容,擴(kuò)大知識面。

教研室主任評價：

教案書寫要求：文字通暢，書寫工整或電腦打印。