一、選擇題 1． 酶促反應(yīng)的初速度不受哪一因素影響（ ) A．[S] B．[E] C．[pH] D．時(shí)間 E．溫度 2．對(duì)于一個(gè)符合米氏方程的酶來(lái)說(shuō)：當(dāng)[S]=Km；[I]=k1時(shí)，I為競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，則υ為（ ) A．Vmax×2/3 B．Vmax×1/3 C．Vmax×1/2 D．Vmax×1/4 E．Vmax×1/6 3．下列有關(guān)某一種酶的幾個(gè)同工酶的陳述哪個(gè)是正確的?（ ) A．由不同亞基組成的寡聚體 B．對(duì)同一底物具有不同專(zhuān)一性 C．對(duì)同一底物具有相同的Km值 D．電泳遷移率往往相同 E．結(jié)構(gòu)相同來(lái)源不同 4．別構(gòu)酶與不同濃度的底物發(fā)生作用，常呈S形曲線(xiàn)，這說(shuō)明（ ) A．別構(gòu)酶是寡聚體 B．別構(gòu)酶催化幾個(gè)獨(dú)立的反應(yīng)并最后得到終產(chǎn)物 C．與單條肽鏈的酶相比，別構(gòu)酶催化反應(yīng)的速度較慢 D．別構(gòu)酶結(jié)合一個(gè)底物后，將促進(jìn)它與下一個(gè)底物的結(jié)合，并增強(qiáng)酶活力 E．產(chǎn)物的量在不斷增加 5．關(guān)于米氏常數(shù)Km的說(shuō)法，哪個(gè)是正確的（ ) A．飽和底物濃度時(shí)的速度 B．在一定酶濃度下，最大速度的一半 C．飽和底物濃度的一半 D．速度達(dá)最大速度半數(shù)時(shí)的底物濃度 E．降低一半速度時(shí)的抑制劑濃度 6．如果要求酶促反應(yīng)υ=Vmax×90%，則[S]應(yīng)為Km的倍數(shù)是（ ) A．4．5 B．9 C．8 D．5 E．90 7．在下面酶促反應(yīng)中的Vmax為（ ) A．K3[Et] B．K2/K3 C．K2/K1 D．（K2+K3)/K1 E．都不對(duì) 8．酶的純粹競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑具有下列哪種動(dòng)力學(xué)效應(yīng)?（ ) A．Vmax不變，Km增大 B．Vmax不變，Km減少 C．Vmax增大，Km不變 D．Vmax減少，Km不變 E．Vmax和Km都不變 9．作為催化劑的酶分子，具有下列哪一種能量效應(yīng)?（ ) A．增高反應(yīng)活化能 B．降低反應(yīng)活化能 C．增高產(chǎn)物能量不平 D．降低產(chǎn)物能量不平 E．降低反應(yīng)自由能 10．酶分子經(jīng)磷酸化作用進(jìn)行的化學(xué)修飾主要發(fā)生在哪個(gè)氨基酸上?（ ) A．Phe B．Cys C．Lys D．Trp E．Ser 11．下列哪種酶能使水加到碳-碳雙鍵上，而又不使鍵斷裂?（ ) A．水化酶 B．酯酶 C．水解酶 D．羥化酶 E．脫氫酶 12．下列哪種腸胃道消化酶不是以無(wú)活性的酶原方式分泌的?（ ) A．核糖核酸酶 B．胰蛋白酶 C．糜蛋白酶 D．羧肽酶 E．胃蛋白酶 13．下面關(guān)于酶的描述，哪一項(xiàng)不正確?（ ) A．所有的蛋白質(zhì)都是酶 B．酶是生物催化劑 C．酶是在細(xì)胞內(nèi)合成的，但是可以在細(xì)胞外發(fā)揮催化功能 D．酶具有專(zhuān)一性 E．酶在強(qiáng)堿、強(qiáng)酸條件下會(huì)失活 14．下列關(guān)于牛胰蛋白酶的解釋?zhuān)囊豁?xiàng)是錯(cuò)誤的?（ ) A．它是一種蛋白質(zhì) B．它可以催化蛋白質(zhì)氧化分解 C．它來(lái)自牛的胰臟 D．它發(fā)揮作用時(shí)，對(duì)底物具有選擇性 E．不需要輔酶 15．測(cè)定酶活力時(shí)，下列條件哪個(gè)不對(duì)（ ) A．[S]>>[E] B．[S]=[Et] C．P→O D．測(cè)初速度 E．最適pH 16．在測(cè)定酶活力時(shí)，用下列哪種方法處理酶和底物才合理?（ ) A．其中一種用緩沖液配制即可 B．分別用緩沖液配制，然后混合進(jìn)行反應(yīng) C．先混合，然后保溫進(jìn)行反應(yīng) D．其中一種先保溫，然后再進(jìn)行反應(yīng) E．分別用緩沖液配制，再預(yù)保溫兩者，最后混合進(jìn)行反應(yīng) 17．下列哪一種酶是簡(jiǎn)單蛋白質(zhì)?（ ) A．牛胰核糖核酸酶 B．丙酮酸激酶 C．乳酸脫氫酶 D．烯醇化酶 E．醛縮酶 18．下列哪一項(xiàng)不是輔酶的功能?（ ) A．轉(zhuǎn)移基團(tuán) B．傳遞氫 C．傳遞電子 D．某些物質(zhì)分解代謝時(shí)的載體 E．決定酶的專(zhuān)一性 19．下列關(guān)于酶活性部位的描述，哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的?（ ) A．活性部位是酶分子中直接與底物結(jié)合，并發(fā)揮催化功能的部位 B．活性部位的基團(tuán)按功能可分為兩類(lèi)：一類(lèi)是結(jié)合基團(tuán)，一類(lèi)是催化基團(tuán) C．酶活性部位的基團(tuán)可以是同一條肽鏈但在一級(jí)結(jié)構(gòu)上相距很遠(yuǎn)的基團(tuán) D．不同肽鏈上的有關(guān)基團(tuán)不能構(gòu)成該酶的活性部位 E．酶的活性部位決定酶的專(zhuān)一性 20．下列關(guān)于乳酸脫氫酶的描述，哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的?（ ) A．乳酸脫氫酶可用LDH表示 B．它是單體酶 C．它的輔基是NAD+ D．它有六種結(jié)構(gòu)形式 E．乳酸脫氫酶同工酶之間的電泳行為不盡相同 21．下列哪一項(xiàng)不是酶具有高催化效率的因素?（ ) A．加熱 B．酸堿催化 C．“張力”和“形變” D．共價(jià)催化 E．鄰近定位效應(yīng) 22．當(dāng)[S]=4Km時(shí)，υ=（ ) A．Vmax B．Vmax×4/3 C．Vmax×3/4 D．Vmax×4/5 E．Vmax×6/5 23．能夠與DIEP結(jié)合的氨基酸殘基是以下哪一種?（ ) A．Cys B．Ser C．Pro D．Lys E．Glu 24．下列哪一種抑制劑不是琥珀酸脫氫酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑?（ ) A．乙二酸 B．丙二酸 C．丁二酸 D．α-酮戊二酸 E．碘乙酸 25．下列關(guān)于別構(gòu)酶的敘述，哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的?（ ) A．所有別構(gòu)酶都是多聚體，而且亞基數(shù)目往往是偶數(shù) B．別構(gòu)酶除了活性部位外，還含有調(diào)節(jié)部位 C．亞基與底物結(jié)合的親和力因亞基構(gòu)象不同而變化 D．亞基構(gòu)象改變時(shí)，要發(fā)生肽鍵斷裂的反應(yīng) E．酶構(gòu)象改變后，酶活力可以升高也可以降低 26．下列哪一項(xiàng)不是Km值的功能（ ) A．Km值是酶的特征物理常數(shù)，可用于鑒定不同的酶 B．Km值可以表示酶與底物之間的親和力，Km值越小、親和力越大 C．Km值可以預(yù)見(jiàn)系列反應(yīng)中哪一步是限速反應(yīng) D．用Km值可以選擇酶的最適底物 E．比較Km值可以估計(jì)不同酶促反應(yīng)速度 27．磺胺醫(yī)學(xué)三基藥物治病原理是（ ) A．直接殺死細(xì)菌 B．細(xì)菌生長(zhǎng)某必需酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制性劑 C．細(xì)菌生長(zhǎng)某必需酶的非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑 D．細(xì)菌生長(zhǎng)某必需酶的不可逆抑制劑 E．分解細(xì)菌的分泌物 28．有機(jī)磷農(nóng)藥作為酶的抑制劑是作用于酶活性中心的（ ) A．巰基 B．羥基 C．羧基 D．咪唑基 E．氨基 29．丙二酸對(duì)琥珀酸脫氫酶的影響是屬于（ ) A．產(chǎn)物反饋抑制 B．產(chǎn)物阻遏抑制 C．非競(jìng)爭(zhēng)性抑制 D．競(jìng)爭(zhēng)性抑制 E．不可逆抑制 30．酶的不可逆抑制的機(jī)制是由于抑制劑（ ) A．使酶蛋白變性 B．與酶的催化中心以共價(jià)鍵結(jié)合 C．與酶的必需基團(tuán)結(jié)合 D．與活性中心的次級(jí)鍵結(jié)合 E．與酶表面的極性基團(tuán)結(jié)合 31．谷丙轉(zhuǎn)氨酶的輔酶是（ ) A．NAD+ B．NADP+ C．磷酸吡哆醛 D．煙酸 E．核黃素 32．酶的活性中心是指（ ) A．酶分子上的幾個(gè)必需基團(tuán) B．酶分子與底物結(jié)合的部位 C．酶分子結(jié)合底物并發(fā)揮催化作用的關(guān)鍵性三維結(jié)構(gòu)區(qū) D．酶分子中心部位的一種特殊結(jié)構(gòu) E．酶分子催化底物變成產(chǎn)物的部位 33．酶原激活的實(shí)質(zhì)是（ ) A．激活劑與酶結(jié)合使酶激活 B．酶蛋白質(zhì)的變構(gòu)效應(yīng) C．酶原分子一級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變從而形成或暴露出酶的活性中心 D．酶原分子的空間構(gòu)象發(fā)生了變化而一級(jí)結(jié)構(gòu)不變 E．以上都不對(duì) 34．同工酶的特點(diǎn)是（ ) A．催化作用相同，但分子組成和理化性質(zhì)不同的一類(lèi)酶 B．催化相反應(yīng)，分子組成相同，但輔酶不同的一類(lèi)酶 C．催化同一底物起不同反應(yīng)的酶的總稱(chēng) D．多酶體系中酶組分的統(tǒng)稱(chēng) E．催化作用，分子組成及理化性質(zhì)相同，但組織分布不同的酶 35．變構(gòu)酶的底物濃度曲線(xiàn)呈S形，它說(shuō)明（ ) A．此變構(gòu)酶為具負(fù)性同效應(yīng)的酶 B．此變構(gòu)酶中，底物分與其中一亞基結(jié)合后能促進(jìn)其他亞基與底物的結(jié)合 C．變構(gòu)酶是米氏酶的一種特例 D．變構(gòu)酶所催化的反應(yīng)包括一系列步驟 E．此變構(gòu)酶的多個(gè)底物分子同時(shí)與酶快速結(jié)合 36．酶的高效率在于（ ) A．增加活化能 B．降低反應(yīng)物的能量水平 C．增加反應(yīng)物的能量水平 D．降低活化能 E．以上都不對(duì) 37．酶促反應(yīng)的初速度（ ) A．與[S]成正比 B．與[S無(wú)關(guān)] C．與Km成正比 D．與[I]成正比 E．與溫度成正比 38．米氏常數(shù)在推導(dǎo)過(guò)程中引入了哪項(xiàng)假設(shè)?（ ) A．酶濃度為底物濃度的一半 B．由于ES在存在使底物初始濃度降低 C．由于酶濃度很大，所以[E]基本不變 D．忽略反應(yīng)ES→E+S的存在 E．由于P→O，所以不考慮反應(yīng)E+P→ES的存在 39．將米氏方程改為雙倒數(shù)方程后（ ) A．1/υ與1/[S]成反比 B．以1/υ對(duì)1/[S]作圖，其橫軸為1/[S] C．υ與[S]成正比 D．Km值在縱軸上 E．Vmax值在縱軸上 40．競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用特點(diǎn)是指抑制劑（ ) A．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心 B．與酶的產(chǎn)物競(jìng)爭(zhēng)酶的活性 C．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)非必需基團(tuán) D．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)輔酶 E．與其他抑制競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心 二、填空題 1．測(cè)定酶活力的主要原則是在特定的 、 條件下，測(cè)定酶促反應(yīng)的 速度。 2．使酶具有高催化效應(yīng)的因素是 、 、 、 和 。 3．全酶由 和 組成。 4．酶對(duì) 的 性稱(chēng)為酶的專(zhuān)一性，一般可分為 、 和 。 5．L-精氨酸只作用于L-精氨酸，而對(duì)D-精氨酸無(wú)作用，因?yàn)榇嗣妇哂?U> 專(zhuān)一性。 6．同工酶是一類(lèi) 相同、 不同的一類(lèi)酶。 7．醛縮酶屬于第 大類(lèi)的酶。 8．磺胺類(lèi)藥物能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，因?yàn)樗?U> 的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物，能 性地抑制 酶活性。 9．pH對(duì)酶活力的影響原因有 和 。 10．在某一酶溶液中加入GSH能提高此酶活力，那么可以推測(cè) 基可能是酶活性中心的必需基團(tuán)。 11．乳酸脫氫酶是以 輔酶的，它的酶蛋白由 個(gè)亞基構(gòu)成，其亞基可分 型和 型，根據(jù)不同類(lèi)型亞基的組合，乳酸脫氫酶可分為 種同工酶。 12．目前認(rèn)為酶促反應(yīng)的機(jī)制是 。 13．如果一個(gè)酶對(duì)A、B、C三種底的米氏常數(shù)分別為Kma、Kmb和Kmc，且Kma>Kmb>Kmc，則此酶的最適底物是 ，與酶親和力最小的底物是 。 14．欲使酶促反應(yīng)速度達(dá)到最大速度的90%，此時(shí)底物濃度應(yīng)是此酶Km值的 倍。 15．調(diào)節(jié)酶類(lèi)一般分為(主要)兩大類(lèi) 和 。 16．激酶是一類(lèi)催化 的酶。 17．影響酶促反應(yīng)速度的因素有 。 18．依酶促反應(yīng)類(lèi)型，酶可以分為六大類(lèi)為 。 19．pH對(duì)酶活力的關(guān)系是一種 曲線(xiàn)，其原因是 。 20．酶經(jīng)分離提純后保存方法是 。 21．酶的專(zhuān)一性分為兩大類(lèi) 。 22．根據(jù)調(diào)節(jié)物分子不同，payment-defi.com/job/別構(gòu)效應(yīng)分為 和 。根據(jù)調(diào)節(jié)物使別構(gòu)酶反應(yīng)速度對(duì)[S]敏感性不同分為 和 。 三、是非判斷題 1．一般酶和底物大小差不多。 2．酶的分類(lèi)是依據(jù)其催化反應(yīng)類(lèi)型。 3．酶影響它所催化反應(yīng)的平衡。 4．酶影響它所催化反應(yīng)的平衡的到達(dá)時(shí)間。 5．如果有一個(gè)合適的酶的存在，達(dá)到化學(xué)能閾所需的活化能就減少。 6．在酶已被飽和的情況下，底物濃度地增加能使酶促反應(yīng)初速度增加。 7．當(dāng)[ES]復(fù)合物的量增加時(shí)，酶促反應(yīng)速度也增加。 8．酶促反應(yīng)的米氏常數(shù)與所用的底物無(wú)關(guān)。 9．在極低底物濃度時(shí)，酶促反應(yīng)初速度與底物濃度成正比。 10．如果已知在給定酶濃度時(shí)的Km和Vmax，則可計(jì)算在任何底物濃主度時(shí)的酶促反應(yīng)初速度。 11．對(duì)于酶的催化活性來(lái)說(shuō)，酶蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)是必需的，而與酶蛋白的構(gòu)象關(guān)系很大。 12．在酶的活性部位，僅僅只有側(cè)鏈帶電荷的氨基酸殘基直接參與酶的催化反應(yīng)。 13．測(cè)定酶活時(shí)，一般測(cè)定+ΔP比測(cè)定-ΔS更為準(zhǔn)確。 14．在酶催化過(guò)程中，[ES]復(fù)合物的形成是可逆的。 15．1/Km愈大，表明酶與底物的親和力越小。 16．輔酶、輔基在酶催化作用中，主要是協(xié)助酶蛋白的識(shí)別底物。 17．變構(gòu)劑與酶的催化部位結(jié)合后使酶的構(gòu)象改變，從而改變酶的活性，稱(chēng)為酶為變構(gòu)作用。 18．酶原激活過(guò)程實(shí)際就是酶活性中心形成或暴露的過(guò)程。 19．酶經(jīng)固定化后，一般穩(wěn)定性增加。 20．作為輔因子的金屬離子，一般并不參與酶活性中心的形成。 四、名詞解釋題 1．全酶 2．酶的輔助因子 3．輔酶的輔基 4．酶活力 5．酶的活力單位(U) 6．酶的比活力 7．酶的轉(zhuǎn)換數(shù)：Kcat 8．米氏常數(shù)Km 9．激活劑 10．抑制劑 11．不可逆抑制作用與可逆抑制作用 12．競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 13．非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 14．酶的專(zhuān)一性 15．酶的活性中心 16．多酶體系 17．調(diào)節(jié)酶 18．別構(gòu)效應(yīng) 19．別構(gòu)酶 20．酶原激活 21．寡聚酶 22．同工酶 23．誘導(dǎo)酶
五、問(wèn)答及計(jì)算題 1．在酶的純化過(guò)程中通常會(huì)丟失一些活力，但偶爾亦可能在某一純化步驟中酶活力可超過(guò)100%，產(chǎn)生這種活力增高的原因是什么？ 2．試述使用酶作催化劑的優(yōu)缺點(diǎn)。 3．如果你從刀豆中得到了一種物質(zhì)，很可能是脲酶，你怎樣確定它是蛋白質(zhì)，如何判斷它是否是酶？ 4．試簡(jiǎn)述Km的意義及應(yīng)用。 5．當(dāng)[S]=0.5Km ；[S]=4Km； [S]=9Km；[S]=99Km時(shí)，計(jì)算υ占Vmax的百分比。 6．某酶制劑2mL內(nèi)含脂肪10mg，糖20mg，蛋白質(zhì)25mg，其酶活力與市售酶商品（每克含2000酶活力單位)10mg相當(dāng)，問(wèn)酶制劑的比活力是多少？ 7．酶定量測(cè)定中要控制哪些條件？為什么？ 8．何謂米氏常數(shù)，它的意義是什么？ 9．米氏方程的實(shí)際意義和用途是什么？它有什么局限性？ 10．別構(gòu)酶有何特性？ 參考答案： 一、選擇題 1、D 2、B 3、A 4、D 5、D 6、B 7、A 8、A 9、B 10、E 11、A 12、A 13、A 14、B 15、B 16、E 17、A 18、E 19、D 20、B 21、A 22、D 23、B 24、E 25、D 26、E 27、B 28、B 29、D 30、B 31、C 32、C 33、C 34、A 35、B 36、D 37、A 38、E 39、B 40、A 二、填空題 1．溫度；pH；初 2．酸堿催化；共價(jià)催化；鄰近定向效應(yīng)；分子張力的形成；低介電區(qū)的形成 3．酶蛋白；輔助因子 4．底物；選擇性；立體異構(gòu)專(zhuān)一性；絕對(duì)專(zhuān)一性；相對(duì)專(zhuān)性 5．立體異構(gòu) 6．功能；組成或結(jié)構(gòu) 7．四 8．對(duì)氨基苯甲酸；競(jìng)爭(zhēng)；二氫葉酸合成酶 9．影響酶和底物的基團(tuán)解離；使酶變性 10．巰基(-SH) 11．NAD；四；M；H；五 12．通過(guò)誘導(dǎo)契合過(guò)程來(lái)降低反應(yīng)的活化能 13．C；A 14．9 15．別構(gòu)酶；共價(jià)調(diào)節(jié)酶 16．磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移并伴隨能量轉(zhuǎn)移反應(yīng) 17． [S]，[E]，pH，溫度，激活劑，抑制劑 18．氧化還原酶類(lèi)；移換酶類(lèi)；水解酶類(lèi)；裂合酶類(lèi)；異構(gòu)酶類(lèi)；合成酶類(lèi) 19．鐘罩形；酶在最適pH條件下活力最大，高于或低于最適pH時(shí)，酶活力均下降 20．濃縮低溫保存；冰凍干燥保存 21．結(jié)構(gòu)專(zhuān)一性和立體異構(gòu)專(zhuān)一性 22. 同促效應(yīng)；異促效應(yīng)；正協(xié)同效應(yīng)；負(fù)協(xié)同效應(yīng) 三、是非判斷題 1．錯(cuò) 2．對(duì) 3．錯(cuò) 4．對(duì) 5．對(duì) 6．錯(cuò) 7．對(duì)8．錯(cuò) 9．對(duì) 10．對(duì) 11．錯(cuò) 12．錯(cuò) 13．對(duì) 14．對(duì) 15．錯(cuò) 16．錯(cuò) 17．錯(cuò) 18．對(duì) 19．對(duì) 20．錯(cuò) 四、名詞解釋題 1．全酶 是酶的一種，由酶蛋白和輔助因子構(gòu)成的復(fù)合物稱(chēng)為全酶。 2．酶的輔助因子 構(gòu)成全酶的一個(gè)組分，主要包括金屬離子及水分子有機(jī)化合物，主要作用是在酶促反應(yīng)中運(yùn)輸轉(zhuǎn)移電子、原子或某些功能基的作用。 3．輔酶的輔基 大多數(shù)情況下，可通過(guò)透析或其他物理方法從全酶中除去，與酶蛋白結(jié)合松弛的輔助因子叫輔酶。以共價(jià)健和酶蛋白牢固結(jié)合，不易用透析等方法除去的輔助因子叫輔基。二者的區(qū)別只在于與酶蛋白結(jié)合的牢固程度不同，無(wú)嚴(yán)格絕對(duì)的界限。 4．酶活力 也稱(chēng)酶活性 ，指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力，可用在一定條件下，它所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的速度表示。單位：濃度/單位時(shí)間。 5．酶的活力單位(U) 酶活力的度量單位。1961年國(guó)際酶學(xué)委員會(huì)規(guī)定：1個(gè)酶活力單位是指特定條件下，在1min內(nèi)能轉(zhuǎn)化1μmol底物的酶量，特定條件：溫度25℃，其他條件采用最適，另外也存在人們普通采用的其他酶活力單位。 6．酶的比活力 即酶含量的多少，定為每毫克酶蛋白所具有的酶的活力單位，一般用U/mg蛋白表示。 7．酶的轉(zhuǎn)換數(shù)：Kcat Kcat指每秒鐘每個(gè)酶分子轉(zhuǎn)換底物的微摩爾數(shù)，代表酶的催化效率。 8．米氏常數(shù)Km 米氏常數(shù)Km:是米氏酶的特征常數(shù)之一。在反應(yīng)中Km=(K2+K3)/K1，Km值的物理意義在于它是當(dāng)酶促反應(yīng)速度達(dá)到最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度。單位是：mol/L等。 9．激活劑 凡能提高酶活性的物質(zhì)均稱(chēng)為激活劑。其中大部分為離子或簡(jiǎn)單的有機(jī)化合物，另外還有對(duì)酶原起激活作用的具有蛋白質(zhì)性質(zhì)的大分子物質(zhì)。 10．抑制劑 能使酶分子上的某些必需基團(tuán)(主要指酶活性中心上的一些基團(tuán))發(fā)生變化，從而引起酶活力下降，甚至喪失，致使酶反應(yīng)速度降低的物質(zhì)。 11．不可逆抑制作用與可逆抑制作用 前者是某些抑制劑通常以共價(jià)鍵與酶蛋白中的基結(jié)合，而使酶失活，不能用透析、超濾等物理方法除去的抑制作用。后者則指抑制劑以非共價(jià)鍵與酶蛋白中的基團(tuán)結(jié)合，可用透析等物理方法除去而使酶重新恢復(fù)活性。 12．競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑因具有與底物相似的結(jié)構(gòu)所以與底物競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心，與酶形成可逆的EI復(fù)合物，而使EI不能與S結(jié)合，從而降低酶反應(yīng)速度的可逆抑制作用。這種抑制作用可通過(guò)增加底物濃度來(lái)解除。 13．非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑與酶活性中心以外的基團(tuán)結(jié)合，形成EI或ESI復(fù)合物，從而不能進(jìn)一步形成E和P，因此使酶反應(yīng)速度降低的可逆抑制作用，不能通過(guò)增加底物濃度的方法解除。 14．酶的專(zhuān)一性 即特異性，是指酶催化特定的底物發(fā)生一定的化學(xué)反應(yīng)生成特定產(chǎn)物的特性。 15．酶的活性中心 指在一級(jí)結(jié)構(gòu)上可能相距甚遠(yuǎn)，甚至位于不同肽鏈上的少數(shù)幾個(gè)氨基酸殘基或這些殘基上的基團(tuán)通過(guò)肽鏈的盤(pán)繞折疊而在三維結(jié)構(gòu)上相互靠近，形成一個(gè)能與底物結(jié)合并催化其形成產(chǎn)物的位于酶蛋白表面的特化的空間區(qū)域。對(duì)需要輔酶的酶來(lái)說(shuō)，輔酶分子 或其上的某一部分結(jié)構(gòu)常是活性中心的組成部分。 16．多酶體系 在細(xì)胞內(nèi)的某一代謝過(guò)程中，由幾個(gè)酶形成的反應(yīng)鏈體系，稱(chēng)為多酶體系。一般分為可溶性的、結(jié)構(gòu)化的和在細(xì)胞結(jié)構(gòu)上有定位關(guān)系的三種類(lèi)型。 17．調(diào)節(jié)酶 在多酶體系中某些酶因其本身活性受到嚴(yán)格的調(diào)節(jié)控制從而對(duì)代謝反應(yīng)起調(diào)節(jié)作用，此類(lèi)酶統(tǒng)稱(chēng)為調(diào)節(jié)酶。 18．別構(gòu)效應(yīng) 調(diào)節(jié)物(或效應(yīng)物)與別構(gòu)酶酶分子的別構(gòu)中心結(jié)合后，誘導(dǎo)出或穩(wěn)定住酶分子的某種構(gòu)象，使酶活性中心對(duì)底物的結(jié)合與催化作用受到影響，從而調(diào)節(jié)酶的反應(yīng)速度及代謝過(guò)程，此效應(yīng)稱(chēng)為酶的別構(gòu)效應(yīng)。 19．別構(gòu)酶 一種一般具多個(gè)亞基，在結(jié)構(gòu)上除具有酶的活性中心外，還具有可結(jié)合調(diào)節(jié)物的別構(gòu)中心的酶，活性中心負(fù)責(zé)酶對(duì)底物的結(jié)合與催化，別構(gòu)中心負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)酶反應(yīng)速度。 20．酶原激活 某些酶先以無(wú)活性的酶原形式合成及分泌，然后在到達(dá)作用部位時(shí)由另外的物質(zhì)作用，使其失去部分肽段從而形成或暴露活性中心形成有活性的酶分子的過(guò)程。如胃蛋白酶原是無(wú)活性的，它在胃液中經(jīng)胃酸的作用或有活性的胃蛋白酶的作用變成有活性的胃蛋白酶分子。 21．寡聚酶 由兩個(gè)或兩個(gè)以上亞基組成的酶分子，相對(duì)分子質(zhì)量一般從35000到幾百萬(wàn)以上的酶。 22．同工酶 指催化同一種化學(xué)反應(yīng)，而其酶蛋白本身的分子結(jié)構(gòu)組成及理化性質(zhì)有所不同的一組酶。 23．誘導(dǎo)酶 指當(dāng)生物體或細(xì)胞中加入特定誘導(dǎo)物后，而誘導(dǎo)產(chǎn)生的酶，稱(chēng)為誘導(dǎo)酶。它的含量要誘導(dǎo)物誘導(dǎo)下顯著增高，這種誘導(dǎo)物往往是該酶的底物或底物類(lèi)似物。 五、問(wèn)答及計(jì)算題 1．在酶的純化過(guò)程中通常會(huì)丟失一些活力，但偶爾亦可能在某一純化步驟中酶活力可超過(guò)100%，產(chǎn)生這種活力增高的原因是什么？ 答：在酶的純化過(guò)程中，如果某一純化步驟中酶活力超過(guò)了100%，則很有可能是由于此酶的激活劑(包括別構(gòu)激活劑)的加入或抑制劑的丟失所造成的。這些激活劑或抑制劑你可能原先并不知道。 2．試述使用酶作催化劑的優(yōu)缺點(diǎn)。 答：優(yōu)點(diǎn)：①專(zhuān)一性高，副反應(yīng)很少，后處理容易。 ②催化效率高，酶用量少。 ③反應(yīng)條件溫和，可以在近中性的水溶液中進(jìn)行反應(yīng)，不需要高溫、高壓。 ④酶的催化活性可以進(jìn)行人工控制 缺點(diǎn)：①酶易失活，酶反應(yīng)的溫度、pH、離子強(qiáng)度等要很好控制。 ②酶不易得到，價(jià)格昂貴。 ③酶不易保存。 3．如果你從刀豆中得到了一種物質(zhì)，很可能是脲酶，你怎樣確定它是蛋白質(zhì)，如何判斷它是否是酶？ 答：第一步：首先判斷此物質(zhì)是否是蛋白質(zhì)，如用雙縮脲反應(yīng)或其他蛋白質(zhì)顯色反應(yīng)來(lái)進(jìn)行鑒定。另外也可以用酸或堿水解，同時(shí)用甲醛滴定法來(lái)檢測(cè)水解程度(此物質(zhì)若是蛋白質(zhì)則應(yīng)有蛋白質(zhì)的顯色反應(yīng)，酸堿水解時(shí)游離氨基酸的含量隨時(shí)間而升高)。 第二步：將此蛋白質(zhì)加入到含有尿素的緩沖體系中進(jìn)行催化反應(yīng)，用奈氏試劑檢測(cè)是否有氨的生成。將此蛋白質(zhì)加熱后再作此反應(yīng)，檢測(cè)是否還有氨的生成(此蛋白質(zhì)若是脲酶則應(yīng)有氨的生成。將此蛋白質(zhì)加熱后再作此反應(yīng)，檢測(cè)是否還有氨的生成(此蛋白質(zhì)若是脲酶則應(yīng)有氨的生成，而蛋白質(zhì)加熱后則不再有氨的生成)。 4．試簡(jiǎn)述Km的意義及應(yīng)用。 答：Km值是當(dāng)酶促反應(yīng)速度達(dá)到最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度。首先當(dāng)Km值近似等于K2/K1時(shí)，它代表了酶與底物的親和力的大��；利用酶對(duì)不同底物的不同Km值，我們可以找出酶的最適底物。其次，Km值是酶的一種特征性常數(shù)；利用它我們可以判斷區(qū)分酶的種類(lèi)。最后，利用Km值可以換算[S]與υ的關(guān)系。 5．當(dāng)[S]=0.5Km ；[S]=4Km； [S]=9Km；[S]=99Km時(shí)，計(jì)算υ占Vmax的百分比。 答：33.3% Vmax；80% Vmax；90% Vmax；99．01% Vmax。 6．某酶制劑2mL內(nèi)含脂肪10mg，糖20mg，蛋白質(zhì)25mg，其酶活力與市售酶商品（每克含2000酶活力單位)10mg相當(dāng)，問(wèn)酶制劑的比活力是多少？ 答：比活力=總活力/mg蛋白 市售商品比活力為2000U/1000mg=2U/mg 商品酶總活力為10mg×2(U/mg)=20U 其比活力為：20U/25mg=0．8U/mg蛋白 7．酶定量測(cè)定中要控制哪些條件？為什么？ 答：酶量不能用重量或濃度表示，而用酶活力(單位)來(lái)表示。酶活力單位的定義是在一定條件下，一定時(shí)間內(nèi)將一定量的底物轉(zhuǎn)為產(chǎn)物的酶量定為一個(gè)單位。酶活力測(cè)定可以測(cè)定底物的單位時(shí)間消耗量，更常用的是產(chǎn)物的單位時(shí)間的產(chǎn)量，測(cè)定結(jié)果是否真實(shí)反映酶活力與測(cè)定時(shí)的酶促反應(yīng)條件是否適宜有關(guān)。 ①對(duì)pH的要求，同一種酶在不同的pH下測(cè)得的反應(yīng)速度不同，最適pH時(shí)酶的活力最大。pH之所以影響酶活力是因?yàn)槊甘堑鞍踪|(zhì)，過(guò)酸過(guò)堿都會(huì)使酶變性，pH既影響酶活性中心基團(tuán)的解離狀態(tài)，又影響底物的解離，從而影響催化活性，最適pH能保證酶本身的穩(wěn)定性及催化活性。但酶的最適pH不是一個(gè)特征常數(shù)，它因不同的的酶、底物、反應(yīng)類(lèi)型及緩沖液成分而不同。 ②對(duì)溫度的要求。酶對(duì)溫度最敏感，但一般不在酶活性最大的最適溫度下進(jìn)行，這是因?yàn)闇y(cè)定酶活力需要一定時(shí)間，而在最適溫度下，酶的穩(wěn)定性差，很短時(shí)間內(nèi)就會(huì)變性，因此，通常在20～50℃測(cè)定，且因酶的Q10在1～2，每改變1，反應(yīng)速度就差10%，所以應(yīng)把溫度控制在正負(fù)0．1℃的范圍內(nèi)。 ③對(duì)底物濃度的要求，要求底物濃度大大超過(guò)酶濃度，使酶達(dá)到飽和從而達(dá)到最大速度。 ④對(duì)酶濃度的要求，在測(cè)定酶活力時(shí)，要求酶濃度遠(yuǎn)小于底物濃度，從而保證酶促反應(yīng)速度與酶濃度成正比，這是測(cè)定酶活力的依據(jù)。 ⑤對(duì)反應(yīng)時(shí)間則要求測(cè)定反應(yīng)初速度，測(cè)定酶活力要求時(shí)間越短越好，一般反應(yīng)恰當(dāng)?shù)某潭仁侵傅孜餄舛认牟怀^(guò)5%，以保證酶活力與速度成正比的直線(xiàn)關(guān)系。這是因?yàn)殡S時(shí)間的延長(zhǎng)產(chǎn)物積累，加速了逆反應(yīng)，酶活性穩(wěn)定下降，底物濃度降低。 8．何謂米氏常數(shù)，它的意義是什么？ 答： ①米氏常數(shù)(Km值)是酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)中間產(chǎn)物理論中的一個(gè)常數(shù)，根據(jù)中間產(chǎn)物酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)原理，酶促反應(yīng)過(guò)程可作如下表達(dá) ，1961年國(guó)際酶學(xué)委員會(huì)規(guī)定：修改后的米氏常數(shù)為上式三個(gè)解離常數(shù)的復(fù)合函數(shù)，即Km=(K2+K3)/K1。因此Km可看作是ES形成和解離趨勢(shì)的代表。在特殊情況下，Km在數(shù)值上等于酶促反應(yīng)速度達(dá)到Vmax/2時(shí)的[S]，單位mol/L。Km值在K3<<K2時(shí)，與K3涵義相同。 ②Km的意義：Km是酶的特征常數(shù)，即當(dāng)?shù)孜镆欢ǎ琾H溫度和離子強(qiáng)度等因素不變時(shí)，Km具常數(shù)意義，其值一般在10-6至10-2的數(shù)量級(jí)范圍內(nèi)，Km是一種酶針對(duì)一種底物及化學(xué)反應(yīng)而言的，Km在酶學(xué)及化謝中具重要意義，可利用實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)對(duì)下列方面進(jìn)行探討。 a．在測(cè)酶活力時(shí)，如果要使測(cè)得的初速度基本接近Vmax，可根據(jù)已知Km求出應(yīng)加入的底物的合理濃度，一般[S]至少為Km值的10倍以上，反過(guò)來(lái)，根據(jù)[S]與Km的倍數(shù)關(guān)系，可以計(jì)算出在某一底物濃度時(shí)的反應(yīng)速度，如[S]=3Km時(shí)υ=0．75Vmax。 b．Km值在特殊情況下υ=Vmax/2時(shí)，等于[S]，單位也同[S]一樣，這反映了Km的物理意義，又因酶的催化活性與酶的活性中心相一致，所以Km可視為酶的活性中心被底物占據(jù)一半時(shí)所需的[S]，當(dāng)Km已知時(shí)，任何[S]時(shí)酶活性中心被底物飽和的分?jǐn)?shù)fES=υ/Vmax=[S]/(Km+[S])。 c．Km(或1/Km)大小，能反應(yīng)酶與底物和親和關(guān)系，1/Km愈小，酶與底物親和力愈小，反之愈大。在一些專(zhuān)一性較差的酶中，常有幾個(gè)底物，也就有幾個(gè)Km，根據(jù)1/Km的大小，可判斷1/Km最大的那個(gè)底物是此酶的天然最適底物，而酶即根據(jù)天然底物命名。同理，根據(jù)Km值反映出的酶與底物的親和力，可以鑒別不同來(lái)源的同工酶是原級(jí)還是次級(jí)同工酶。次級(jí)同工酶對(duì)同一底物的Km往往是不同的，而原級(jí)同工酶對(duì)同一底物的Km常是相同的。 d．了解酶的Km及其底物在細(xì)胞內(nèi)的濃度可推知該酶在細(xì)胞內(nèi)是否受到底物濃度的調(diào)節(jié)，如Km值遠(yuǎn)低于胞內(nèi)[S]（10倍以上)，說(shuō)明該細(xì)胞常處于底物飽和狀態(tài)，稍變化的[S]不會(huì)引起反應(yīng)速度有意義的改變，反之，Km＞[S]則酶促反應(yīng)速度對(duì)[S]十分敏感。 e．催化可逆反應(yīng)的酶，對(duì)正逆反應(yīng)底物的Km往往不同，Km測(cè)定差別可以推測(cè)主要催化方向及其生理意義。 f．當(dāng)一系列不同酶催化一個(gè)連鎖反應(yīng)時(shí)，如已確定Km值及相應(yīng)底物濃度，可有助于了解限速步驟。 g．測(cè)定不同抑制劑對(duì)某個(gè)酶的Km及Vmax的影響，可區(qū)別抑制劑是競(jìng)爭(zhēng)性的還是非競(jìng)爭(zhēng)性的抑制劑。 9．米氏方程的實(shí)際意義和用途是什么？它有什么局限性？ 答：①米氏方程是根據(jù)中間產(chǎn)物學(xué)說(shuō)推導(dǎo)出酶促反應(yīng)中的[S]與υ關(guān)系的數(shù)學(xué)式，它反應(yīng)了[S]與υ之間的定量關(guān)系，可以根據(jù)其中的Km對(duì)酶進(jìn)行一系列研究（參閱上題)，另外將米氏方程的1/υ對(duì)1/[S]作圖，可直接從圖中求出Vmax及Km；將米氏方程變?yōu)榱耍é?Vmax)=-υKm時(shí)，與（χ-α)(y + b)=K的典型雙曲線(xiàn)方程一致，因此公式推導(dǎo)和實(shí)驗(yàn)得到的[S]對(duì)υ的曲線(xiàn)完全相同，給中間復(fù)合物理論一個(gè)有力的證據(jù)。 ②局限性：米氏方程假定形成一個(gè)中間復(fù)合物因而其動(dòng)力學(xué)只適合單底物反應(yīng)，對(duì)實(shí)際存在的多底物、多產(chǎn)物的酶促反應(yīng)均不適用；對(duì)體內(nèi)的多酶體系催化的反應(yīng)過(guò)程也不能很好解釋?zhuān)辉谝恍┳儤?gòu)酶催化的反應(yīng)中表現(xiàn)出的協(xié)同效應(yīng)也與米氏方程表示的[S]與υ的關(guān)系不大相符。 10．別構(gòu)酶有何特性？ 答：①變構(gòu)酶一般都含2個(gè)以上亞基，亞基在結(jié)構(gòu)上及功能上可相同或不同。 ②變構(gòu)酶的分子中一般有兩種與功能相關(guān)的部位，即調(diào)節(jié)部隊(duì)位和催化部位，二者在空間上分開(kāi)，可在同一亞基或不同亞基上。 ③每個(gè)酶分子可結(jié)合一個(gè)以上的配體（包括底物，效應(yīng)劑，激活劑，抑制劑)，理論上結(jié)合底物和效應(yīng)劑的最大數(shù)目同分別與催化部位的調(diào)節(jié)部位數(shù)目一致。 ④配體和酶蛋白的不同部位相結(jié)合時(shí)，可在底物-底物，效應(yīng)劑-底物和效應(yīng)劑-效應(yīng)劑之間發(fā)生協(xié)同效應(yīng)，此效應(yīng)可是正協(xié)同也可是負(fù)協(xié)同，其中同促效應(yīng)以正協(xié)同居多。 ⑤協(xié)同效應(yīng)可用動(dòng)力學(xué)圖來(lái)鑒別，可用協(xié)同系數(shù)大于1、小于1或等于1表示。 ⑥別構(gòu)酶因其協(xié)同效應(yīng)，因而動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)為S線(xiàn)（正協(xié)同效應(yīng))，而非雙曲線(xiàn)或是表觀雙曲線(xiàn)（負(fù)協(xié)同效應(yīng))不符合米氏方程。 ⑦別構(gòu)酶出現(xiàn)協(xié)同效應(yīng)的機(jī)制，可以是酶的配體結(jié)合引起酶分子空間構(gòu)象的改變，從而增加或降低了酶和下一分子配體的親和力。 | ||||
