河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)教材

供中藥學(xué)、中醫(yī)學(xué)、中西醫(yī)結(jié)合專業(yè)本科教學(xué)用

《中藥藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》

EXPERIMENT AND GUIDE

FOR PHARMACOLOGY OF TRADITION CHINESE MEDICINE

河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院

二零零七年

編  寫  說(shuō)  明

為適應(yīng)我國(guó)高等中醫(yī)藥院校中藥本科教育的改革和發(fā)展、滿足市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)和中醫(yī)藥管理體制對(duì)中藥教育的要求，我們?cè)诤颖贬t(yī)科大學(xué)教務(wù)處領(lǐng)導(dǎo)下，在中醫(yī)學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)及中藥系領(lǐng)導(dǎo)的大力支持下編寫了本實(shí)驗(yàn)教材。

本教材是在充分總結(jié)我們教學(xué)中的經(jīng)驗(yàn)，歸納當(dāng)前中藥藥理學(xué)教育迫切需要能體現(xiàn)本學(xué)科教學(xué)特點(diǎn)、需要補(bǔ)充一些教學(xué)內(nèi)容的基礎(chǔ)上編寫的。本教材編寫宗旨是：中藥藥理學(xué)特色鮮明、具有前瞻性、能體現(xiàn)現(xiàn)代重要科技水平的高質(zhì)量的中藥藥理學(xué)教材。也希望通過該教材的編寫，幫助各位老師提高自己的業(yè)務(wù)水平，促進(jìn)我校重要本科教育再上新的臺(tái)階。本教材在內(nèi)容上力求充分吸取先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)和手段，去粗取精，本教材還注重加強(qiáng)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)知識(shí)，循序漸進(jìn)，開拓和加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力的培養(yǎng)，在教材使用時(shí)可采取靈活多樣的形式，如設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)可安排學(xué)生先設(shè)計(jì)某一藥物的藥效學(xué)研究方案，得到認(rèn)可后用實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證，旨在培養(yǎng)學(xué)生掌握中藥藥理學(xué)（藥理學(xué))研究的思路與方法，提高學(xué)生綜合分析問題和解決問題的能力，適合社會(huì)的需要。

盡管我們力圖貫徹上述宗旨，但由于編寫時(shí)間倉(cāng)促及水平所限，難免存在一些問題，甚至錯(cuò)誤之處，希望本教材問世后，廣大師生能不吝賜教，提出批評(píng)指正，我們將在今后教學(xué)實(shí)驗(yàn)中不斷完善，形成優(yōu)秀合理的教學(xué)實(shí)驗(yàn)構(gòu)架。

編者

2007.5.10

目錄

第一章   中藥藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)須知..... 1

第二章  中藥藥理實(shí)驗(yàn)基本知識(shí)與技術(shù)..... 2

第一節(jié)  常用動(dòng)物簡(jiǎn)介... 2

第二節(jié)  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持、固定和標(biāo)記方法及分組... 4

第三節(jié)  常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法... 6

第四節(jié)  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥量的計(jì)算... 8

第五節(jié)  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法... 13

第六節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的采血方法... 15

第七節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法... 17

第三章  中藥藥理實(shí)驗(yàn)研究的基本要求..... 18

第一節(jié)  中藥藥理實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本知識(shí)... 18

第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的整理與統(tǒng)計(jì)方法... 20

第四章 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目..... 24

實(shí)驗(yàn)一  馬錢子的急性毒性試驗(yàn)（改進(jìn)寇氏法)... 24

實(shí)驗(yàn)二  柴胡對(duì)發(fā)熱家兔的解熱作用... 27

實(shí)驗(yàn)三  生大黃對(duì)小鼠排便時(shí)間和數(shù)量的影響（炭末法)... 28

實(shí)驗(yàn)四  生大黃對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響（炭末法)... 29

實(shí)驗(yàn)五  雙黃連口服液對(duì)蛋清致大白鼠后足跖腫脹的影響... 30

實(shí)驗(yàn)六  三金片對(duì)家兔的利尿作用（膀胱漏斗法)... 33

實(shí)驗(yàn)七   木香對(duì)鹽酸－乙醇致大鼠急性胃粘膜損傷的影響... 34

實(shí)驗(yàn)八  延胡索對(duì)小白鼠的鎮(zhèn)痛作用（熱板法)... 35

實(shí)驗(yàn)九  延胡索對(duì)小白鼠的鎮(zhèn)痛作用（扭體法)... 37

實(shí)驗(yàn)十  生三七粉對(duì)小白鼠凝血時(shí)間的影響（玻片法)... 38

實(shí)驗(yàn)十一  三七對(duì)小白鼠凝血時(shí)間的影響（毛細(xì)玻管法)... 39

實(shí)驗(yàn)十二  川芎對(duì)大鼠血液流變性的影響... 40

實(shí)驗(yàn)十三   當(dāng)歸抗大鼠血栓形成的作用... 43

實(shí)驗(yàn)十四  丹參抗大鼠血小板聚集的作用... 45

實(shí)驗(yàn)十五  復(fù)方丹參滴丸抗家兔血栓形成的作用... 48

實(shí)驗(yàn)十六  川貝枇杷膏對(duì)小白鼠的止咳作用（潛伏期觀察法)... 50

實(shí)驗(yàn)十七   酸棗仁對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響... 51

實(shí)驗(yàn)十八   天麻對(duì)小鼠睡眠時(shí)間的影響... 53

實(shí)驗(yàn)十九  人參對(duì)小白鼠游泳時(shí)間的影響（抗疲勞實(shí)驗(yàn))... 55

實(shí)驗(yàn)二十  人參對(duì)小白鼠耐常壓缺氧的作用... 56

實(shí)驗(yàn)二十一  黨參對(duì)小鼠記憶獲得性障礙的改善作用（跳臺(tái)法)... 57

實(shí)驗(yàn)二十二   鉤藤對(duì)大鼠的降壓作用... 59

實(shí)驗(yàn)二十三  生脈注射液對(duì)低血壓狀態(tài)家兔的升壓作用... 61

實(shí)驗(yàn)二十四  某一中藥活血化瘀作用的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與研究... 62

第一章   中藥藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)須知

中藥藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課是中藥藥理教學(xué)的一個(gè)重要組成部分。在生理學(xué)和藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，在講授中藥藥理的同時(shí)，開展中藥藥理的實(shí)驗(yàn)，它的目的和任務(wù)一方面是驗(yàn)證理論、鞏固并加強(qiáng)對(duì)理論知識(shí)的理解；另一方面是通過實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步提高學(xué)生的動(dòng)手能力，培養(yǎng)學(xué)生能用現(xiàn)代科學(xué)方法從事中藥理論研究和新藥開發(fā)的初步工作能力，為今后進(jìn)行科學(xué)研究，打下初步基礎(chǔ)。

中藥藥理實(shí)驗(yàn)包括進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作、整理實(shí)驗(yàn)結(jié)果和寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告等環(huán)節(jié)，為提高實(shí)驗(yàn)效果，必須做到：

一、明確實(shí)驗(yàn)的目的要求：實(shí)驗(yàn)前應(yīng)作好預(yù)習(xí)，明確本次實(shí)驗(yàn)的目的、方法、步驟和原理，作到心中有數(shù)，這樣，才能在實(shí)驗(yàn)過程中避免出現(xiàn)忙亂和差錯(cuò)，并在教師指導(dǎo)下，培養(yǎng)獨(dú)立操作的能力。

二、作好實(shí)驗(yàn)結(jié)果的處理：中藥藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果有計(jì)量資料（如體溫、尿量)及計(jì)數(shù)資料（如動(dòng)物死亡數(shù))。要忠實(shí)地準(zhǔn)確的對(duì)觀察到的數(shù)據(jù)及時(shí)加以記錄，決不可想當(dāng)然的用主觀想象或書本理論代替實(shí)驗(yàn)觀察到的客觀事實(shí)。實(shí)驗(yàn)完畢，應(yīng)對(duì)結(jié)果加以整理：注明實(shí)驗(yàn)題目、實(shí)驗(yàn)日期、動(dòng)物性別、體重、給藥劑量等；計(jì)數(shù)資料和計(jì)量資料應(yīng)列表以便比較，使之一目了然。

三、寫好實(shí)驗(yàn)報(bào)告：寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告是培養(yǎng)文字表達(dá)能力和概括、綜合、分析問題能力的重要訓(xùn)練方法。每次實(shí)驗(yàn)完畢以后，要求以統(tǒng)一的實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告，交負(fù)責(zé)教師評(píng)閱。在實(shí)驗(yàn)報(bào)告中要求列出實(shí)驗(yàn)題目、實(shí)驗(yàn)方法和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。有時(shí)要對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原理或?qū)��?shí)驗(yàn)結(jié)果異常的原因略加討論。討論不可離開實(shí)驗(yàn)結(jié)果去抄書。實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)所列思考題或討論題是為加深對(duì)實(shí)驗(yàn)的理解，與實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)關(guān)的內(nèi)容，不必寫入實(shí)驗(yàn)報(bào)告。最后把實(shí)驗(yàn)結(jié)果加以概括性總結(jié)，寫出結(jié)論。結(jié)論不是單純重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，也不應(yīng)超過驗(yàn)證的范圍任意外展，擴(kuò)大結(jié)論。實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求文字簡(jiǎn)練，書寫工整，措詞注意科學(xué)性和邏輯性。

第二章   中藥藥理實(shí)驗(yàn)基本知識(shí)與技術(shù)

第一節(jié)  常用動(dòng)物簡(jiǎn)介

在中藥藥理實(shí)驗(yàn)中，常根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵�求選用不同的動(dòng)物。常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有蛙、小鼠、大鼠、豚鼠、貓和犬等。在選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)，應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)動(dòng)物的種屬和系別方面的要求，因?yàn)閯?dòng)物的種屬和系別的差異往往會(huì)造成對(duì)藥物反應(yīng)性的不同。應(yīng)使所選的動(dòng)物能較好地反映試驗(yàn)藥物的選擇性作用，并符合節(jié)約的原則。例如測(cè)定LD50及ED50需較多動(dòng)物，常選用小鼠，因?yàn)樾∈蠓N屬清楚，繁殖快，較經(jīng)濟(jì)；又如抗過敏實(shí)驗(yàn)常選用豚鼠，是由于豚鼠對(duì)組胺等過敏性介質(zhì)敏感。

常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的特點(diǎn)如下。

1. 蛙和蟾蜍

其心臟在離體情況下能較持久而有節(jié)律地搏動(dòng)，故常用來(lái)研究藥物對(duì)心臟的作用。其坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本可用來(lái)觀察藥物對(duì)周圍神經(jīng)橫紋肌或神經(jīng)接頭的作用。

2. 小鼠

小鼠是藥理實(shí)驗(yàn)最常用的一種動(dòng)物，適用于需要大量動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)，如LD₅₀ 和ED₅₀的測(cè)定，抗炎免疫藥、抗腫瘤藥、避孕藥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物等的研究和藥物初篩。

3. 大鼠

用途與小鼠相似。因其體形較大，有些在小鼠身上不便進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)可選用大鼠。如藥物的抗炎實(shí)驗(yàn)常選用大鼠的踝關(guān)節(jié)做炎癥模型。可用大鼠進(jìn)行血壓測(cè)定，膽管插管和長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)，還可用其離體子宮做子宮收縮藥的檢定。此外，尚可用來(lái)復(fù)制糖尿病模型，用于糖尿病藥物的研究以及流感病毒傳代及細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)等。

4. 豚鼠

豚鼠易被抗原性物質(zhì)所致敏，對(duì)組胺特別敏感，常用于平喘藥和抗組胺藥的實(shí)驗(yàn)研究。對(duì)結(jié)核桿菌比較敏感，故也用于抗結(jié)核藥的實(shí)驗(yàn)研究。此外還用于離體心臟、平滑肌實(shí)驗(yàn)。

5. 家兔

家兔較馴服，易飼養(yǎng)。常用于觀察藥物對(duì)呼吸、心臟、血管（離體兔耳血管灌流)、腸肌運(yùn)動(dòng)的影響，體溫實(shí)驗(yàn)及熱源檢查。用于避孕藥實(shí)驗(yàn)（雌兔)或觀察藥物對(duì)皮膚局部作用（刺激性)。

6. 貓

貓對(duì)于腦實(shí)驗(yàn)和其他外科手術(shù)耐受力強(qiáng)，反射功能強(qiáng)，血壓較穩(wěn)定。常用于觀察藥物對(duì)心血管的影響。可用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)，如去大腦僵直，姿勢(shì)反射實(shí)驗(yàn)；貓也常用于鎮(zhèn)吐藥的實(shí)驗(yàn)。

7. 犬

實(shí)驗(yàn)需用大動(dòng)物時(shí)，常用犬。犬是記錄血壓、呼吸最常用的動(dòng)物。常用于觀察血流動(dòng)力學(xué)藥物對(duì)冠狀動(dòng)脈血流量和心肌電生理的影響，以及對(duì)降壓藥、抗休克藥的研究等。犬還可通過訓(xùn)練，用于慢性實(shí)驗(yàn)研究，如條件反射、高血壓的實(shí)驗(yàn)治療以及造胃瘺、腸瘺來(lái)觀察藥物對(duì)胃腸蠕動(dòng)和分泌的影響的實(shí)驗(yàn)。此外，犬也用于長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)。

第二節(jié)  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持、固定和標(biāo)記方法及分組

   一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的標(biāo)記

實(shí)驗(yàn)用較大動(dòng)物如兔、貓、犬等可用特制的號(hào)碼牌固定于耳上。白色家兔和小動(dòng)物（小鼠、大鼠)可用黃色苦味酸（3%～5%)涂于毛上標(biāo)記。其編號(hào)方法無(wú)統(tǒng)一規(guī)定，以下方法可供參考。

如給小鼠標(biāo)記1～10號(hào)，可將小鼠背部分為前肢、腰部、后肢，按左、中、右分為九個(gè)區(qū)域，從右到左標(biāo)記1～9號(hào)，第10號(hào)不標(biāo)記。

二、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持、固定方法

1、小鼠：用右手提起鼠尾，放在粗糙物（鼠籠蓋)上面，向后輕拉其尾，左手拇指、食指捏住其頸背部皮膚，將小鼠固定在掌中，使其腹部朝上,然后以無(wú)名指和小指夾住鼠尾。

2、大鼠：捉持和固定方法基本同小鼠。將其放于鼠籠蓋上，右手輕拉鼠尾，左手中指和拇指放到大鼠雙前肢腋下，食指放入頸部，使其伸開前肢迅速將其握住。

3、豚鼠：一手拇指和中指從豚鼠背部伸到腋下，另一只手托住其臀部即可。體重小者可用一只手捉拿。

4、家兔：一手抓住頸背部皮膚，輕輕將兔提起，另一手托住其臀部，或?qū)⑵渲糜诠潭ㄏ鋬?nèi)。

5、貓：捉持方法同家兔，但應(yīng)注意其利爪和牙齒會(huì)損傷人。為保安全多用套網(wǎng)捉拿，用固定袋固定。

6、犬：對(duì)馴服犬，可用特制嘴套將犬嘴套住，并將嘴套上的繩帶拉至耳后頸部打結(jié)固定。對(duì)兇暴的犬，用長(zhǎng)柄鉗式捕犬夾鉗住其頸部，再用嘴套將犬嘴套住。如無(wú)嘴套，可用繩帶綁嘴，方法是在犬嘴的上下部打結(jié)并繞到頸后再打結(jié)固定。

急性實(shí)驗(yàn)時(shí)，通常將犬麻醉后仰位固定于手術(shù)臺(tái)上。四肢栓上繩帶，拉緊固定在手術(shù)臺(tái)邊緣的鍥子上。取下嘴套或繩帶，將一金屬棒經(jīng)兩嘴角穿過口腔壓于舌上，并將舌拉出口腔，再用繩帶繞過金屬棒綁嘴并固定于手術(shù)臺(tái)的柱子上。

三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的隨機(jī)分組法

數(shù)理統(tǒng)計(jì)學(xué)上，根據(jù)隨機(jī)抽樣的原則，編制了隨機(jī)數(shù)目表，應(yīng)用隨機(jī)數(shù)目代替抽簽法。表中的數(shù)字都各自獨(dú)立，全部數(shù)字無(wú)論從橫行、縱列或斜行的順序都是隨機(jī)的。因此使用時(shí)可任自一個(gè)數(shù)目開始，可從左而右，亦可從右而左，可從上而下，也可從下而上，按順序取得需要的數(shù)目，其結(jié)果比抽簽更為理想。

（1)完全隨機(jī)法

（2)配偶設(shè)計(jì)隨機(jī)分組法

（3)隨機(jī)單位組設(shè)計(jì)分組法

第三節(jié)  常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法

一、小鼠

1、灌胃（ig)：將小鼠固定后，使頸部拉直，右手持有灌胃針頭的注射器，自口角插入口腔，沿上腭插入食管。若遇阻力，可將針頭抽出再另插，以免刺破食管或誤入氣管。灌注量為0.1～0.3ml/10g體重,最多0.4ml/10g體重。

2、皮下注射（sc)：注射部位常選背部皮下。輕輕捏起背部皮膚，將注射針頭刺入皮下，稍稍擺動(dòng)針頭，若容易擺動(dòng)則表明針尖部位于皮下。此時(shí)注入藥液。撥針時(shí)應(yīng)輕捏針刺處片刻，以防藥液漏出。注射量為0.1～0.3ml/10g體重。

3、肌內(nèi)注射(im):多注射于后肢股部肌肉，每側(cè)不超過0.1ml。

4、腹腔注射(ip):左手固定小鼠，右手持注射器，從下腹部外側(cè)進(jìn)針3～5mm,呈45度角刺入腹腔。注射量為0.1～0.2ml/10g體重，最大不超過0.5ml/只。

5、尾靜脈注射（iv):將小鼠置于固定筒內(nèi)，使尾部露在外面，用70%～75%乙醇棉球擦尾部，或?qū)⑹笪步��?5～50⁰C溫水中，待尾部左右側(cè)靜脈擴(kuò)張后，左手拉尾，右手進(jìn)針。注射量不超過0.5ml/只。

二、大鼠

灌胃、皮下注射、腹腔注射、肌內(nèi)注射、尾靜脈注射方法均同小鼠。一般情況下，灌胃劑量為1～2ml/100g,皮下注射、尾靜脈注射＜1ml/只，腹腔注射為 1.5ml/只，肌內(nèi)注射為0.1～0.2ml/只。此外，大鼠尚有舌下靜脈給藥的方法。

三、豚鼠

1、皮下、肌內(nèi)及腹腔注射：方法基本同小鼠，給藥量分別為0.5～1.0ml/只、0.3～0.5ml/只、2～4ml/只。

2、靜脈注射：選用后腳掌外側(cè)的靜脈或外頸靜脈進(jìn)行注射。采用前法，可由一人捉持豚鼠并固定一條后腿，另一人剪去注射部位的毛，酒精棉球涂擦使血管擴(kuò)張，用連接在注射器上的小兒頭皮針頭刺入血管推注藥物。做外頸靜脈注射時(shí)，需將頸部皮膚切一小口，暴露血管，再用針頭刺入血管。注射量通常為2～4ml/只。

四、家兔

1、灌胃：如用兔固定箱，可一人操作。右手將開口器固定于兔口中，左手插入導(dǎo)尿管。若無(wú)固定箱，需二人合作。一個(gè)坐位，將兔夾于兩腿之間，左手緊握雙耳，固定頭部，右手抓住雙前肢。另一人將開口器橫放于兔口中，壓在舌上，用8號(hào)導(dǎo)尿管由開口器中央孔慢慢插入食管和胃。為避免誤入氣管，可將導(dǎo)尿管外口端浸入清水中，如無(wú)氣泡出現(xiàn)，證明已插入胃中。然后注入藥液，給藥量通常為10ml/kg體重。

2、耳緣靜脈注射：選定耳緣靜脈（耳背內(nèi)側(cè))，撥除局部的毛，用酒精棉球涂擦或以示指輕彈之，使血管擴(kuò)張。用左手示指和中指夾住耳根部，拇指和環(huán)指夾住兔耳尖部拉直，然后盡量從血管遠(yuǎn)心端刺入，再用拇指和示指固定針頭處，注入藥液。注射量通常為2ml/kg體重。

3、皮下、肌內(nèi)和腹腔注射：方法基本上同小鼠，最大注射量分別為0.5 ml/kg、1.0 ml/kg和5.0ml/kg體重。

第四節(jié)  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥量的計(jì)算

一、給藥劑量的計(jì)算

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥量常按g/kg體重、mg/kg體重、ml/kg體重或按體表面積來(lái)計(jì)算，一般是通過動(dòng)物之間或動(dòng)物與人之間的劑量換算而得。換算方法大致有以下幾種。

1、按體型分?jǐn)?shù)換算法：通常采用下列公式：

式中d_B是欲求算的B種動(dòng)物（包括人)的kg體重劑量，d_A是已知A種動(dòng)物（包括人)的kg體重劑量；W_A、W_B是已知?jiǎng)游顰、B的體重；R_A、R_B是動(dòng)物的體型系數(shù)，見下表。

  表：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人的體型系數(shù)

例：已知家兔2kg,用藥50mg/kg,求算家犬5kg體重用藥量。

  d_A=50、R_B=0.104、R_A=0.093、W_A=2、W_B=5，代入上述公式：

d_B=50mg/kg×0.104×5^1/3/（0.093×2^1/3)=41.2mg/kg

2、按動(dòng)物與人體表比換算法（見下表)

例1：已知體重12kg的犬，其每日服藥劑量為10mg/kg體重,每日總量為120mg,試求人的日服藥量。 

人日服總量=犬日服總量×人與犬體表比=120×3.1=372mg

例2：某利尿中藥大鼠給藥時(shí)的劑量為250mg/kg體重，試粗略估計(jì)犬灌胃給藥時(shí)可以試用的劑量。（附表如下：)

解1： 利用表中“mg/kg-mg/ m²轉(zhuǎn)換因子”計(jì)算法

 將某種動(dòng)物按mg/kg計(jì)算的劑量乘以相應(yīng)的轉(zhuǎn)換因子，即為按mg/ m²計(jì)算的劑量。

犬的試用劑量=250×6（大鼠的轉(zhuǎn)換因子)/19（犬的轉(zhuǎn)換因子)=79mg/kg

解2：利用表中每“1kg體重占體表面積相對(duì)比值”計(jì)算法

犬的試用劑量=250×0.16（犬的體表面積比值)/0.47（大鼠的體表面積比值)=85 mg/kg

不同種類動(dòng)物間用藥劑量換算時(shí)的常用數(shù)據(jù)

二、給藥容積的計(jì)算

實(shí)驗(yàn)過程中常用的容量計(jì)算如下：實(shí)驗(yàn)時(shí)需從已知藥的濃度和已知的給藥劑量（g/kg或mg/kg)算出相當(dāng)于每1kg體重應(yīng)給藥的毫升數(shù)（ml)，以便于給藥。

  例：小鼠體重20g，腹腔注射鹽酸嗎啡10g/kg，藥液濃度為0.1%，應(yīng)注射多少毫升？

計(jì)算方法：0.1%的鹽酸嗎啡溶液每1 ml含藥物1 mg，10 mg/kg的劑量相當(dāng)于10ml/kg,小鼠體重20g,換算成kg為0.02kg。則10 ml/kg×0.02kg=0.2ml。

三、配制藥物濃度的計(jì)算

   實(shí)驗(yàn)中有時(shí)需根據(jù)藥物劑量（mg/kg)和設(shè)定的給藥容積（ml/kg)，計(jì)算出應(yīng)該配制的藥物濃度。

例：按50mg/kg的劑量給家兔靜脈注射苯巴比妥鈉，注射量按1 ml/kg進(jìn)行，應(yīng)配制苯巴比妥鈉的濃度是多少？

計(jì)算方法：50mg/kg相當(dāng)于1 ml/kg，因此1 ml藥液應(yīng)含50 mg藥物，算成百分比濃度為：1：50=100：X， X=50×100 mg=5g，即應(yīng)配制成5%的苯巴比妥鈉溶液。

四、藥物濃度表示法及劑量換算法

藥物的重量以“克”為基本單位，容量以“毫升”為基本單位。這是衡量的公制，現(xiàn)將公制列表如下：

公制重量與容量表

藥物濃度是指一定量液體或固體制劑所含主藥的分量。常用以下幾種表示法：

1、百分濃度：是按每100分溶液或固體物質(zhì)中所含藥物的分?jǐn)?shù)來(lái)表示濃度，簡(jiǎn)寫為%。由于藥物或溶液的量可以用體積或重量表示，因而有三種不同的表示百分濃度的方法：

（1)重量/體積（W/V)法：即每100毫升溶液中含藥物的克數(shù)，此法最常用，不加特別注明的藥物%濃度即指此法。

（2)重量/重量（W/W)法：即每100克制劑中含藥物的克數(shù)，適用于固體、半固體藥物。

（3)體積/體積（V/V)法：即每100毫升溶液中含藥物的毫升數(shù)，適用于液體藥物。如消毒用75%乙醇，即為100毫升中含無(wú)水乙醇75毫升。

2、比例濃度：常用于表示稀溶液的濃度。

3、克分子濃度（M)：一升溶液中所含溶質(zhì)的克分子數(shù)稱為該溶液的克分子濃度。

4、克當(dāng)量濃度（N)：一升溶液中含有溶質(zhì)的克當(dāng)量數(shù)稱為該溶液的克當(dāng)量濃度。

劑量換算：

（1)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所用藥物的劑量，一般按mg/Kg（或g/Kg)計(jì)算，應(yīng)用時(shí)須從已知藥濃度換算出相當(dāng)于每公斤體重應(yīng)注射的藥液量（ml)，以便于給藥。

（2)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中有時(shí)須根據(jù)藥物的劑量及某種動(dòng)物給藥途徑的藥液容量，然后配制相當(dāng)?shù)臐舛纫员阌诮o藥。

第五節(jié)  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法

一、麻醉方式

1、吸入麻醉法

常用藥物為乙醚。在玻璃容器底部鋪以飽浸乙醚（5～10ml)的脫脂棉。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放在該容器內(nèi)的網(wǎng)狀隔板上，蓋上蓋（密閉)，經(jīng)20s或30s的時(shí)間動(dòng)物即進(jìn)入麻醉狀態(tài)。如需要較長(zhǎng)時(shí)間麻醉，可把浸有乙醚的棉球放在動(dòng)物的鼻口處，進(jìn)行追加麻醉。

此法適用于麻醉小鼠、大鼠和家兔。

2、注射麻醉法

常用麻醉藥有戊巴比妥鈉、巴比妥鈉、苯巴比妥鈉、硫噴妥鈉等。小鼠、大鼠和豚鼠常采用腹腔注射進(jìn)行全身麻醉。狗、貓、兔等動(dòng)物既可腹腔注射麻醉，也可靜脈注射麻醉。（具體劑量見下表：) 

注射麻醉藥物的用法與用量

注：iv靜脈注射  ip腹腔注射

二、注意事項(xiàng)

1、配制注射用麻醉劑，一般應(yīng)用蒸餾水，有些可用生理鹽水。配制巴比妥類溶液，使用煮開冷卻的蒸餾水可保持較長(zhǎng)時(shí)間，貯藥瓶應(yīng)密閉緊塞，以防空氣進(jìn)入產(chǎn)生沉淀；硫噴妥鈉溶液不穩(wěn)定，應(yīng)在臨用前配制；烏拉坦溶液稍加溫則藥效更好。

2、動(dòng)物麻醉一般以眼瞼、角膜、瞳孔和趾反射作為觀察麻醉深度的指標(biāo)。

3、靜脈注射速度要均勻，不宜太快，否則可因抑制呼吸而使動(dòng)物死亡。

4、麻醉藥劑量與動(dòng)物品種及健康狀況有關(guān)，藥量要準(zhǔn)確，濃度要適中，冬季麻醉藥液應(yīng)加溫到接近動(dòng)物體溫水平。

5、麻醉深度不夠時(shí)，必須經(jīng)一定時(shí)間才能補(bǔ)足麻醉劑。補(bǔ)加劑量一次不宜超過原注射量的20%～25%。

第六節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的采血方法

在中藥藥理（藥理)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常需要采實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血液，以作常規(guī)檢驗(yàn)或生化及化學(xué)分析，因此必須掌握正確的采血技術(shù)，一次采血過多或連續(xù)多次采血都可影響動(dòng)物健康，造成貧血或?qū)е滤劳觯�須予注意�?/p>

一、小鼠、大鼠的采血法

1、剪尾采血：需血量很少時(shí)常用本法。動(dòng)物麻醉后，將鼠尖剪去約5mm,從尾根部向尾尖部按摩，血自尾尖流出，若事先將鼠尾浸在45⁰C水中數(shù)分鐘，使尾部血管充盈，可采到較多的血。取血后用棉球壓迫止血。此法可反復(fù)多次取血，小鼠每次可取0.1ml,大鼠可取0.3～0.5 ml。

  如不麻醉，應(yīng)將動(dòng)物裝入固定筒內(nèi)，按上法操作取血。但在清醒狀態(tài)下，常采不到所需血量。

2、眼眶后靜脈叢采血：取長(zhǎng)7～10cm的玻璃毛細(xì)管（內(nèi)徑約1mm),另端漸擴(kuò)大呈喇叭形，將其尖端折斷，使其斷端鋒利。預(yù)先將玻璃管浸入1%肝素溶液，取出干燥。采血時(shí)，左手（拇指及示指)抓住鼠兩耳之間的皮膚，使鼠頭部固定，并輕輕壓迫頸部?jī)蓚?cè)，阻礙頭部靜脈血液回流，使眼球充分外突。右手持毛細(xì)管或配有磨鈍的7號(hào)針頭的1 ml注射器，沿內(nèi)眥眼眶后壁向喉頭方向刺入，刺入深度：小鼠2～3mm、大鼠4～5mm。稍旋轉(zhuǎn)毛細(xì)管，血液即流入其中。取血完畢拔出毛細(xì)管，左手放松出血即停止。

3、眶動(dòng)脈和眶靜脈采血（也稱摘眼球采血)：左手固定動(dòng)物，壓迫眼球使其盡量突出，右手用鑷子或止血鉗迅速摘除眼球，眼眶內(nèi)很快流出血液。此法采血量較多，一般只適用于一次性采血。

4、股靜脈或股動(dòng)脈采血：麻醉動(dòng)物背位固定，切開左或右腹股溝的皮膚，作股靜脈或股動(dòng)脈分離手術(shù)。注射針頭（7號(hào)或8號(hào))刺入血管抽血。若需要連續(xù)多次取血，則針刺采血部位盡量靠遠(yuǎn)心端。

5、斷頭取血：剪掉鼠頭，立即將鼠頸朝下，提起動(dòng)物，將血滴入備好的容器中。

二、家兔的采血法

1、耳緣靜脈采血：將家兔固定，剪去擬采血耳殼上的毛，用電燈照射或用二甲苯棉球涂擦耳殼，使血管擴(kuò)張，再用乙醇將二甲苯拭凈。然后以粗針頭刺入靜脈取血，或直接刺破血管取血。采血完畢，用干棉球壓迫止血，如血不易止住，可用木夾夾耳殼10～20min。

2、心臟采血：將家兔背位固定，在左胸第二至第四肋間剪一處毛，以碘酒和乙醇消毒，然后用7號(hào)針頭（帶有10ml注射器)在心跳最明顯處作穿刺，針頭刺入心臟后即有血液涌入注射器或者邊穿刺邊抽，直至血液流入注射器。所得所需血量后，立即將針頭拔出。

3、股動(dòng)脈采血：將家兔背位固定，一手拉直動(dòng)物后肢，一手持注射器在血管搏動(dòng)明顯處，將帶有注射器的針頭刺入股動(dòng)脈，若操作正確，鮮紅色血液即流入注射器。抽血完畢，迅速拔出針頭，用干棉球壓迫止血2～3min。

4、耳中央動(dòng)脈取血：將兔置于兔固定筒內(nèi)，用二甲苯涂兔耳中央較粗、顏色較鮮紅的中央動(dòng)脈，使其擴(kuò)張。一手固定兔耳，一手持注射器，于中央動(dòng)脈的末端向心方向刺入，血液即進(jìn)入針管。取血完畢后壓迫止血。

第七節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，常須將動(dòng)物處死，常用的處死方法有：

1. 頸椎脫臼法

此法常用于小鼠。用手指或鑷子壓住小鼠的后頭部，另一手捏住鼠尾用力向后上牽拉，使之頸椎脫臼，立即死亡。

2. 空氣栓塞法

此法常用于家兔的處死。用注射器將空氣快速注入靜脈，可使動(dòng)物立即死亡。一般注入空氣10～20ml。

3. 打擊法

此法適用于較小的動(dòng)物。抓住動(dòng)物的尾部，提起，用力敲擊動(dòng)物頭部，或用木錘打擊動(dòng)物頭部，致使動(dòng)物死亡，如家兔、大鼠和小鼠等。

4. 大量放血法處死

小鼠可采用摘眼球大量放血致死。

    5. 藥物吸入致死

吸入苯、乙醚、氯、二氧化碳、一氧化碳均可使動(dòng)物死亡。

第三章  中藥藥理實(shí)驗(yàn)研究的基本要求

第一節(jié)  中藥藥理實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本知識(shí)

一、中藥藥理實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的重要性

中藥藥理研究首要的問題，就是對(duì)實(shí)驗(yàn)研究的周密設(shè)計(jì)，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是實(shí)驗(yàn)過程的依據(jù)，是實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理的前提，也是提高實(shí)驗(yàn)研究質(zhì)量的一個(gè)重要保證。嚴(yán)密而合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，不但可對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和誤差有比較準(zhǔn)確的估計(jì)，最大限度地獲得豐富而可靠的資料，而且還可減少人力，節(jié)省物力和時(shí)間，提高工作效率，避免因?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)不當(dāng)，造成人力、物力的浪費(fèi)，甚至全功盡棄的不良結(jié)果。因此，實(shí)驗(yàn)研究設(shè)計(jì)，從中藥藥理實(shí)驗(yàn)研究過程來(lái)看，具有非常重要的意義。

二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容

1、明確研究目的和意義：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，首先應(yīng)考慮研究目的和意義，根據(jù)研究的中心問題，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)內(nèi)容設(shè)計(jì)，做到心中有數(shù)，有的放失。

2、確定實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組：實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間除了處理不同，其他條件均應(yīng)等同。保持實(shí)驗(yàn)可比性的原則。在新藥審批辦法中規(guī)定，新藥的主要藥效作用各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)均應(yīng)有空白對(duì)照和已知藥物對(duì)照。藥理試驗(yàn)結(jié)果需經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

3、確定實(shí)驗(yàn)方法、項(xiàng)目和指標(biāo)：要有明確的規(guī)定和說(shuō)明，要注意選擇能反映被研究問題的本質(zhì)的關(guān)鍵指標(biāo)。藥理作用及其機(jī)理能用客觀方法定性地加以測(cè)量，取得準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)。

4、確定實(shí)驗(yàn)對(duì)象的數(shù)量：中藥藥理實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象包括正常動(dòng)物、麻醉動(dòng)物及病理模型；既有整體體內(nèi)試驗(yàn)，也有離體器官、組織或細(xì)胞體外試驗(yàn)等。盡量研究各種接近中醫(yī)臨床證候的動(dòng)物病理模型，按中醫(yī)藥治則，觀察中藥藥理與療效，但也不排除對(duì)正常動(dòng)物或離體器官等的作用分析。由于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床觀察畢竟有一定差別，因此考慮用不同動(dòng)物多種方法測(cè)試，往往是必要的。要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康�、方法的指�?biāo)的要求決定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、樣本及數(shù)量、計(jì)量資料，一般小動(dòng)物（大、小鼠)每組8—12只，較大動(dòng)物（兔、狗)每組5—8只是基本的，總量應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)要求。

5、資料整理和統(tǒng)計(jì)：將紀(jì)錄的資料作為必要的分析、整理，經(jīng)過恰當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)分析，作出結(jié)論。

三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的原則

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的三大原則：對(duì)照、重復(fù)和隨機(jī)。

1、對(duì)照：比較研究是科實(shí)驗(yàn)不可少的條件，沒有比較，不難以鑒別，也就缺乏科學(xué)性，所以實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)必須設(shè)立對(duì)照組。而對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組之間除用以實(shí)驗(yàn)的藥物，處理的區(qū)別之外，其他條件如實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、方法、儀器、環(huán)境及時(shí)間等應(yīng)相同。動(dòng)物的種屬、品系、性別、窩別、年齡、體重、健康狀況等方面盡量一致以減少誤差。一般將“齊同對(duì)比”歸納為“同時(shí)、同地、同環(huán)境、同種、同重、同批號(hào)”等幾個(gè)方面。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究的內(nèi)容不同，可選用不同的對(duì)照形式，常用的方法有下列4種：

（1)空白對(duì)照：指在不加任何處理的條件下進(jìn)行觀察對(duì)照。

（2)假處理對(duì)照：即除不用被研究的藥物外，對(duì)照組的動(dòng)物要經(jīng)受同樣的處理，如給予生理鹽水或不含藥物的溶酶。又稱“陰性對(duì)照”。

（3)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照：指以已知經(jīng)典藥物在標(biāo)準(zhǔn)條件下與實(shí)驗(yàn)藥進(jìn)行對(duì)照。又稱“陽(yáng)性對(duì)照”。必要時(shí)可設(shè)兩個(gè)作用機(jī)制不同的陽(yáng)性對(duì)照藥。

（4)組間對(duì)照：系在實(shí)驗(yàn)組間分幾個(gè)劑量組互為對(duì)照進(jìn)行對(duì)比，以便說(shuō)明量效關(guān)系或藥效的劑量依賴性。一般設(shè)2—3個(gè)劑量組。

另外，也可用自身作用給藥前后對(duì)比者，但最終還是需要作組間對(duì)照來(lái)說(shuō)明問題。

2、重復(fù)：能在類似條件下，把實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)出來(lái)，才算是可靠的實(shí)驗(yàn)，重復(fù)實(shí)驗(yàn)除增加可靠性外，也可了解實(shí)驗(yàn)變異情況。

3、隨機(jī)：就是按照機(jī)遇均等的原則來(lái)進(jìn)行分組。其目的是使一切干擾因素造成的實(shí)驗(yàn)誤差減少，而不受實(shí)驗(yàn)者主觀因素或其他偏性誤差的影響。隨機(jī)化的手段可采用編號(hào)卡片抽簽法，隨機(jī)數(shù)字表或采用計(jì)算器的隨機(jī)數(shù)字鍵。近年來(lái)提倡“均衡下的隨機(jī)”，即先將能控制的主要因素（如體重、性別等)先行均衡地歸類分檔，然后在每一檔中隨機(jī)地取出等量動(dòng)物分配到各組，使那些難控制因素（如活潑、饑飽、疲勞和度及性周期等)得到隨機(jī)化的安排。

第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的整理與統(tǒng)計(jì)方法

中藥藥理（藥理)實(shí)驗(yàn)主要是通過動(dòng)物理化實(shí)驗(yàn)來(lái)認(rèn)識(shí)藥物作用的特點(diǎn)和規(guī)律，其實(shí)驗(yàn)觀測(cè)到的數(shù)據(jù)資料按其實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的性質(zhì)，分為質(zhì)反應(yīng)（計(jì)數(shù))資料和量反應(yīng)（計(jì)量)資料兩大類。

一、量反應(yīng)資料

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)通過測(cè)量而得，以計(jì)量數(shù)字的多少來(lái)表示。如血壓、心率、血細(xì)胞數(shù)、電刺激閾值等，也可用實(shí)測(cè)變化比值或變化率作為測(cè)量資料，如血壓升降數(shù)值，心率和呼吸增減次數(shù)、尿量增減、血糖升降以及血紅蛋白升降等數(shù)值；評(píng)分分值的半定量資料也屬計(jì)量資料范疇。

   量反應(yīng)資料的特點(diǎn)是每一個(gè)觀察對(duì)象可得一個(gè)定量的數(shù)據(jù)，所以信息量豐富。量反應(yīng)資料的統(tǒng)計(jì)分析最常用t檢驗(yàn), 可用下列公式計(jì)算：

例數(shù)相等時(shí)：  

例數(shù)不等時(shí)：

通常以均數(shù)作為一組數(shù)據(jù)的集中性參數(shù)，以標(biāo)準(zhǔn)差s作為其離散性參數(shù)，第三個(gè)參數(shù)是該組例數(shù)（n),三個(gè)參數(shù)常寫成± s (n)的形式。其中，Σ是總和的數(shù)學(xué)符號(hào)，Σχ是各實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)χ的總和，Σχ² 是χ平方的總和，(Σχ)² 是χ總和的平方。

 t值法的判斷標(biāo)準(zhǔn)為：算出t值時(shí)，按自由度f(wàn)(f=n₁+n₂-2)從t值表中查出t_0.05、t_0.01、t_0.001值，與實(shí)算值比較：

例如,某一試驗(yàn)測(cè)得甲、乙兩用藥組藥后血壓降低值如下表數(shù)據(jù),試分析結(jié)果,作出結(jié)論。

各組用藥后血壓降低值（mmHg)

  甲藥組 均數(shù)

標(biāo)準(zhǔn)差均數(shù)

乙藥組  均數(shù)=31.8mmHg   標(biāo)準(zhǔn)差=7.00 mmHg

自由度（f)=n₁+n₂-2=8+8-2=14

查t值表t_0.01=2.977，t_0.001=4.140

得t_0.01＜t ＜t_0.001； 故P＜0.01，差異有非常顯著意義，

結(jié)論為：t檢驗(yàn)說(shuō)明乙藥的降壓作用確比甲藥強(qiáng)。

此外，對(duì)量反應(yīng)（計(jì)量)資料的統(tǒng)計(jì)方法還有配對(duì)t值法、參比差值法、簡(jiǎn)化方差分析法等，需用時(shí)可參閱其他統(tǒng)計(jì)學(xué)參考書。

二、質(zhì)反應(yīng)資料

實(shí)驗(yàn)結(jié)果只有質(zhì)的區(qū)別，數(shù)據(jù)是通過計(jì)數(shù)（即陽(yáng)性反應(yīng)的動(dòng)物數(shù))而獲得的，如動(dòng)物死亡或存活；某反應(yīng)的出現(xiàn)或不出現(xiàn)；臨床治療中的痊愈、顯效、有效、無(wú)效等。質(zhì)反應(yīng)通常用出現(xiàn)率來(lái)表達(dá)，可用百分率型，小數(shù)型。為了進(jìn)行計(jì)算統(tǒng)計(jì)分析，例數(shù)不宜過少，一般所用動(dòng)物每組至少20只。通常以χ²（卡方)法進(jìn)行檢驗(yàn)。公式如下：

式中χ²讀作卡方；a、b、c、d是兩組陽(yáng)性數(shù)和陰性數(shù)所組成的四格表中的例數(shù)，n是總例數(shù)。

   例如：甲藥組50人，有效35人；乙藥組50人，有效25 人，先排列出四格表如下：

代入上式

查χ²值表（四格表的自由度恒等于1)，得0.05的機(jī)率點(diǎn)為3.841，

3.375＜χ²_0.05 ,故P＞0.05,差別無(wú)顯著意義。

 本方法最常用。此外，質(zhì)反應(yīng)資料的統(tǒng)計(jì)分析方法還有配對(duì)χ²法，簡(jiǎn)化直接概率法、參比值法等，需用時(shí)可參閱其他統(tǒng)計(jì)學(xué)參考書。

附：t值表與χ² 值表

     t 值 表

χ²   值 表

第四章 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

實(shí)驗(yàn)一  馬錢子的急性毒性試驗(yàn)（改進(jìn)寇氏法)

【目的】

1、學(xué)習(xí)中藥急性毒性試驗(yàn)的方法，掌握LD50的測(cè)定方法。

2、觀察馬錢子的毒性反應(yīng)。

【原理】

急性毒性試驗(yàn)是指受試動(dòng)物在一次大劑量給藥后所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)和死亡情況。藥物毒性的大小，常用動(dòng)物的致死量來(lái)表示，因?yàn)閯?dòng)物生與死的生理指標(biāo)較其他指標(biāo)明顯、客觀、容易掌握。致死量的測(cè)定也較準(zhǔn)確。在測(cè)定致死量的同時(shí)，還應(yīng)仔細(xì)觀察動(dòng)物是否出現(xiàn)聳毛、倦臥、耳殼蒼白或充血、突眼、步履蹣跚、肌肉癱瘓、呼吸困難、昏迷、驚厥、大小便失禁等不良反應(yīng)。

致死量的測(cè)定常以半數(shù)致死量為標(biāo)準(zhǔn)。半數(shù)致死量是指能夠引起試驗(yàn)動(dòng)物一半死亡的劑量，即藥物致死量對(duì)數(shù)值，用符號(hào)LD50表示。由于LD50的測(cè)定較簡(jiǎn)便、可靠，而且穩(wěn)定，現(xiàn)已成為標(biāo)志動(dòng)物急性中毒程度的重要常數(shù)。LD50測(cè)定的方法有多種，如Bliss法、改進(jìn)寇氏法、簡(jiǎn)化機(jī)率單位法、累積插值法、機(jī)率單位-加權(quán)直線加歸法等等。以上方法雖各有特點(diǎn)，但都有共同的要求：

（1)動(dòng)物：均選用體重17～22g健康小鼠（同次試驗(yàn)體重相差不得超過4g)，或選用體重120～150g（同次試驗(yàn)體重相差不得超過10g)健康大鼠作實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。性別相同或雌雄各半。

（2)給藥途徑：要求采用兩種給藥途徑，其中必須有一種與臨床所采用的相同。溶于水的藥物尚須測(cè)定靜脈注射的LD50。值得提出的是，臨床上雖然不用腹腔注射，但動(dòng)物實(shí)驗(yàn)因腹腔注射給藥方便，吸收迅速，頗為常用。若供試藥物在腹腔內(nèi)不引起強(qiáng)烈刺激或局部變化（如纖維性病變等)，那么嚙齒類動(dòng)物腹腔注射的LD50，參數(shù)很接近于靜脈給藥的LD50。口服制劑無(wú)法通過注射給藥途徑時(shí)，可只用胃腸給藥。

(3)試驗(yàn)周期和觀察指標(biāo)：給藥后至少觀察7天。觀察期間應(yīng)逐日記錄動(dòng)物的毒性反應(yīng)情況和死亡動(dòng)物的分布。

（4)正式試驗(yàn)前，均須先用少量動(dòng)物進(jìn)行預(yù)試試驗(yàn)，大致測(cè)出受試藥物引起0%和100%死亡率的致死量范圍，然后安排正式試驗(yàn)。正式試驗(yàn)組數(shù)不得少于三個(gè)劑量組，一般選用4～5個(gè)劑量組，每組動(dòng)物數(shù)為10～20只。

（5)報(bào)告LD50時(shí)需注明實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種屬及品系、性別、體重范圍、給藥途徑及每個(gè)劑量組動(dòng)物數(shù)等，還需注明受試藥物的配制方法、給藥劑量、各組劑量間的比值（一般以0.65～0.85為宜)、給藥容積、觀察時(shí)間及計(jì)算方法。還須標(biāo)出LD50的95%可信限。

【動(dòng)物】小鼠

【藥品】馬錢子水煎液

【器材】注射器、灌胃針頭、鼠籠

【方法】

1、預(yù)試實(shí)驗(yàn)：預(yù)試實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菫榱苏页鲆�起�?dòng)物0%（Dn)和100%（Dm)死亡的劑量，以便安排正式實(shí)驗(yàn)。預(yù)試實(shí)驗(yàn)一般采用少量動(dòng)物（6～9只小鼠)進(jìn)行，將動(dòng)物隨機(jī)分為3組，組間劑量比值一般以1：0.5或1：0.7為宜。灌服或腹腔注射量以0.2ml/10g體重為度。預(yù)試實(shí)驗(yàn)應(yīng)進(jìn)行到找出Dn和Dm后方可安排正式實(shí)驗(yàn)。

2、正式實(shí)驗(yàn)：在預(yù)試實(shí)驗(yàn)測(cè)得Dn和Dm的劑量范圍內(nèi)設(shè)4～6個(gè)劑量組，最多10組。最理想的結(jié)果是使LD50的上下各有2～3組。組數(shù)愈少，準(zhǔn)確性愈差。各劑量組的動(dòng)物要求相等，至少10只動(dòng)物（分組時(shí)應(yīng)注意分層隨機(jī)均勻化的原則)。本實(shí)驗(yàn)要求最大反應(yīng)率為100%，最小反應(yīng)率為0%， 或至少反應(yīng)率接近100%或0%。組間劑量比值（1：K)，常用1：0.8或1：0.75。如實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)相鄰劑量有重復(fù)的100%和0%反應(yīng)率時(shí)，應(yīng)將靠邊的組棄去不計(jì)，使大劑量組只有一個(gè)100%的反應(yīng)率，小劑量組也只有一個(gè)0%的反應(yīng)率。

分組完畢和各組劑量算出后，分組灌服或注射不同劑量的受試藥物。為能得到理想的結(jié)果，實(shí)驗(yàn)最好從中間劑量開始，以便從最初幾個(gè)劑量組動(dòng)物接受藥物后的反應(yīng)來(lái)判斷兩端劑量是否合適，便于調(diào)整劑量和組數(shù)。為了提高實(shí)驗(yàn)的精確度和節(jié)省藥物，受試藥物可按“低比稀釋法”配置。即使每只動(dòng)物的用藥體積相等（0.2ml/10g)，而溶質(zhì)不等。給藥后逐日觀察并記錄中毒反應(yīng)、死亡率和死亡情況。

【結(jié)果】按表填寫數(shù)據(jù)

馬錢子水煎液對(duì)小鼠死亡率的影響

公式1: （logLD50) X50=Xm-i(ΣP-05)

則LD50=log^-1 X50

公式2：   Sx50=i*

公式3：LD50的95%可信限=lg^-1（X50±1.96S X50)

LD50的平均可信限= LD50±（LD50高限- LD50低限)/2

Xm：最大劑量組劑量的對(duì)數(shù)值

i：相鄰兩組劑量（d)對(duì)數(shù)值之差，或相鄰兩組高劑量與低劑量之比的對(duì)數(shù)。

P：各組動(dòng)物的死亡率，用小數(shù)表示。

ΣP：為各組動(dòng)物死亡率的總和。

n：每組動(dòng)物數(shù)。

Sx50：logLD50的標(biāo)準(zhǔn)誤。

實(shí)驗(yàn)二  柴胡對(duì)發(fā)熱家兔的解熱作用

【目的】觀察柴胡注射液對(duì)發(fā)熱兔體溫的影響；了解柴胡解熱作用的特點(diǎn)。

【原理】本實(shí)驗(yàn)采用傷寒副傷寒二聯(lián)菌苗作為致熱原作成實(shí)驗(yàn)性動(dòng)物發(fā)熱模型，并以正常兔作為對(duì)照，觀察柴胡注射液的解熱特點(diǎn)。

【器材】數(shù)字式肛溫計(jì)、磅秤、兔固定架、注射器、棉球

【方法】取健康兔2只，標(biāo)記稱重，兔架上固定。分別測(cè)肛溫兩次，以均值作為正常體溫。

從甲、乙兩兔耳緣靜脈注射傷寒副傷寒二聯(lián)菌苗1ml/kg體重，待體溫升高超過1℃后（約需0.5～1h)，分別按以下安排給藥。

甲兔（發(fā)熱兔)：肌注生理鹽水0.5ml/kg；

乙兔（發(fā)熱兔)：肌注柴胡注射液0.5ml/kg。

給藥后30、60、90、120min分別測(cè)試肛溫。

【結(jié)果】將所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理后，參見表記錄。

柴胡對(duì)家兔體溫的影響℃（±SD)

【注意】

（1)兔應(yīng)健康，雌性無(wú)孕，體溫正常（38.5～39.5℃)。

（2)每次測(cè)溫前應(yīng)在肛溫計(jì)前部涂以少許液體石蠟，測(cè)溫時(shí)操作應(yīng)盡可能輕柔。

（3)使用測(cè)溫計(jì)時(shí)，先按下開關(guān)按鈕，插入肛門深度為4～5cm。當(dāng)顯示器上的“℃”標(biāo)記停止閃爍時(shí)（約需1min)取出。記錄體溫后關(guān)閉電源。

（4)本實(shí)驗(yàn)是最常用的方法，其特點(diǎn)是致熱快，維持時(shí)間短。家兔體溫較恒定。此外近年來(lái)有直接用內(nèi)生性致熱源作為致熱劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，效果較好。

【思考題】分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果后，說(shuō)明柴胡解熱作用的特點(diǎn)。

實(shí)驗(yàn)三  生大黃對(duì)小鼠排便時(shí)間和數(shù)量的影響（炭末法)

【目的】觀察生大黃對(duì)小鼠腸道炭末推進(jìn)時(shí)間、數(shù)量的影響。

【原理】運(yùn)用色素流動(dòng)法，以黑色炭末為指示劑，以排黑便的時(shí)間、性狀和數(shù)量為指標(biāo)，可直接觀察生大黃對(duì)腸道推進(jìn)功能的影響。生大黃瀉下通便，可使腸蠕動(dòng)加速，炭末推進(jìn)快，排黑便時(shí)間短，次數(shù)多，成形差。

【器材】小鼠灌胃針頭、1ml注射器、鐘罩、濾紙、鼠籠、臺(tái)秤、棉簽、記時(shí)鐘、鑷子。

【藥品】生大黃水煎液1g/ml（含炭末0.1g/ml)、炭末生理鹽水混懸液0.1g/ml

【動(dòng)物】小白鼠

【方法】取禁食20～24h體重相近的小鼠6只（腹瀉者剔去)，隨機(jī)分成2組，標(biāo)記。2組分別灌服上述兩種炭末混懸液0.5ml/只。各鼠分置于鋪有濾紙的鐘罩內(nèi)進(jìn)行觀察，記錄小鼠出現(xiàn)黑便的時(shí)間、性狀和數(shù)目，以及稀糞沾染肛門情況。連續(xù)觀察4h，每組3只小鼠取平均值，然后綜合全實(shí)驗(yàn)室結(jié)果，進(jìn)行比較。

【結(jié)果】按表記錄分析。

生大黃對(duì)小白鼠排便的影響（±SD)

【注意】

（1)吸藥液前，應(yīng)將藥液搖勻，以保證藥量及炭末量準(zhǔn)確。

（2)排黑便的記數(shù)和記時(shí)，以開始排出黑便為準(zhǔn)。

（3)記數(shù)黑便時(shí)應(yīng)隨時(shí)將小鼠排出的已記數(shù)的黑便清除，以免影響記數(shù)的準(zhǔn)確性。

（4)實(shí)驗(yàn)小鼠在禁食與實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)讓其飲水，否則影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

[附]生大黃制劑的制備：取生大黃100g，砸成小塊后，以水浸沒。冷浸24h后，過濾（三層紗布)，40℃水浴濃縮至1g/ml.

【思考題】觀察生大黃瀉下的作用，臨床應(yīng)用大黃致瀉時(shí)應(yīng)注意什么？

實(shí)驗(yàn)四  生大黃對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響（炭末法)

【目的】了解生大黃對(duì)腸蠕動(dòng)的影響。

【原理】利用黑色炭末作為指示劑，觀察炭末在腸道的推進(jìn)距離�？诜�生大黃可刺激腸蠕動(dòng)加速，有瀉下作用，故對(duì)胃腸實(shí)熱有“釜底抽薪”之功。大黃久煎或炮制后，致瀉成分分解，作用減弱。故選用生大黃作為實(shí)驗(yàn)用藥。

【器材】手術(shù)剪、眼科鑷、直尺、注射器、灌胃針頭、天平、燒杯、搪瓷盤。

【藥品】 生大黃水煎液1g/ml（含炭末0.1g/ml)、炭末生理鹽水混懸液0.1g/ml

【動(dòng)物】小白鼠

【方法】取禁食20～24h體重相近的6只小白鼠，隨機(jī)分為2組，每組3只，標(biāo)記。分別用上述2種炭末液0.3ml/10g體重灌胃。給藥30min后脫頸椎處死，打開腹腔分離腸系膜，剪取上端至幽門，下端至回盲部的腸管，置于托盤上。輕輕將小腸拉成直線，測(cè)量腸管長(zhǎng)度作為“小腸總長(zhǎng)度”。從幽門至炭末前沿的距離作為“炭末在腸內(nèi)推進(jìn)距離”。取各組小鼠平均值，用公式計(jì)算炭末推進(jìn)百分率；并觀察各組小腸容積是否增大。

炭末推進(jìn)率=炭末在腸內(nèi)推進(jìn)距離（cm)/小腸全長(zhǎng)（cm)*100%

【結(jié)果】按表記錄分析

生大黃對(duì)小白鼠小腸蠕動(dòng)的影響（X±SD)

【注意】開始給藥至處死動(dòng)物的時(shí)間必須準(zhǔn)確，以免時(shí)間不同而造成實(shí)驗(yàn)誤差。

【思考題】大黃致瀉的主要成份及作用機(jī)理是什么？

實(shí)驗(yàn)五  雙黃連口服液對(duì)蛋清致大白鼠后足跖腫脹的影響

【目的】學(xué)習(xí)用雞蛋清引起大鼠足跖急性炎癥的方法，觀察雙黃連口服液的抗炎作用。

【原理】以雞蛋清（異種蛋白質(zhì))作為致炎劑，注入大鼠足跖內(nèi)，可引起局部急性炎癥，使局部組織腫脹，該致炎作用可持續(xù)6小時(shí)。通過測(cè)量致炎前后大鼠足跖容積的變化來(lái)觀察雙黃連口服液的抗炎作用。

【器材】天平、鼠籠、足容積測(cè)定裝置、注射器、大鼠灌胃器

【藥品】雙黃連口服液、100%蛋清液、生理鹽水

【方法】取大鼠4只，稱重，標(biāo)記，分為2組。將大鼠右后肢用手固定，在其踝關(guān)節(jié)處用圓珠筆作一標(biāo)記，動(dòng)物的右后肢浸入足容積測(cè)量裝置內(nèi)，浸入深度以標(biāo)記處為界。從該裝置的刻度吸管處所讀取的數(shù)值即為動(dòng)物右后足的正常體積（ml).連測(cè)兩次，求其平均值為正常值。給2組動(dòng)物分別灌服以下藥物：雙黃連口服液、生理鹽水，容量均為1ml/100g。30min后在每鼠右后肢足掌心向踝關(guān)節(jié)方向進(jìn)針，皮下注射100%蛋清液0.1ml/只。其后每半小時(shí)分別測(cè)定大鼠右后足跖的容積，連續(xù)5次。

綜合全實(shí)驗(yàn)室結(jié)果，按下式計(jì)算藥物在給藥后的不同時(shí)間內(nèi)足腫抑制率及足腫浮腫率：

足腫抑制率=（對(duì)照組足跖容積-藥物組足跖容積)/對(duì)照組足跖容積*100%

足腫浮腫率=（致炎后足容積-致炎前足容積)/致炎前足容積*100%

【結(jié)果】按表記錄

雙黃連口服液對(duì)蛋清致大鼠后足跖腫脹的影響（±SD)

【注意】

（1)測(cè)定足容積時(shí)應(yīng)有專人負(fù)責(zé)，以減少誤差；實(shí)驗(yàn)時(shí)每次均重復(fù)測(cè)定2次。

（2)本實(shí)驗(yàn)測(cè)量方式也可用軟尺量關(guān)節(jié)周長(zhǎng)，但誤差較大。

（3)可采用坐標(biāo)圖表示藥物的足腫浮腫率，橫坐標(biāo)為時(shí)間，縱坐標(biāo)為足腫浮腫率，直觀比較各組的情況。

（4)本實(shí)驗(yàn)時(shí)間根據(jù)情況可在3～6h內(nèi)完成。實(shí)驗(yàn)時(shí)間過短，不易比較藥物作用的特點(diǎn)。

（5)本實(shí)驗(yàn)亦可用1g/dl角叉菜膠、1g/dl瓊脂或1g/dl右旋糖酐生理鹽水液作為致炎劑，皮下注射0.1ml/只。

實(shí)驗(yàn)六  三金片對(duì)家兔的利尿作用（膀胱漏斗法)

【目的】學(xué)習(xí)膀胱漏斗法以觀察三金片的利尿作用。

【原理】三金片為治療泌尿系統(tǒng)感染的特效中藥，文獻(xiàn)報(bào)道有利尿作用。

【器材】兔手術(shù)臺(tái)、注射器、針頭、剪刀、手術(shù)鉗、導(dǎo)尿管、量筒、燒杯、嬰兒秤。

【藥品】三金片水溶液、葡萄糖鹽水、生理鹽水

【動(dòng)物】家兔

【方法】取家兔背位固定在兔臺(tái)上，耳緣靜脈注入5g/dl葡萄糖鹽水10ml/kg，造成水負(fù)荷。耳緣靜脈注射25%烏拉坦麻醉，進(jìn)行手術(shù)，在恥骨聯(lián)合上方沿腹中線作一個(gè)長(zhǎng)約3～4cm的皮膚切口。沿腹白線切開腹壁，將膀胱移出體外。在其頂部用兩把止血鉗提起，在止血鉗之間作一長(zhǎng)約1cm的切口，把膀胱漏斗放入膀胱，漏斗底要罩在兩側(cè)輸尿管的膀胱入口上，用線將膀胱及漏斗柄結(jié)扎固定。收集正常尿量2次，1次10min。一只兔通過灌胃管灌入三金片水溶液10ml/kg，另一只兔灌入同容積生理鹽水，60分鐘后開邕收集尿液。每隔30min收集1次，連續(xù)3次。

【結(jié)果】按表填寫數(shù)據(jù)

三金片水溶液尋家兔的利尿作用

實(shí)驗(yàn)七   木香對(duì)鹽酸－乙醇致大鼠急性胃粘膜損傷的影響

【目的】 觀察木香對(duì)鹽酸-乙醇致大鼠急性胃粘膜損傷的影響，了解木香的理氣及調(diào)和肝脾的作用。

【原理】 急性胃粘膜損傷常有或肝脾不和等病理改變。木香有理氣作用，常用于治療氣滯證。胃酸升高或內(nèi)服高濃度酒精均可導(dǎo)致胃粘膜急性損傷，故可采用鹽酸－乙醇引起大鼠胃粘膜急性損傷，以此觀察木香的理氣及調(diào)和肝脾的功效。

【器材】 2ml及5ml的注射器、大鼠灌胃器、手術(shù)剪、鑷子、夾子、尺子。

【藥品】0.4g/ml的木香水溶液、150mmol/L鹽酸－60％乙醇混合溶液（以15ml鹽酸加無(wú)水乙醇600ml，再加蒸餾水至1000ml，即得)。

【動(dòng)物】 大白鼠。

【方法】 取同一性別、體重為180～200g的大鼠4只，隨機(jī)均分為二個(gè)組：第一組為對(duì)照組，第二組為木香組。禁食48h（不禁水)后，灌胃給予生理鹽水或藥液10ml/kg，1h后每只大鼠灌胃鹽酸－乙醇混合液（1.5ml/只)，再過1h后用過量乙醚麻醉大鼠致死，開腹取胃，用夾子夾緊賁門，由幽門注入1%甲醛溶液5ml，夾緊幽門，將全胃置于1%甲醛溶液中固定10min。沿胃大彎剪開，將胃外翻，用清水輕輕洗去胃內(nèi)容物。將胃平鋪于玻璃板上，用尺子測(cè)量胃粘膜損傷長(zhǎng)度，以損傷長(zhǎng)度（損傷寬度大于1mm者加倍計(jì)算)總和作為胃粘膜損傷指數(shù)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，并按下式計(jì)算抑制率：

抑制率（％)＝（對(duì)照組損傷長(zhǎng)度－用藥組損傷長(zhǎng)度)÷對(duì)照組損傷長(zhǎng)度×100％

【結(jié)果】對(duì)照組大鼠胃粘膜表面可見明顯條索狀和點(diǎn)狀損傷，而木香組損傷較少。將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)填入表內(nèi)。

木香對(duì)鹽酸-乙醇所致大鼠急性胃粘膜損傷的影響

【注意】 禁食期間，大鼠籠內(nèi)不得存留大便，以保證充分禁食。

實(shí)驗(yàn)八  延胡索對(duì)小白鼠的鎮(zhèn)痛作用（熱板法)

【目的】 了解熱板法篩選鎮(zhèn)痛藥的實(shí)驗(yàn)方法；觀察延胡索的鎮(zhèn)痛作用。

醫(yī).學(xué)全在線payment-defi.com【原理】 延胡索能活血行氣止痛。熱板法是篩選鎮(zhèn)痛藥的經(jīng)典方法：小鼠的足部受熱板刺激而產(chǎn)生疼痛時(shí)，就發(fā)生舔足的特殊反應(yīng)。以接觸熱板到舔后足所需的時(shí)間作為痛閾值，以此為觀察指標(biāo)。

【器材】 恒溫水浴箱、大燒杯（500ml)、秒表、天平、注射器（1ml)、鼠籠。

【藥品】 延胡索水溶液4g/ml、生理鹽水、苦味酸。

【動(dòng)物】 雌性小白鼠。

【方法】 調(diào)節(jié)熱板儀溫度，水溫恒定在55±0.5℃。每次取小鼠2只，放入熱板儀內(nèi)。記錄自放入熱板儀至出現(xiàn)舔后足所需時(shí)間（s)，作為該鼠的痛閾值。凡30s內(nèi)不出現(xiàn)舔后足者，棄之不用。依次測(cè)量各小鼠的痛閾值。取預(yù)選合格的小鼠8只，隨機(jī)分為2組，每組4只，編號(hào)、再重測(cè)痛閾1次，將兩次痛閾的平均值作為該鼠給藥前的痛閾值。然后，第一組灌胃延胡索液0.2ml/10g，第二組灌胃等容量的生理鹽水作對(duì)照。給藥后的15、30、45、60、90min測(cè)定各鼠痛閾值。若小鼠在熱板上60s仍無(wú)痛覺反應(yīng)，應(yīng)取出，按60s計(jì)。將結(jié)果記入表內(nèi)，按不同時(shí)間測(cè)定的各鼠痛閾平均值計(jì)算用藥后痛閾提高的百分率。

痛閾提高率＝（給藥后平均痛閾值－給藥前平均痛閾值)/給藥前平均痛閾值×100％

【結(jié)果】按表進(jìn)行記錄。

延胡索對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用

【注意】 

（1)室溫以15～20℃為宜，過低則小鼠反應(yīng)遲鈍，過高則過于敏感，而引起跳躍，影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

（2)正常小鼠一般放入燒杯后10～15s內(nèi)出現(xiàn)不安，舉前肢，踢后肢，跳躍等顯現(xiàn)。這些動(dòng)作均不作為疼痛指標(biāo)，只有舔后足才作為疼痛的指標(biāo)。

（3)一般不選用雄鼠，因雄鼠陰囊可觸及燒杯底部，易呈現(xiàn)敏感反應(yīng)，影響結(jié)果。

【思考題】 試述延胡索鎮(zhèn)痛的有效成分及機(jī)理。

實(shí)驗(yàn)九  延胡索對(duì)小白鼠的鎮(zhèn)痛作用（扭體法)

【目的】 觀察延胡索的鎮(zhèn)痛作用。

【原理】 延胡索能活血行氣止痛。小白鼠腹腔受化學(xué)藥物刺激，表現(xiàn)為扭體反應(yīng)，以此作為指標(biāo)、觀察金鈴子散的鎮(zhèn)痛作用。

【器材】 注射器、燒杯、鼠籠、計(jì)時(shí)器等。

【藥品】 延胡索水煎液1g/ml、0.6％醋酸溶液、生理鹽水。

【動(dòng)物】 小白鼠。

【方法】 將小鼠稱重、標(biāo)記后隨機(jī)分組。給藥組灌服延胡索水煎液0.3ml/10g，對(duì)照組灌服等量生理鹽水。給藥后30min，各鼠腹腔注射0.6％醋酸溶液0.2ml/只。觀察并記錄注射醋酸溶液后15～30min內(nèi)出現(xiàn)扭體反應(yīng)（腹部收縮內(nèi)凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行)的次數(shù)及時(shí)間。計(jì)算延胡索的鎮(zhèn)痛百分率。

鎮(zhèn)痛率＝（對(duì)照組平均扭體次數(shù)－金鈴子散組平均扭體次數(shù))÷對(duì)照組平均扭體次數(shù)×100％

【結(jié)果】將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入表內(nèi)。

延胡索對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用（±SD)

【注意】 

（1)0.6％醋酸溶液必須臨用前配制。

（2)若延胡索為生品，煎煮時(shí)可加入0.1％醋酸或食用醋適量，以助生物堿成分溶出。

（3)小鼠對(duì)疼痛刺激的反應(yīng)差異甚大，據(jù)藥理學(xué)慣例，鎮(zhèn)痛百分率須大于50％才認(rèn)為有鎮(zhèn)痛作用。

（4)也可用0.01％酒石酸銻鉀溶液0.2ml/只致痛，作扭體實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)十  生三七粉對(duì)小白鼠凝血時(shí)間的影響（玻片法)

【目的】 學(xué)習(xí)用玻片法測(cè)定小鼠凝血時(shí)間；觀察生三七對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響。

【原理】 三七屬止血藥，有明顯止血功效，常用于治療咯血、衄血、崩漏、尿血等癥。

【器材】 注射器、載玻片、大頭針、秒表、眼科彎鑷、棉花、鼠籠、天平。

【藥品】 生三七水浸液0.15g/ml、生理鹽水、苦味酸溶液。

【動(dòng)物】 小白鼠。

【方法】 取小鼠6～8只，隨機(jī)分為2組，給藥組灌胃三七水浸液0.3ml/10g，對(duì)照組灌胃生理鹽水0.3ml/10g。30min后，用眼科彎鑷迅速摘去一側(cè)眼球，即有血液流出。于載玻片的兩端各滴一滴血，血滴直徑約5mm，立即用秒表計(jì)時(shí)。每隔30s用清潔大頭針自血滴邊緣向里輕輕撥動(dòng)一次，并觀察有無(wú)血絲挑起。從采血開始至挑起血絲止，所歷時(shí)間即凝血時(shí)間。另一滴血供最后復(fù)驗(yàn)。記錄凝血時(shí)間。

【結(jié)果】按表記錄數(shù)據(jù)。

生三七對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響

【注意】 

（1)凝血時(shí)間可受室溫等因素影響，室溫15℃左右較好。

（2)每次挑血滴時(shí)，不應(yīng)從各個(gè)方向多次挑動(dòng)，以免影響纖維蛋白的形成。

【思考題】 

（1)三七有何功效？止血用的主要方劑有哪些？

（2)三七止血的主要成分是什么？

實(shí)驗(yàn)十一  三七對(duì)小白鼠凝血時(shí)間的影響（毛細(xì)玻管法)

【目的】 學(xué)習(xí)用毛細(xì)玻管測(cè)定凝血時(shí)間的辦法；觀察三七縮短凝血時(shí)間的作用。

【原理】 三七是祛瘀、定痛、止血藥，能誘致血小板釋放止血和凝血活性物質(zhì)，增高血液中凝血酶含量，從而縮短小鼠的正常凝血時(shí)間，達(dá)到止血之效。采用小鼠給藥后一定時(shí)間，取其血液在玻璃毛細(xì)管內(nèi)折斷時(shí)出現(xiàn)血凝絲所歷時(shí)間為指標(biāo)，即可判明三七縮短凝血時(shí)間的作用。

【器材】 1ml注射器、毛細(xì)玻管（內(nèi)徑1mm、長(zhǎng)10cm)、灌胃針頭、天平、秒表。

【藥品】   生理鹽水、三七水浸液0.1g/ml、苦味酸。

【動(dòng)物】   小白鼠。

【方法】 取小鼠6只，隨機(jī)分為2組。2組均按0.2 ml / 10g劑量灌胃，分別給予生理鹽水、三七水浸液。2h后用玻璃毛細(xì)管插入小鼠內(nèi)眥球后靜脈叢，深約4～5mm。自血液流進(jìn)管內(nèi)開始計(jì)時(shí)。血液注滿后取出毛細(xì)管平放于桌上。每隔30s，折斷兩端毛細(xì)管約0.5cm，并緩慢向左右拉開，觀察折斷處是否有血凝絲至血凝絲出現(xiàn)為止，所歷時(shí)間即為血凝時(shí)間。毛細(xì)管兩端數(shù)據(jù)的平均值，即為該鼠的血凝時(shí)間。計(jì)算凝血時(shí)間縮短百分率。

凝血時(shí)間縮短百分率=(對(duì)照組血凝時(shí)間－給藥組血凝時(shí)間)/對(duì)照組凝血時(shí)間×100％

【結(jié)果】按表填寫數(shù)據(jù)。

三七對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響（±SD)

【注意】 

（1)實(shí)驗(yàn)時(shí)室溫最好在15℃左右。

（2)測(cè)試用的毛細(xì)管內(nèi)徑應(yīng)均勻一致。

（3)毛細(xì)玻管采血后不宜長(zhǎng)時(shí)間拿在手中，以免影響凝血時(shí)間。

【思考題】  三七對(duì)凝血時(shí)間有何影響？此作用臨床意義何在？

實(shí)驗(yàn)十二  川芎對(duì)大鼠血液流變性的影響

【目的】

① 學(xué)習(xí)測(cè)量血液流變性的實(shí)驗(yàn)方法；

② 觀察川芎的對(duì)急性“血瘀”證大鼠的防治作用，并分析其作用機(jī)制。

【原理】

中醫(yī)理論認(rèn)為“大怒致瘀”，“外寒也可致瘀”。給大白鼠注射大劑量腎上腺素，模擬暴怒時(shí)機(jī)體狀態(tài)，隨之以冰水浸泡動(dòng)物，模擬外寒侵襲。兩種因素的綜合作用可復(fù)制出大白鼠血液流變性呈粘、濃、凝狀態(tài)的急性“血瘀”證模型。

川芎活血行氣通經(jīng)，對(duì)血液粘、濃、凝狀態(tài)有明顯改善�？梢种蒲�小板聚集,有抗凝血作用,可改善血液流變性。

【材料】

動(dòng)物：大鼠，雌雄各半，體重250g左右；

藥品：15%川芎水煎液、0.5%阿司匹林混懸液、0.1g/dl腎上腺素、生理鹽水、肝素鈉、蒸餾水；

試劑：苦味酸溶液；

主要器材：全自動(dòng)血液粘度測(cè)試儀（YDA-IV型，北京宏潤(rùn)達(dá)科技發(fā)展有限公司)、5ml注射器、20ml燒杯、小水桶及人造冰、紅細(xì)胞壓積管、試管、離心機(jī)、大鼠灌胃器、天平、鼠籠。

【方法】　每組取大鼠4只，稱重，標(biāo)記，隨機(jī)分為兩組（甲、乙組)。甲組給予15%川芎水煎液，灌胃量為2ml/100g，每日1次，連續(xù)7日，乙組給予同容積的生理鹽水。于第7天皮下注射腎上腺素 0.08mg/100g，2h 后將大鼠用冰水刺激5min，過2h再次皮下注射腎上腺素0.08mg/100g。處置后禁食不飲水，次晨取血檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)時(shí)，將動(dòng)物用乙醚麻醉后，剖腹。腹主動(dòng)脈取血2ml以上用于測(cè)定。將血液全部注入肝素抗凝管充分抗凝。取其中1ml用穿刺針加入血沉管靜置1h，再上離心機(jī)4000 r/min ,離心20 min，從右邊，自下而上讀出壓積值。啟動(dòng)儀器，選擇全血或血漿（3000 r/min ,離心10min)，取0.8ml加入切血槽，進(jìn)行測(cè)定。全自動(dòng)血液粘度測(cè)試儀檢測(cè)的相關(guān)指標(biāo)有全血粘度、全血還原粘度、血漿粘度、紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白原、紅細(xì)胞聚集指數(shù)等。

【結(jié)果】

統(tǒng)計(jì)全班各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果，比較用藥后對(duì)大鼠血液流變性的相關(guān)參數(shù)的影響。

藥物對(duì)大鼠血液流變性的影響（±s；n= )  

【注意事項(xiàng)】

① 在進(jìn)行全血粘度的測(cè)量時(shí)，注意有高切、中切和低切三種切變率；

② 抗凝血樣一般在室溫下存放，不要存放于冰箱內(nèi)，采血后，應(yīng)在4h內(nèi)完成測(cè)量工作；

③ 將血樣注入粘度儀前，使血樣充分混勻，并使血樣沿壁緩緩流入，不宜出現(xiàn)氣泡。

④ 全部做完后，必須清洗污水瓶，裝回時(shí)瓶蓋一定要擰緊，否則廢液抽不出來(lái)。

【思考題】

被試藥物改善血液流變學(xué)的作用機(jī)制？

【附注】

1、肝素抗凝管的配置：取肝素鈉一支（2ml，12500u)與8ml蒸餾水混勻，每支試管加入0.1ml，制作100支抗凝管干燥備用。

2、血液粘度計(jì)使用方法：

① 將粘度計(jì)調(diào)整水平，打開粘度計(jì)電源預(yù)熱15min。

② 抽取靜脈空腹血2ml注入抗凝管充分抗凝（輕輕搖勻)，取其中1ml用穿刺針加入血沉管靜置1h，從左邊，自上而下讀出血沉值；再上離心機(jī)4000rpm離心20min，從右邊，自下而上讀出壓積值。

③ 開始測(cè)試，屏幕顯示“全自動(dòng)血液粘度測(cè)試儀”。按“確定”鍵選擇全血和血漿（3000rpm,10min)的切變率，移動(dòng)光標(biāo)選擇全血或血漿，并取全血或血漿0.8ml加入切血槽后，按“確認(rèn)”鍵后自動(dòng)測(cè)試，全血由高切到低切。

④ 測(cè)試完畢后按“打印”鍵，自動(dòng)打印出設(shè)定切變率下的粘度值（如聯(lián)機(jī)操作數(shù)值直接傳送到計(jì)算機(jī))。

⑤ 測(cè)試完按“沖洗”鍵自動(dòng)沖洗并吹干，如認(rèn)為未干，也可單獨(dú)按“吹干”鍵吹干。

實(shí)驗(yàn)十三   當(dāng)歸抗大鼠血栓形成的作用

【目的】

①學(xué)習(xí)利用體外血栓形成儀進(jìn)行抗血栓形成的實(shí)驗(yàn)方法；

②觀察當(dāng)歸抗血栓形成的作用，并分析其作用機(jī)制。

【原理】

根據(jù)流體力學(xué)原理，在一個(gè)恒速轉(zhuǎn)動(dòng)密閉圓環(huán)內(nèi)的血液被動(dòng)流動(dòng)是一個(gè)復(fù)雜的三維流動(dòng)，這種產(chǎn)生的回流在圓環(huán)轉(zhuǎn)動(dòng)血液下降面上存在有向中心主流的沖擊，這種沖擊可以啟動(dòng)血小板聚集進(jìn)而形成血栓，而形成的血栓因重量的影響，使血液下降面的沖擊更加明顯。

當(dāng)歸所含的阿魏酸能抑制體外血栓形成。小劑量阿司匹林抑制TXA₂合成酶，減少TXA₂的合成，可抑制血小板聚集，防止血栓。

【材料】

動(dòng)物：大鼠，雌雄各半，體重200g左右；

藥品：100%當(dāng)歸水煎液、0.25%阿司匹林混懸液、生理鹽水；

試劑：1%硅油（用乙醚稀釋)、苦味酸溶液、麻醉乙醚；

主要器材：體外血栓形成儀 （ YDA-IV型，北京宏潤(rùn)達(dá)科技發(fā)展有限公司)、2ml硅化注射器、硅化硅膠血栓管、天平、玻璃培養(yǎng)皿、濾紙、恒溫干燥箱、眼科鑷子、刻度尺、手術(shù)剪、秒表、大鼠灌胃器、鼠籠。

【方法】

   每組取健康大鼠4只，稱重，標(biāo)記，隨機(jī)分為兩組（甲、乙組)。甲組給予100%當(dāng)歸水煎液，灌胃量為2ml/100g，每日1次，連續(xù)5日，乙組給予同容積的生理鹽水。

實(shí)驗(yàn)時(shí)，將動(dòng)物用乙醚麻醉后，剖腹。用硅化注射劑自腹主動(dòng)脈取血2ml以上用于測(cè)定。調(diào)節(jié)體外血栓儀，使其溫度恒定在37⁰C，轉(zhuǎn)速為17r/min。將所取血液注入已經(jīng)標(biāo)好刻度線（1.8ml)的硅膠血栓管中，套緊血栓管裝入血栓形成儀中，啟動(dòng)儀器，用秒表計(jì)時(shí)。儀器轉(zhuǎn)動(dòng)15min后，停機(jī)，取下血栓管環(huán)，打開，將管內(nèi)血液以及已經(jīng)形成的血栓傾倒于鋪有濾紙的玻璃培養(yǎng)皿上。用眼科鑷子輕提起血栓頭，移放在另外干燥的濾紙上，測(cè)量血栓長(zhǎng)度（mm)。用濾紙將血栓表面血液吸干，將其放在已知重量的濾紙上，在天平上稱重，所得重量減去濾紙重量即為血栓的濕重（mg)。在上述血栓放置于64⁰C恒溫干燥箱中烘干30min;取出后稱重所得重量為血栓干重（mg)。

【結(jié)果】

統(tǒng)計(jì)全班各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果，比較用藥后體外血栓長(zhǎng)度、濕重及干重的變化。

藥物對(duì)體外血栓形成的影響 （±s；n= )

【注意事項(xiàng)】

① 自動(dòng)物腹主動(dòng)脈取血易發(fā)生出血現(xiàn)象，操作應(yīng)小心；

② 每次注入血栓管的血液應(yīng)恒定量；

③ 測(cè)定血栓長(zhǎng)度時(shí)，切勿用力拖拉血栓；

④ 測(cè)定血栓濕重時(shí)，務(wù)必用濾紙吸干血栓表面的血液；

⑤ 烤干血栓時(shí)，須嚴(yán)格掌握考箱溫度和烘烤時(shí)間，避免血栓發(fā)生炭化。

【思考題】

   ①被試藥物抗血栓形成的作用機(jī)制？

   ②進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)注意掌握哪些要點(diǎn)？

實(shí)驗(yàn)十四  丹參抗大鼠血小板聚集的作用

【目的】

① 熟悉血小板聚集儀的操作，學(xué)習(xí)使用血小板聚集儀觀測(cè)藥物抗血小板聚集的實(shí)驗(yàn)方法；

② 觀察丹參（阿司匹林)抗血小板聚集的作用以及作用的環(huán)節(jié)。

【原理】

血小板懸浮在血漿中呈現(xiàn)輕度混濁，這種血漿稱為富血小板血漿（PRP)。當(dāng)一束聚集光通過它時(shí)，透光率與血漿濁度成反比；而血漿濁度與血小板數(shù)成正比。將可以引起血小板聚集的物質(zhì)（例如ADP、膠原、腎上腺素等)加入不斷攪拌的PRP時(shí)，隨著血小板聚集，血小板數(shù)目減少，則透光率增加。以貧血小板血漿（PPP)的透光率為100%血小板聚集，PRP的透光率為0血小板聚集；將隨著血小板聚集產(chǎn)生的透光率變化，通過光敏元件轉(zhuǎn)換為電量變化，并以曲線形式記錄下來(lái)，就成為反映血小板聚集的速度和程度的客觀指標(biāo)。

丹參所含的丹參素、丹參酮ⅡA 磺酸鈉等均能抑制血小板聚集。小劑量阿司匹林抑制TXA2合成酶，減少TXA2的合成，可抑制血小板聚集，防止血栓。

【材料】

動(dòng)物：大鼠，體重200g左右；

藥品：100%丹參水煎液、0.5%阿司匹林混懸液、生理鹽水；

試劑：0.01%二磷酸腺苷（ADP)、0.2mol/L磷酸緩沖液、3%戊巴比妥鈉、3.8%枸櫞酸鈉、1%硅油（以乙醚稀釋)、苦味酸溶液；

主要器材：多功能血液凝聚儀（MPG-3E型，上海斯隆醫(yī)電設(shè)備有限公司)、離心機(jī)、硅化離心管、硅化注射器（10ml)、手術(shù)剪、手術(shù)鑷、眼科鑷、微量進(jìn)樣器（10µl、200µl)、大鼠灌胃器、天平、2ml注射器、4號(hào)針頭、5ml注射器、7號(hào)針頭、鼠籠。

【方法】

  各組取健康雄性大鼠4只，稱重，標(biāo)記，隨機(jī)分為兩組（甲、乙組)。甲組給予100%丹參水煎液（阿司匹林)，灌胃量為1ml/100g，每日1次，連續(xù)5日，乙組給予同容積的生理鹽水。末次給藥后，大鼠禁食不禁水12h后用于實(shí)驗(yàn)。將大鼠以戊巴比妥鈉（0.1ml/100g)腹腔注射麻醉，剖腹用注射器自腹主動(dòng)脈取血；將血液與枸櫞酸鈉抗凝液以9：1比例在硅化離心管中輕輕混勻：血液以800r/min離心4min；吸取上層米黃色液體即為富血小板血漿（PRP)；所余血液3000r/min離心8min，所得上清液即為貧血小板血漿（PPP)。打開聚集儀和記錄儀開關(guān)，使儀器預(yù)熱；調(diào)節(jié)聚集儀恒溫保持在37±1⁰C。取3只方型測(cè)量杯，其中兩只各加入PPP200µl，另外一只加入PRP200µl，置于聚集儀中預(yù)熱5min;以PPP杯校正血小板計(jì)數(shù)表至“0”；以PPP稀釋PRP杯，使PRP的血小板 計(jì)數(shù)在24萬(wàn)～26萬(wàn)/mm³范圍內(nèi)。

將調(diào)好血小板數(shù)的PRP和PPP測(cè)定杯置于聚集儀測(cè)量槽內(nèi)預(yù)熱至恒溫（36.8～37⁰C)；以PRP調(diào)記錄儀零點(diǎn)，以PPP調(diào)節(jié)幅度。將攪拌小棒加入測(cè)定杯中，溫育3min后，啟動(dòng)聚集儀的記錄儀開關(guān)，加入ADP10µl，描記6min的聚集曲線。在描記的兩組動(dòng)物的血小板聚集曲線上計(jì)算1min、3min、5min的聚集強(qiáng)度（1A、3A、5A)、最大聚集強(qiáng)度（MA)、到達(dá)最大聚集強(qiáng)度時(shí)間（T_MA)、1/2最大聚集強(qiáng)度時(shí)間（T_1/2MA)；并以MA比較兩組的聚集抑制百分率。

聚集抑制率=  對(duì)照組最大聚集強(qiáng)度-藥物組最大聚集強(qiáng)度

對(duì)照組最大聚集強(qiáng)度

【結(jié)果】 

統(tǒng)計(jì)全班各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果，比較用藥后對(duì)血小板聚集各參數(shù)的變化。  　

藥物抗血小板聚集作用（±s；n= )

【注意事項(xiàng)】

①取血注射器及離心管必須用硅油硅化；

②取血后必須在2h內(nèi)完成測(cè)定工作；

③向測(cè)量杯中加液時(shí)，不得有氣泡出現(xiàn)。

【思考題】

①丹參（阿司匹林)抑制血小板聚集的作用點(diǎn)是什么？

②影響本實(shí)驗(yàn)的因素有哪些？

實(shí)驗(yàn)十五  復(fù)方丹參滴丸抗家兔血栓形成的作用

【目的】 觀察復(fù)方丹參滴丸抗血栓形成的作用；掌握家兔體外頸總動(dòng)脈-頸外靜脈血流旁路形成血栓的方法。

【原理】 復(fù)方丹參滴丸為現(xiàn)今臨床常用的心血管系統(tǒng)疾病藥物。本實(shí)驗(yàn)利用家兔體外頸總動(dòng)脈-頸外靜脈血流旁路法形成血小板血栓。動(dòng)脈血流中的血小板，當(dāng)接觸絲線的粗糙面時(shí)粘附于線上，血小板聚集物環(huán)繞線的表面形成血小板血栓，血小板的粘附聚集功能受到抑制時(shí)，形成血栓的重量就較輕。因此，從血栓重量可測(cè)知血小板的粘附聚集功能。

【器材】 手術(shù)鉗、絲線（4號(hào)、7號(hào))、聚乙烯管（內(nèi)徑1mm、2mm)、動(dòng)脈夾。

【藥品】 復(fù)方丹參滴丸溶液，12500u/ml肝素注射液，25%烏拉坦。

【動(dòng)物】 家兔，雄性1.5～2kg。

【方法】 取家兔，稱重，靜脈注射25%烏拉坦4ml/kg，氣管內(nèi)插聚乙烯管，并分離右頸總動(dòng)脈及左頸外靜脈。

在三段聚乙烯管的中段放入一根長(zhǎng)5cm的4號(hào)手術(shù)絲線。將肝素生理鹽水溶液（50u/ml)充滿聚乙烯管腔。當(dāng)管的一端插入左頸外靜脈后，從聚乙烯管注入肝素50u/kg，夾住管壁。將管的另一端插入右頸總動(dòng)脈。手術(shù)完成后立即灌胃給予藥物（給藥組)或生理鹽水（對(duì)照組)。給藥容量為10ml/kg。30min后開放血流，則血液從右頸總動(dòng)脈流經(jīng)聚乙烯管，返回左頸外靜脈。開放血流15min后中斷血流，迅速取出絲線稱重，總重量減去絲線重即血栓濕重。按下列公式計(jì)算抑制率：

抑制率=（對(duì)照組血栓重—給藥組血栓重)÷對(duì)照組血栓重×100%

【結(jié)果】 按表記錄數(shù)據(jù)。

復(fù)方丹參滴丸對(duì)家兔血栓形成的影響

【注意】

（1)手術(shù)過程要求迅速，操作熟練。

（2)注意及時(shí)吸出氣管分泌物，保持呼吸道通暢。

（3)嚴(yán)格控制并準(zhǔn)確給予生理鹽水肝素的劑量50u/kg，否則影響血栓的形成。

【附】 本法反映整體動(dòng)脈血流中血小板的粘附聚集功能，該實(shí)驗(yàn)條件控制較嚴(yán)。血流速度、血小板數(shù)等均能影響血小板血栓的形成，本實(shí)驗(yàn)誤差較大。

亦可取家兔或大鼠動(dòng)脈血用體外血栓儀進(jìn)行體外血栓形成試驗(yàn)，比較給藥組與對(duì)照組的體外血栓濕重和干重，并計(jì)算抑制率。

【思考題】 通過本實(shí)驗(yàn)，試討論復(fù)方丹參滴丸抗血栓形成的作用和機(jī)理。

實(shí)驗(yàn)十六  川貝枇杷膏對(duì)小白鼠的止咳作用（潛伏期觀察法)

【目的】 學(xué)習(xí)氨水引咳法，觀察川貝枇杷膏的止咳作用。

【原理】  氨水為一化學(xué)刺激性物質(zhì)，其氣霧吸入呼吸道后，刺激呼吸道上皮下的感受器，可引起咳嗽。川貝枇杷膏有化痰止咳的功效，用于咳嗽氣喘，咳痰不暢，以及肺虛久咳等多種類型咳嗽。對(duì)這一實(shí)驗(yàn)性咳嗽有抑制作用。

 【器材】  廣口瓶（250 ml)、注射器（1ml、10ml)、針頭、灌胃針頭、秒表。

 【藥品】  濃氨水（25～28%)、生理鹽水、紫菀水煎液（1g/ml)。

 【動(dòng)物】  小白鼠。

 【方法】  取健康小鼠，按體重均分2組，每組5只，第一組灌服川貝枇杷膏0.2ml/10g，第二組服同容積生理鹽水，灌胃給藥1h后，將小鼠放入250 ml的廣口瓶?jī)?nèi)，放入粘有濃氨水的棉球。觀察小鼠咳嗽動(dòng)作（腹肌收縮、張大嘴、有時(shí)可有咳聲)，記錄小鼠咳嗽的潛伏期（由放入棉球開始至發(fā)生咳嗽所需的時(shí)間為潛伏期)，并計(jì)算鎮(zhèn)咳率。

鎮(zhèn)咳率=（用藥組咳嗽潛伏期—鹽水對(duì)照組咳嗽潛伏期)/鹽水對(duì)照組咳嗽潛伏期×100%

 【結(jié)果】  川貝枇杷膏與生理鹽水對(duì)照組比較，咳嗽潛伏期延長(zhǎng)，表明有顯著的止咳作用。按表填寫數(shù)據(jù)。

川貝枇杷膏對(duì)小鼠的止咳作用（±SD)

 【注意】 

（1)每次做完實(shí)驗(yàn)，小鼠取出后，廣口瓶用濕抹布擦凈，使余氣散盡。否則會(huì)影響下一只小鼠咳嗽潛伏期時(shí)間。

（2)放入粘有濃氨水的棉球后，廣口瓶要迅速蓋緊，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

 【思考題】  結(jié)合實(shí)驗(yàn)，討論影響本實(shí)驗(yàn)的因素及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的意義。

實(shí)驗(yàn)十七   酸棗仁對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響

【目的】

① 了解酸棗仁對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響，分析藥物的作用是抑制還是興奮作用；

② 掌握小鼠自發(fā)活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)方法。

【原理】

小鼠自主活動(dòng)記錄儀,主要是記錄小鼠在一定區(qū)域內(nèi)、一定時(shí)間內(nèi)的自主活動(dòng)量,初步判斷藥物對(duì)小鼠的興奮或抑制作用。

酸棗仁通過抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)而有寧心安神的作用；氯丙嗪通過阻斷α₁和H₁ 受體產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用。

【材料】

動(dòng)物：小鼠，體重18～22g，雌雄各半；

藥品：100%酸棗仁水煎液、0.1%鹽酸氯丙嗪溶液、生理鹽水；

主要器材：小鼠自主活動(dòng)記錄儀（ZZ-6型，成都泰盟科技公司產(chǎn)品)、2ml注射器、6號(hào)針頭、小鼠灌胃針頭、天平、鼠籠。

【方法】

每組取小鼠6只，稱重，標(biāo)記，隨機(jī)分兩組（甲、乙組)。甲組按0.1ml/10g灌胃100%酸棗仁水煎液（腹腔注射鹽酸氯丙嗪，按0.1ml/10g給藥)，乙組給予等容積的生理鹽水。給藥30min后將小鼠置于小鼠自主活動(dòng)記錄儀內(nèi)，適應(yīng)5min,然后記錄5min內(nèi)小鼠活動(dòng)次數(shù)。每隔30min記錄1次，連續(xù)觀察4次。

【結(jié)果】 

統(tǒng)計(jì)全班各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果，將總結(jié)果填入下表，比較藥物作用差異。

藥物對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)次數(shù)的影響（±s；n=  )

【注意事項(xiàng)】

① 動(dòng)物宜事先禁食12h，以增加覓食活動(dòng)；

② 測(cè)量時(shí)應(yīng)保持安靜，不應(yīng)有強(qiáng)光、震動(dòng)、噪聲等可能對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的干擾刺激；

③ 自發(fā)活動(dòng)個(gè)體差異大，每組動(dòng)物數(shù)不應(yīng)少于10只；

④ 每次記錄5min內(nèi)小鼠活動(dòng)次數(shù)，如記錄時(shí)間過長(zhǎng)，動(dòng)物則逐漸熟悉環(huán)境，導(dǎo)致活動(dòng)次數(shù)減少。

【思考題】

酸棗仁（氯丙嗪)抑制小鼠自發(fā)活動(dòng)的機(jī)制是什么？

【附注】

小鼠自主活動(dòng)記錄儀使用方法：

① 開機(jī)，小鼠自主活動(dòng)記錄儀液晶屏亮，顯示開機(jī)界面。

② 開機(jī)4s后，自動(dòng)進(jìn)入?yún)��?shù)設(shè)置界面�？稍O(shè)置編號(hào)、系統(tǒng)時(shí)間和定時(shí)時(shí)間等。

③ 將實(shí)驗(yàn)用小鼠放入反應(yīng)箱每格一只，蓋好上蓋；再將反應(yīng)箱放入反應(yīng)箱槽，盡量放置在反應(yīng)槽的中間，保持反應(yīng)箱各邊與反應(yīng)箱槽之間等距。

④ 按[啟動(dòng)]按鍵，儀器可顯示本次測(cè)量的編號(hào)、活動(dòng)數(shù)和站立數(shù)。

⑤ 當(dāng)測(cè)量時(shí)間達(dá)到設(shè)定的定時(shí)時(shí)間時(shí)，測(cè)量自動(dòng)結(jié)束。

實(shí)驗(yàn)十八   天麻對(duì)小鼠睡眠時(shí)間的影響

【目的】

① 了解催眠作用的實(shí)驗(yàn)方法；  ② 觀察藥物的催眠作用。

【原理】

天麻通過抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)而有寧心安神的作用；氯丙嗪通過阻斷α₁和H₁ 受體產(chǎn)生鎮(zhèn)靜安定的作用。戊巴比妥鈉閾下劑量與天麻（氯丙嗪)合用，觀察藥物與戊巴比妥鈉的協(xié)同作用，由此來(lái)驗(yàn)證藥物對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的抑制作用。。

【材料】

動(dòng)物：小鼠，體重18～22g；

藥品：100%天麻水煎液、0.32%戊巴比妥鈉、0.1%鹽酸氯丙嗪溶液、生理鹽水；

試劑：苦味酸溶液；  

主要器材：架盤天平、秒表、1ml注射器、6號(hào)針頭、小鼠灌胃針頭、鼠籠。

【方法】

1、天麻對(duì)小鼠入睡個(gè)數(shù)的影響 每組取小鼠6只，稱重，標(biāo)記，隨機(jī)分為兩組。甲組腹腔注射天麻水煎液，按0.15ml/10g給藥；乙組給予同容量的生理鹽水。給藥后30min，各組由對(duì)側(cè)腹腔注射戊巴比妥鈉0.1ml/10g，以小鼠翻正反射消失1min以上為入睡指標(biāo)，比較各組入睡鼠數(shù)。

2、氯丙嗪對(duì)小鼠睡眠時(shí)間的影響   每組取小鼠6只，稱重，標(biāo)記，隨機(jī)分為兩組。甲組腹腔注射鹽酸氯丙嗪溶液，按0.15ml/10g給藥；乙組給予同容量的生理鹽水。給藥后30min，各組由對(duì)側(cè)腹腔注射戊巴比妥鈉0.1ml/10g，記錄各組小鼠翻正反射消失及恢復(fù)時(shí)間，計(jì)算戊巴比妥鈉催眠潛伏期（從給藥到翻正反射消失的時(shí)間)及催眠時(shí)間（從翻正反射消失到翻正反射恢復(fù)的間隔時(shí)間)。

【結(jié)果】

統(tǒng)計(jì)全班各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果，將總結(jié)果填入下表，比較藥物作用差異。

表1 天麻對(duì)小鼠入睡個(gè)數(shù)的影響（±s；n= )

   表2  氯丙嗪對(duì)小鼠睡眠時(shí)間的影響（±s；n= )

【注意事項(xiàng)】

① 戊巴比妥鈉宜新鮮配制；每次實(shí)驗(yàn)前，都要預(yù)試，找出戊巴比妥鈉的閾下劑量；

② 天麻飲片要預(yù)先浸泡再煎煮，使成分煎出完全。

【思考題】

在本實(shí)驗(yàn)中，天麻和戊巴比妥鈉一起使用增加藥效，體現(xiàn)了藥物之間的何種作用?

實(shí)驗(yàn)十九  人參對(duì)小白鼠游泳時(shí)間的影響（抗疲勞實(shí)驗(yàn))

 【目的】 學(xué)習(xí)小白鼠游泳實(shí)驗(yàn)方法，研究人參的抗疲勞作用。

 【原理】  人參有大補(bǔ)元?dú)狻⒁鏆馍�津之功效。人參促進(jìn)機(jī)體對(duì)糖元和三磷酸腺苷（ATP)等能源物質(zhì)的合成利用，并使劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)產(chǎn)生的乳酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸進(jìn)入三羧酸循環(huán)，為機(jī)體提供更多能量，因而人參可減輕體力勞動(dòng)時(shí)的疲勞。本實(shí)驗(yàn)以小鼠游泳時(shí)間為指標(biāo)觀察人參的抗疲勞作用。

 【器材】  一定容量且深度為25cm的玻璃缸、負(fù)重物、溫度計(jì)、1ml注射器。

 【藥品】  人參水煎液1g/ml、生理鹽水。

 【動(dòng)物】  小白鼠。

 【方法】  玻璃缸內(nèi)加水，水深至20cm，水溫保持在20±0.5℃。取20只小鼠雌雄各半，分別稱重、編號(hào)。按體重性別隨機(jī)均勻分為兩組。給藥組小鼠腹腔注射人參水煎液3g/kg（0.3ml/10g)，注射后立即計(jì)時(shí)，并在尾部束一個(gè)小鼠體重10%的重物。對(duì)照組小鼠每只腹腔注射等容量的生理鹽水，注射后立即計(jì)時(shí)，并在尾部束一個(gè)小鼠體重10%的重物。注射后30min將小鼠分別放入玻璃缸內(nèi)游泳，并重新計(jì)時(shí)。注意觀察當(dāng)小鼠頭部沉入水中10s不能浮出水面者即為體力耗竭，即刻計(jì)時(shí)為小鼠的游泳時(shí)間。與對(duì)照組小鼠比較進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，測(cè)其顯著性。

【結(jié)果】按表記錄。

人參水煎液對(duì)小鼠游泳時(shí)間的影響（±SD)

 【注意】

 （1)最好是小鼠單獨(dú)游泳。若2只以上同時(shí)游泳，應(yīng)注意觀察，不使小鼠彼此靠近，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

（2)水溫如果升高到28～30℃或小鼠負(fù)重物較輕（5%體重)均會(huì)使小鼠游泳時(shí)間明顯延長(zhǎng)。 

實(shí)驗(yàn)二十  人參對(duì)小白鼠耐常壓缺氧的作用

 【目的】  學(xué)習(xí)小鼠耐常壓缺氧的實(shí)驗(yàn)方法，研究人參增強(qiáng)機(jī)體耐常壓缺氧能力。

 【原理】  缺氧對(duì)機(jī)體是一種劣性刺激，影響機(jī)體各種代謝，特別是影響機(jī)體的氧化供能，最終會(huì)導(dǎo)致機(jī)體的心、腦等重要器官供氧不足而死亡。人參可提高機(jī)體的血氧利用率，降低機(jī)體耗氧量。同時(shí)人參可擴(kuò)張血管（特別是冠脈和軟腦膜血管)，改善微循環(huán)，增加供血供氧量，從而改善機(jī)體的缺氧狀態(tài)，顯示人參大補(bǔ)元?dú)�，益氣生血之功效。本�?shí)驗(yàn)以小鼠在常壓缺氧條件下呼吸停止死亡為指標(biāo)，研究人參的耐缺氧作用。

 【器材】  200ml磨口廣口瓶、1ml注射器、秒表。

 【藥品】  人參水煎液0.1g/ml，鈉石灰（或等量氫氧化鈉或碳酸鈣)、生理鹽水、凡士林。

 【動(dòng)物】  小白鼠。

 【方法】  取小鼠20只分別稱重、編號(hào)，按體重、性別隨機(jī)分為兩組。給藥組小鼠腹腔注射人參水煎液3 g/kg（0.3ml/10g)，對(duì)照組小鼠腹腔注射等量生理鹽水。注射后30min將小鼠放入盛有10g鈉石灰的廣口瓶?jī)?nèi)（每瓶放1只小鼠)，用凡士林涂抹瓶口蓋嚴(yán)，使之不漏氣，立即計(jì)時(shí)。以呼吸停止為指標(biāo)，觀察小鼠死亡的時(shí)間。

【結(jié)果】按表記錄。

人參水煎液對(duì)小鼠常壓耐缺氧作用（±SD)

 【注意】 

（1)每瓶?jī)?nèi)最好只放1只小鼠，以防互相擾動(dòng)影響耐缺氧時(shí)間測(cè)定。

（2)廣口瓶容積可選用150～200ml。瓶蓋一定要密閉封嚴(yán)，以防漏氣。

（3)具有鎮(zhèn)靜作用的藥物也能延長(zhǎng)缺氧的存活時(shí)間。

 【思考題】  人參為何能延長(zhǎng)小鼠在常壓缺氧條件下的存活時(shí)間。

實(shí)驗(yàn)二十一  黨參對(duì)小鼠記憶獲得性障礙的改善作用（跳臺(tái)法)

   【目的】  學(xué)習(xí)記憶獲得性障礙模型的制作方法，掌握用跳臺(tái)法觀察中藥的益智作用。

 【原理】  小鼠跳臺(tái)儀底面可以通電，底面上放置1個(gè)絕緣的跳臺(tái)。當(dāng)小鼠在一次訓(xùn)練中受到電擊時(shí)，跳上跳臺(tái)可逃避電擊，從而獲得記憶。記憶障礙模型組動(dòng)物在訓(xùn)練前注射膽堿受體阻斷劑——樟柳堿或東莨菪堿造成記憶障礙，在一定時(shí)間內(nèi)學(xué)習(xí)記憶能力下降，跳下潛伏期縮短，跳下次數(shù)增加。通過記憶障礙模型動(dòng)物可觀察補(bǔ)益藥復(fù)方黨參對(duì)小鼠記憶障礙的改善作用。

 智力低下多見于虛證，是由于氣血虧損，心脾兩虛導(dǎo)致腎精不足，髓海不充所致。許多具有補(bǔ)益作用的中藥及其復(fù)方制劑常有益智、增強(qiáng)記憶和填髓補(bǔ)腦等功效。

 【器材】  小鼠跳臺(tái)儀：為一個(gè)60cm×12cm×18cm的被動(dòng)回避反射箱，箱內(nèi)用不透明的黑色塑料板分隔成5間，箱底鋪以銅柵，銅絲直徑為2mm，間隔為5mm。每間左后方放置一個(gè)高和直徑均為405cm的橡皮墊，作為跳臺(tái)。可調(diào)變壓器、秒表5只、1ml注射器3支。

 【藥品】  黨參10g/ml、東莨菪堿1mg/ml、腦復(fù)康10mg/ml。

 【動(dòng)物】  小白鼠。

 【方法】  用小鼠6只，雄性，體重為15±2g，按體重隨機(jī)分為3組，每組2只。分別為給藥組、模型組和對(duì)照組。首先將可調(diào)變壓器與跳臺(tái)儀相連，用變壓器控制電流強(qiáng)度。訓(xùn)練前10min，模型組、給藥組小鼠分別腹腔注射東莨菪堿2mg/kg，對(duì)照組腹腔注射等量的生理鹽水。訓(xùn)練時(shí)，同時(shí)將5只小鼠分別放入小室內(nèi)，適應(yīng)3min，然后通以36V電流。小鼠雙足同時(shí)接觸銅柵為觸電，視為錯(cuò)誤反應(yīng)。訓(xùn)練5min并記錄觸電次數(shù)。2h后重新測(cè)試，觀察小鼠記憶情況。測(cè)試時(shí)，先把小鼠放在跳臺(tái)上，記錄并比較5min內(nèi)跳下次數(shù)，作為記憶指標(biāo)。統(tǒng)計(jì)、分析并比較3或5min內(nèi)跳下次數(shù)及跳下潛伏期（將小鼠放到臺(tái)上開始計(jì)時(shí)，到第一次雙足觸電時(shí)間)作為記憶指標(biāo)，比較各組間差異。

 【結(jié)果】按表記錄。

黨參對(duì)東莨菪堿所致小鼠記憶獲得障礙的改善作用（±SD)

 【注意】

 （1)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持安靜，光線不宜過強(qiáng)，室溫應(yīng)控制在20～25℃；實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)2～3d。

（2)實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物應(yīng)預(yù)先經(jīng)過挑選，兩前肢間皮膚電阻在150～300kΩ之間為宜，實(shí)驗(yàn)時(shí)各組間動(dòng)物應(yīng)交叉進(jìn)行，以減少時(shí)辰的影響。

（3)實(shí)驗(yàn)過程中要及時(shí)清理動(dòng)物大小便，實(shí)驗(yàn)完成后跳臺(tái)儀底部要徹底清洗，擦干；銅柵上如污垢沉積會(huì)影響觸電效果。

 此方法簡(jiǎn)便易行，不需要復(fù)雜的技術(shù)設(shè)備，同時(shí)可以觀察5只小鼠的反應(yīng)，適用于初篩。缺點(diǎn)是動(dòng)物個(gè)體差異比較大。

 【附】  記憶損傷模型的制備：中樞抑制藥、M受體阻斷劑、腦蛋白合成抑制劑以及缺氧均可制作各類型學(xué)習(xí)記憶缺損的動(dòng)物模型。例如：用戊巴比妥鈉15～30mg/kg，訓(xùn)練前30min腹腔給藥，或20～40%的乙醇0.1ml/10g訓(xùn)練前30min灌胃，均可制作小鼠記憶獲得性障礙模型；腦蛋白質(zhì)合成抑制劑環(huán)乙酰亞胺120mg/kg訓(xùn)練后腹腔給藥，或致缺氧劑亞硝酸鈉120mg/kg訓(xùn)練后皮下給藥，均可造成記憶鞏固障礙；上述乙醇于測(cè)試前30min灌胃給藥可造成小鼠記憶再現(xiàn)障礙，這些方法均可用于益智藥物的篩選。

 【思考題】 

1.為什么要在記憶損傷模型動(dòng)物身上來(lái)觀察藥物的作用？采用正常動(dòng)物能否觀察到該藥的益智作用？為什么？

2.從實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析黨參有無(wú)益智作用？有何臨床意義？

實(shí)驗(yàn)二十二   鉤藤對(duì)大鼠的降壓作用

【目的】

觀察鉤藤（硝苯地平)的降壓作用及特點(diǎn)；

掌握降壓的實(shí)驗(yàn)方法。

【原理】 鉤藤煎劑對(duì)正�；蚋哐獕簞�(dòng)物，不論靜脈注射或灌胃給藥，均有明顯的降壓作用。硝苯地平通過抑制細(xì)胞外鈣的內(nèi)流，使血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)缺乏足夠的鈣，導(dǎo)致血管平滑肌松弛、血管擴(kuò)張，血壓下降。

【材料】

動(dòng)物：大鼠，體重200～250g；

藥品：10 mg/ml鹽酸鉤藤堿注射液、0.004 %硝苯地平溶液、生理鹽水；

試劑：3 %戊巴比妥鈉、苦味酸溶液；

主要器材：Medlab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)（南京美易科技有限公司)、血壓傳感器、2ml注射器、6號(hào)針頭、大鼠灌胃器、手術(shù)器械（手術(shù)剪、眼科鑷、動(dòng)脈夾、絲線)、天平、鼠籠。

【方法】每組取4只大鼠稱重，標(biāo)記，腹腔注射戊巴比妥鈉，按0.1ml/100g給藥，麻醉后固定；分離出頸總動(dòng)脈，插管及換能器連上生物信號(hào)處理系統(tǒng)；術(shù)后穩(wěn)定10分鐘左右，描記正常血壓曲線；甲組大鼠尾靜脈注射0.1 ml /100g鹽酸鉤藤堿注射液（0.004%硝苯地平溶液)，乙組給予等容積的生理鹽水；記錄血壓，直至血壓基本恢復(fù)正常。

【結(jié)果】統(tǒng)計(jì)全班各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果，比較用藥前后大鼠血壓變化。

藥物的降壓作用（±s；n= )

【注意事項(xiàng)】

每次給藥后，都要輸入3ml生理鹽水將余藥沖入血管內(nèi)。

【附注】Medlab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)測(cè)血壓實(shí)驗(yàn)的步驟：

1、[選工作方式]  本實(shí)驗(yàn)是慢信號(hào)，適合用“記錄儀”方式。點(diǎn)擊快捷工具欄上新建按鈕旁的下拉箭頭，在菜單中選“記錄儀”。直接在“設(shè)置”菜單中用“標(biāo)準(zhǔn)配置”或快捷鍵F4均可。

2、[設(shè)置處理名稱]  鼠標(biāo)移至通道1右上的“通用”提示處，單擊左鍵。在彈出菜單中選“處理名稱”為“血壓”。打開“高級(jí)”按鈕，將對(duì)應(yīng)的處理方法也設(shè)置為“血壓”，按確定鈕返回。

3、[調(diào)放大器]  放大倍數(shù)100左右，上限頻率100左右，下限頻率用直流。

4、[定標(biāo)]

① 連接好血壓傳感器與水銀檢壓計(jì)。

② 轉(zhuǎn)動(dòng)三通開關(guān)，使血壓換能器與大氣相通，MedLab開始采樣并將第一通道基線調(diào)至與零線相重合。然后接上注射器，向管路內(nèi)注射液體，使水銀檢壓計(jì)逐漸升至某一固定壓力值(如200mmHg)，保持采樣一小段時(shí)間后，停止采樣。

③ 移動(dòng)鼠標(biāo)至第一顯示道“顯示調(diào)節(jié)區(qū)”內(nèi)“血壓”處，單擊鼠標(biāo)，選“定標(biāo)”打開定標(biāo)窗口。用鼠標(biāo)點(diǎn)擊波形曲線上升至平穩(wěn)段的一點(diǎn)，在新值處填上水銀檢壓計(jì)示出的壓力值(如200mmHg)，確定后退出定標(biāo)窗，完成定標(biāo)。

④ 轉(zhuǎn)動(dòng)三通開關(guān)，接入動(dòng)脈血管，即可準(zhǔn)備開始采集動(dòng)脈血壓信號(hào)。

5、[開始采樣]  按下“開始”按鈕。適當(dāng)調(diào)整放大倍數(shù)，X、Y軸壓縮比，觀察記錄的曲線（正常情況見下圖)。采樣結(jié)束按“停止”鍵。

實(shí)驗(yàn)二十三  生脈注射液對(duì)低血壓狀態(tài)家兔的升壓作用

【原理】生脈注射液有明顯升壓作用。本實(shí)驗(yàn)以麻醉家兔的低血壓狀態(tài)為模型，觀察生脈注射液的強(qiáng)心升壓作用。

【器材】手術(shù)剪、眼科鑷、眼科剪、止血鉗、聚乙烯管（內(nèi)徑1mm)、玻璃氣管插管、二道生理記錄儀等。

【藥品】生理鹽水、肝素鈉50mg/ml、烏拉坦0.25g/ml、生脈注射液。

【動(dòng)物】家兔，雌雄兼用，250～300g

【方法】取家兔，烏拉坦以100mg/ml腹腔注射麻醉背位固定，作氣管分離，氣管插管，分離一側(cè)頸總動(dòng)脈，插入動(dòng)脈導(dǎo)管，以三通活塞連接二道生理記錄儀上的壓力傳感器。一側(cè)股動(dòng)脈插入一根聚乙烯管用于放血，另一側(cè)股靜脈插管用于注入0.5mg/100g肝素以防血凝并用于輸血。

描記正常頸動(dòng)脈血壓曲線后，股動(dòng)脈放血，使頸動(dòng)脈血壓持續(xù)穩(wěn)定在6.67kPa30分鐘左右，靜脈給藥，觀察血壓的變化。

【結(jié)果】按表記錄。

生脈注射液對(duì)麻醉大鼠低血壓狀態(tài)的作用

【注意】

（1)大鼠不宜過小，至少在250g左右。

（2)股動(dòng)脈放血的速度不宜過快，如血壓低于6.67kPa，可由股靜脈緩慢回輸少量血液，如血壓降至6.67 kPa，由于自身調(diào)節(jié)作用，可能會(huì)回升此時(shí)，由股動(dòng)脈放出少量的血液，使血壓持續(xù)穩(wěn)定在6.67 kPa左右。

（3)血壓不宜放得過低，否則易引起失血性休克并死亡。

實(shí)驗(yàn)二十四  某一中藥活血化瘀作用的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與研究

【目的與要求】

在查閱有關(guān)活血化瘀藥物的藥效學(xué)研究資料的基礎(chǔ)上，結(jié)合中藥藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的一般原則，首先選擇相關(guān)指標(biāo)并設(shè)計(jì)研究方案，交老師修改認(rèn)可后著手實(shí)驗(yàn)研究，總結(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果并寫出研究報(bào)告。該綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)過程意在培養(yǎng)學(xué)生利用已學(xué)知識(shí)獨(dú)立進(jìn)行科研設(shè)計(jì)及操作，初步掌握科研思路、了解科研基本過程、學(xué)會(huì)分析與解決問題等，為將來(lái)從事科學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。

【提示】

   藥物：復(fù)方丹參注射液、當(dāng)歸、川芎等；

   指標(biāo)：1、血瘀證動(dòng)物模型的確定

2、對(duì)血液流變學(xué)的影響

  3、對(duì)血流動(dòng)力學(xué)的影響

  4、對(duì)微循環(huán)的影響

5、對(duì)血小板聚集功能的影響

  6、對(duì)凝血時(shí)間的影響

  7、對(duì)血栓形成的影響