缺 氧
實(shí)驗(yàn)性質(zhì):驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)學(xué)時:4學(xué)時
實(shí)驗(yàn)分組人數(shù):4-5人
一、不同類型缺氧對機(jī)體的影響
(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/b>
復(fù)制動物缺氧性、血液性缺氧模型,觀察缺氧時動物的一般情況、呼吸、口唇黏膜、肝臟及血液顏色的變化,以了解不同類型缺氧對機(jī)體的影響及其表現(xiàn)特點(diǎn)。
(二)實(shí)驗(yàn)材料
1. 實(shí)驗(yàn)動物 小鼠
2. 實(shí)驗(yàn)儀器 天平、CO發(fā)生裝置。
3. 實(shí)驗(yàn)用藥 鈉石灰、甲酸、濃硫酸、5%亞硝酸鈉、1%美蘭、生理鹽水。
4. 器械 小鼠缺氧瓶(125ml帶塞磨口瓶)、5ml量筒、lml注射器、酒精燈、剪刀、鑷子。
(三)實(shí)驗(yàn)步驟與觀察
1. 低張性缺氧(乏氧性缺氧)
(1) 取鈉石灰少許(約5g)及小鼠一只放入缺氧瓶內(nèi),觀察動物的一般情況、呼吸(頻率和深度)、口唇黏膜的顏色,然后塞緊瓶塞,記錄時間,觀察動物缺氧后的表現(xiàn)與正常有何不同,直到動物死亡為止。
(2) 保留動物尸體,待2實(shí)驗(yàn)做完后,再依次打開其腹腔,比較肝臟及血液顏色。
2. 血液性缺氧
(1) 一氧化碳中毒:裝好CO發(fā)生裝置。將一只小鼠放入抽濾瓶中,觀察其正常表現(xiàn),然后與CO發(fā)生裝置連接。取甲酸3ml放入試管內(nèi),然后沿試管壁緩慢加入濃硫酸2ml,塞緊瓶塞。觀察指標(biāo)與方法同上。
(2) 亞硝酸鈉中毒:取體重相近的兩只小鼠,觀察正常表現(xiàn)后,向腹腔注入5%亞硝酸鈉0.3ml,其中一只注入亞硝酸鈉后,立即再向腹腔內(nèi)注入1%美蘭溶液0.3ml,另一只再注入生理鹽水0.3ml。比較兩鼠表現(xiàn)及存活時間有無差異,其余指標(biāo)同上。
(四)注意事項
1. 缺氧瓶一定要密閉。
2. 小鼠腹腔注射,應(yīng)稍靠左下腹,勿損傷肝臟,也應(yīng)避免將藥液注入腸腔及膀胱內(nèi)。
3. 若CO產(chǎn)生不足,可用酒精燈加熱,加速CO的產(chǎn)生,但不可過熱至液體沸騰,以防試管爆炸或CO產(chǎn)生過多過快,動物迅速死亡,觀察指標(biāo)改變不明顯。
二、影響缺氧耐受性的因素
(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/b>
觀察神經(jīng)系統(tǒng)機(jī)能狀態(tài)的改變及外界環(huán)境溫度變化對缺氧耐受性的影響(以低張性缺氧為例),了解條件因素在缺氧發(fā)病中的重要性,以及臨床應(yīng)用冬眠和低溫治療的實(shí)用意義。
(二)實(shí)驗(yàn)材料
1. 實(shí)驗(yàn)動物 小鼠
2. 實(shí)驗(yàn)藥品 1%咖啡因、0.25%氯丙嗪、生理鹽水、鈉石灰、碎冰塊、熱水。
3. 實(shí)驗(yàn)器材 小鼠缺氧瓶、500m1燒杯、溫度計、粗天平、注射器。
(三)實(shí)驗(yàn)步驟與觀察
1.環(huán)境溫度變化對缺氧耐受性的影響
(l) 取小鼠缺氧瓶三個,各放入同等量鈉石灰少許。
(2) 取500m1燒杯二個,都先加入適量自來水,然后一個加碎冰塊將其水溫調(diào)到0-4℃,另一個加入熱水,其溫度調(diào)到40-42℃。
(3) 取體重相近的小鼠三只,稱重后,分別裝入缺氧瓶內(nèi),將缺氧瓶分別放入冰水、熱水和室溫中,瓶塞蓋緊后開始計時。持續(xù)觀察各鼠在瓶中payment-defi.com/jianyan/的活動情況,并計錄存活時間。
(4) 比較三只小鼠表現(xiàn)及存活時間有無差異。
2. 神經(jīng)系統(tǒng)機(jī)能狀態(tài)不同對缺氧耐受性的影響
(1) 取體重相近的小鼠三只
甲鼠:腹腔注射1%咖啡因0.1m1/10g體質(zhì)量。
乙鼠:腹腔注射0.25%氯丙嗪0.1m1/10g體質(zhì)量。
丙鼠:腹醫(yī).學(xué)全在線payment-defi.com腔注射生理鹽水0.1m1/10g體質(zhì)量。
(2) 仔細(xì)觀察待咖啡因、氯丙嗪藥效發(fā)揮后,將三只小鼠分別放入有鈉石灰的缺氧瓶內(nèi),蓋緊瓶塞,開始計錄存活時間。觀察三只小鼠的表現(xiàn)并比較存活時間有何差異。
三、種屬、 年齡對大氣性缺氧耐受性的影響(示教)
(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/b>
觀察蟾蜍、初生小鼠和成年小鼠在大氣性缺氧下的表現(xiàn)和存活時間的不同,以觀察種屬和年齡對缺氧耐受性的影響。
(二)實(shí)驗(yàn)材料
1. 實(shí)驗(yàn)動物 蟾蜍、初生小鼠、成年小鼠。
2. 實(shí)驗(yàn)儀器 真空汞、小動物減壓裝置(用玻璃真空干燥器改裝)。
3. 實(shí)驗(yàn)步驟與觀察
(1) 將蟾蜍、初生小鼠和成年小鼠一同放入真空干燥器內(nèi)。
(2) 用真空泵抽氣(減壓速度為每分鐘上升2000m模擬高度直到9000m模擬高度,減壓600mmHg)并開始計時,觀察動物表現(xiàn),分別記錄其存活時間。
思考題
1. 低張性缺氧呼吸變化的機(jī)制?
2. 各種類型缺氧血液、內(nèi)臟顏色改變的機(jī)制?
3. 影響缺氧耐受性的因素有哪些?
(李淑琴)