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1.2 儀器 WZ50C2型單道微量注射泵：浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)。OneTouchR Ultra血糖儀、試紙：強(qiáng)生(上海)醫(yī)療器材有限公司。
1.3 動(dòng)物 Wistar大鼠，SPF級(jí)，體重300～400g，32只，雄性，由中國科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心/上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，動(dòng)物質(zhì)量合格證：SCXK(滬)20020010。自來水過濾滅菌，置于高壓滅菌的飲水瓶中自由飲用，滅菌大鼠全價(jià)營養(yǎng)顆粒飼料，自由采食。
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 分組、給藥 Wistar大鼠32只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、高劑量降濁合劑組、低劑量降濁合劑組和羅格列酮組各8只，各組體重?zé)o顯著性差異。各組灌予相應(yīng)的藥物7天：空白對(duì)照組予生理鹽水10ml/(kg·d)，陽性對(duì)照組(羅格列酮20mg/(kg·d)、高劑量降濁合劑組(降濁合劑濃縮液 20ml/kg·d)、低劑量降濁合劑組(降濁合劑濃縮液10ml/(kg·d)
2.2 穩(wěn)態(tài)血糖(BG)和葡萄糖輸注速率(GIR) 末次給藥前禁食不禁水4～6h，給藥30min后，大鼠腹腔麻醉。仰位固定于大鼠固定板上，切開頸部正中皮膚。分離右側(cè)頸外靜脈，結(jié)扎遠(yuǎn)心端，用眼科剪作切口，向近心端插入連接三通旋塞的插管(插管中預(yù)先注入80u/ml肝素生理鹽水溶液)。用眼科鑷夾住靜脈壁和插管，向前行進(jìn)0.5cm，結(jié)扎固定插管。分離左側(cè)頸總動(dòng)脈，結(jié)扎遠(yuǎn)心端，用小動(dòng)脈夾夾住近心端，用眼科剪作切口，往近心端反向插入連接1ml針筒的插管(插管中預(yù)先注入50μ/ml肝素生理鹽水溶液)。放開小動(dòng)脈夾，用眼科鑷夾住動(dòng)脈壁和插管，向前行進(jìn)0.5cm，結(jié)扎固定插管。頸靜脈注射50μl/ml肝素0.1ml/100g作預(yù)防抗凝。三通旋塞龔文波，等: 正糖鉗技術(shù)觀察降濁合劑對(duì)大鼠胰島素敏感性的影響的一個(gè)進(jìn)口連接胰島素輸注微量泵另一個(gè)進(jìn)口連接20%葡萄糖輸注微量泵，避免管腔中出現(xiàn)氣泡。待插管手術(shù)和輸注裝置安裝完畢后，開始實(shí)驗(yàn)。用1ml針筒從右頸動(dòng)脈取血0.5ml，用手術(shù)鉗夾住插管，用OneTouchR Ultra血糖儀和試紙測(cè)定基礎(chǔ)血糖約需5μl，放開手術(shù)鉗，將剩余血再注回頸總動(dòng)脈，插管頭上加50ul肝素生理鹽水溶液。胰島素以速率為0.6ml/h(10μl/min)恒速輸注，胰島素輸注10min后，以上述同樣方法取右頸動(dòng)脈血測(cè)血糖值，如血糖低于基礎(chǔ)值，則開始輸注20%葡萄糖，每隔10min取血，測(cè)定血糖。根據(jù)血糖值不斷調(diào)整葡萄糖輸注速率，使血糖維持在5mmol/L上下，一般60min左右可達(dá)穩(wěn)態(tài)。達(dá)穩(wěn)態(tài)后，每5min取血測(cè)血糖，記錄穩(wěn)態(tài)下6～8次葡萄糖輸注速率的平均值作為穩(wěn)態(tài)葡萄糖輸注速率(GIR)，取穩(wěn)態(tài)下6次血糖的平均值作為穩(wěn)態(tài)下的血糖(BG)醫(yī).學(xué).全.在.線payment-defi.com。
2.3 統(tǒng)計(jì)方法 所有數(shù)據(jù)均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)，計(jì)量資料兩組間比較應(yīng)用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析。統(tǒng)計(jì)軟件為spss for windows10.0。
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
圖1 各組大鼠GIR時(shí)間變化過程3.1 各組大鼠GIR時(shí)間變化過程 如圖1，各組大鼠以速率為0.6ml/h(10μl/min)恒速輸注胰島素，空白對(duì)照組GIR迅速下降，60min時(shí)葡萄糖輸注速率(GIR)均值降低至0.13ml/h，120min時(shí)降至0.06ml/h。高、低劑量降濁合劑組和陽性對(duì)照組大鼠GIR分別達(dá)到1.21ml/h、1.04ml/h和1.59ml/h后開始下降，最低值分別為0.89ml/h、0.59ml/h和1.35ml/h，100min后回升至初始值，并有繼續(xù)上升的趨勢(shì)。
3.2 各組大鼠間BG、穩(wěn)態(tài)GIR的比較 高、低劑量降濁合劑組和羅格列酮組大鼠在70～110min穩(wěn)態(tài)血糖(BG)的平均值顯著降低，穩(wěn)態(tài)下的葡萄糖輸注速率(GIR)顯著升高(P<0.01)。高、低劑量降濁合劑組GIR均值顯著低于羅格列酮組。見表1。表1 各組大鼠正糖鉗試驗(yàn)穩(wěn)態(tài)下(70～110min)與正常對(duì)照組比較，^P<0.01;與羅格列酮組比較，△P<0.05
