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[摘要] 目的 探討乙肝病毒前S1蛋白抗原(PreS1Ag)、乙肝病毒基因(HBV-DNA)和乙肝“兩對(duì)半”檢測(cè)的相關(guān)性及在乙肝診治中的價(jià)值。方法PreS1Ag和乙肝“兩對(duì)半”檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫法,HBV-DNA檢測(cè)采用熒光定量PCR擴(kuò)增技術(shù)。結(jié)果 包括HbeAg陽性的2種組合中,HBV-DNA和PreS1Ag陽性率分別為87.1%、86.0%和100.0%、100.0%,HBV-DNA和PreS1Ag,在不包括HbeAg陽性的3種組合中,HBV-DNA和PreS1Ag陽性率分別為42.3%、45.7%;46.3%、44.8和11.1%、11.1%。HBV-DNA檢測(cè)陽性標(biāo)本中,PreS1Ag的陽性率為87.2%,HbeAg陽性率為75.6%;二者聯(lián)合檢測(cè)陽性率為96.5%,HBV-DNA檢測(cè)陰性標(biāo)本中PreS1Ag和HbeAg的陽性率為7.8%和5.2%,二者聯(lián)合檢測(cè)陽性率為9.5%。 結(jié)論 PreS1Ag檢測(cè)聯(lián)合乙肝“兩對(duì)半”檢測(cè)是乙型肝炎早期診斷和評(píng)價(jià)療效的可靠指標(biāo),可在臨床推廣應(yīng)用。
關(guān)鍵詞 乙肝病毒;乙肝病毒前S1抗原;乙肝病毒基因
[中圖分類號(hào)] R4[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A[文章編號(hào)] 1674-0742(2013)11(c)-0186-02。
乙型肝炎是我國(guó)發(fā)病率最高的傳染性疾病之一,約有超過10%的人口為乙型肝炎患者,病毒攜帶者的比例還要比這個(gè)數(shù)字高出許多,對(duì)乙型肝炎病毒(HBV)復(fù)制情況進(jìn)行正確的判斷,可對(duì)乙型肝炎的治療及療效的評(píng)價(jià)提供依據(jù)[1],在常年的臨床實(shí)踐中,肝病科多以乙肝病毒“兩對(duì)半”的檢測(cè)作為感染HBV的依據(jù),并通過HBV-DNA的檢測(cè)來評(píng)價(jià)療效,然而,目前越來越多的研究證實(shí)HBV前S1抗原(PreS1Ag)更能夠反映病毒的復(fù)制情況,可作為HBV存在和復(fù)制的標(biāo)志及抗病毒治療的療效指標(biāo)[2]。該研究對(duì)2011年1月—2012年12月該院收治的288例乙型肝炎患者的血清進(jìn)行乙肝“兩對(duì)半”、 PreS1Ag和HBV-DNA聯(lián)合檢測(cè),以探討其相關(guān)性。
1 資料與方法
1.1 一般資料
288例乙肝血清標(biāo)本均為該院住院和門診治療的乙肝患者,男性152例,女性136例,年齡21~68歲,中位年齡39歲,所有患者均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn),此標(biāo)準(zhǔn)與2006年在《中國(guó)乙型肝炎防治指南》[3]中公布。
1.2 試劑與方法
乙肝“兩對(duì)半”檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELLSA),其中HBsAg、HBsAb、和HBeAg檢測(cè)采用夾心法;HBeAb和HBcAb檢測(cè)采用競(jìng)爭(zhēng)法,PreS1Ag檢測(cè)采用ELLSA法的雙抗夾心法,操作過程由技術(shù)熟練的檢驗(yàn)科技術(shù)人員嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。結(jié)果檢測(cè)采用酶標(biāo)儀(型號(hào):ELx-800)讀取吸光度(A)值,以陽性或陰性報(bào)告結(jié)果。采用熒光定量PCR進(jìn)行HBV-DNA檢測(cè),擴(kuò)增檢測(cè)結(jié)果DNA拷貝數(shù)>1 000為陽性。
1.3 統(tǒng)計(jì)方法
所有統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)采用采用SPSS19.0軟件分析,組間計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
包括HbeAg陽性的2種組合中,HBV-DNA和PreS1Ag陽性率分別為87.1%、86.0%和100.0%、100.0%,HBV-DNA和PreS1Ag在2組中陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而在不包括HbeAg陽性的3種組合中,HBV-DNA和PreS1Ag陽性率分別為42.3%、45.7%;46.3%、44.8和11.1%、11.1%,見表1。HBV-DNA檢測(cè)陽性標(biāo)本中,PreS1Ag的陽性率為87.2%,HbeAg陽性率為75.6%;HBV-DNA檢測(cè)陰性標(biāo)本中PreS1Ag和HbeAg的陽性率僅為7.8%和5.2%,PreS1Ag的陽性率在HBV-DNA陽性和陰性標(biāo)本中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表2。
3 討論
多年以來HbeAg一直是肝病科醫(yī)生判斷乙肝病毒是否在體內(nèi)復(fù)制并具有傳染性的重要指標(biāo),當(dāng)HbeAg轉(zhuǎn)化為HbeAb意味著乙肝病毒復(fù)制結(jié)束,病情向好的方面轉(zhuǎn)化[4],但在后來的研究中發(fā)現(xiàn),即使HbeAg轉(zhuǎn)為陰性,仍有部分患者能檢測(cè)到乙肝病毒的活躍復(fù)制,因此,有學(xué)者認(rèn)為[5]HbeAg不能作為反映乙肝病毒復(fù)制的唯一指標(biāo),需結(jié)合其他指標(biāo)的檢測(cè)綜合判定。前S1蛋白存在于乙肝病毒的外膜,是乙肝病毒與肝細(xì)胞結(jié)合的位點(diǎn),其在乙肝病毒組裝、分泌并侵襲肝細(xì)胞的過程中發(fā)揮重要作用[6],PreS1Ag作為乙型肝炎新的血清學(xué)指標(biāo),在臨床越來越顯示出其應(yīng)用價(jià)值[7]。
該研究表明,在含有HbeAg陽性的2種組合中,PreS1Ag的檢出率分別為86.0%和100.0%,HBV-DNA的檢出率分別為87.1%和100.0%,而在HBV-DNA陽性的患者中,PreS1Ag陽性率達(dá)到87.2%,說明PreS1Ag和HBV-DNA在反映乙肝病毒復(fù)制方面有很高的一致性,也具有較高的伴隨關(guān)系,高于國(guó)內(nèi)王建軍等[8]等的報(bào)道。PreS1Ag可作為觀察病毒是否復(fù)制的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo),HBV-DNA一直作為反映病毒復(fù)制的金標(biāo)準(zhǔn),但其檢查需要昂貴的設(shè)備,對(duì)化驗(yàn)室技術(shù)人員的要求也非常高,不利于在基層醫(yī)院開展,而PreS1Ag檢測(cè)操作簡(jiǎn)單,價(jià)格低廉,適宜推廣應(yīng)用。另外,HBsAg+HBeAg+HBcAb陽性組合,PreS1Ag和HBV-DNA陽性檢出率分別為87.1%和86.0%,PreS1Ag陽性檢出率稍高于HBV-DNA,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而在HBsAg+HBeAg陽性組合中,兩者陽性檢出率均為100%,提示在對(duì)乙肝患者的日常檢測(cè)中,可以用PreS1Ag代替HBV-DNA作為反應(yīng)病毒是否復(fù)制的標(biāo)志。在HbeAg陰性的3種組合中,HBV-DNA和PreS1Ag陽性率分別為42.3%、45.7%;46.3%、44.8和11.1%、11.1%,說明了即使在HbeAg檢測(cè)陰性的情況下,仍然存在這病毒的復(fù)制,考慮HbeAg陰性檢測(cè)結(jié)果可能與乙肝病毒的PreC區(qū)基因變異出現(xiàn)終止密碼子,阻礙了HbeAg的形成有關(guān)[9]。提示HbeAg雖然是傳統(tǒng)的反應(yīng)病毒復(fù)制的指標(biāo),但不能完全代表病毒的復(fù)制情況,還存在部分乙肝病毒復(fù)制患者HbeAg檢測(cè)陰性。本研究顯示:HBV-DNA陽性的172例標(biāo)本中,PreS1Ag和HBeAg陽性率分別為87.2%和75.6%,但PreS1Ag和HBeAg聯(lián)合檢測(cè)陽性率達(dá)96.5%,說明在HBeAg檢測(cè)陰性的情況下,PreS1Ag依然可以反映乙肝病毒復(fù)制,聯(lián)合應(yīng)用乙肝兩對(duì)半和PreS1Ag檢測(cè)可提高診斷準(zhǔn)確率,減少單純依靠HbeAg檢測(cè)出現(xiàn)的誤診。
綜上所述,PreS1Ag檢測(cè)操作簡(jiǎn)單,價(jià)格低廉,可代替HBV-DNA作為觀察乙肝病毒是否復(fù)制的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo),PreS1Ag聯(lián)合乙肝“兩對(duì)半”檢測(cè)是乙型肝炎早期診斷和評(píng)價(jià)療效的可靠指標(biāo),可在臨床推廣應(yīng)用。
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