洋地黃毒苷的測定—分光光度法

本方法采用分光光度法測定洋地黃毒苷（C₄₁H₆₄O₁₃)的含量。

本方法適用于洋地黃毒苷。

取本品適量，經(jīng)過自裝填料為硅藻土的色譜柱分離后，收集部分經(jīng)純化，加入新制的堿性三硝基苯酚試液，搖勻，在22-25℃的暗處放置30分鐘，照紫外-可見分光光度法，立即在485nm波長處，測定吸光度，計算，即得。

1. 乙醇

2. 堿性三硝基苯酚

3. 三氯甲烷

4. 苯

1. 可見分光光度計

2. 自制色譜柱

取長約200mm，內(nèi)徑約25mm、下端具有活塞的色譜管，底部填少許脫脂棉，取處理過的硅藻土（取色譜用的硅藻土150g，加稀鹽酸1000mL，煮沸10分鐘，放冷，濾過，用水洗滌至洗液遇pH試紙顯中性，在105℃干燥后，再在500℃熾灼2小時，放冷)2g，加水1mL，充分混合，分次裝入色譜管內(nèi)，每次均用平頭玻璃棒輕壓使平；另取處理過的硅藻土3g，加甲酰胺2mL與水1mL，充分混勻，同法裝柱，上覆一小塊脫脂棉，輕壓使平。

供試品溶液的制備

精密稱取本品10mg，置50mL量瓶中，加三氯甲烷10mL溶解后，加苯（同上法處理)稀釋至刻度，搖勻，精密量取10mL，加入色譜注中，以苯（同上法處理)-三氯甲烷（3：1)洗脫，流速為每分鐘不超過4mL，收集洗脫液于250mL量瓶中，至近刻度時，另加三氯甲烷稀釋至刻度，搖勻作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

供試品的測定

精密量取上述洗脫液25mL與對照品溶液5mL，分別置錐形瓶中，在水浴上蒸干，殘渣中各加乙醇0.5mL，蒸干，放冷至室溫精密加入70%乙醇5mL，密塞，在22-25℃放置15分鐘，并時時振搖，在精密加新制的堿性三硝基苯酚試液3mL，搖勻，在22-25℃的暗處放置30分鐘，照紫外-可見分光光度法，在485nm波長處，依法測定吸光度，計算，即得。