牛黃上清片—大黃酚的含量測定—高效液相色譜法

本 方法采用高效液相色譜法測定牛黃上清片中大黃酚的含量。

本方法適用于牛黃上清片中大黃酚的測定。

用反相高效液相色譜法分析大黃酚，在254nm處檢測大黃酚的吸收值，計算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 三氟醋酸(分析純)

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

色譜柱:ODS C18 (250 mm ×4. 6 mm ,5μm)

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 0.1 %三氟乙酸 = 82 18，流速:1.0 mL/min

2.2 檢測波長：254nm

2.3柱溫：室溫

1.供試品溶液的制備

取本品10 片,去包衣,精密稱定,研細,精密稱取約2 片的重量,置圓底燒瓶中,甲醇40ml ,水浴;回流1.5 h ,過濾,濾液置100 ml 容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,取上清液5 ml ,離心5 min ,濾過,濾液作為供試品溶液。

2.對照品溶液的制備

精密稱取大黃素對照品適量,置10 ml 量瓶中,加甲醇至刻度，制成含大黃酚10mg/L的溶液，搖均，即得。

1.標準曲線的繪制

精密稱取大黃素對照品適量,置25 ml 量瓶中,加甲醇至刻度,制成大黃酚標準儲備液，再分別配制成5 種不同濃度的大黃素對照品溶液。依次進樣，每次5μL，測定峰面積，以對照品溶液濃度對峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸,得回歸方程。

2. 供試品的測定

精密吸取上述供試品溶液5μL注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器測定大黃酚的吸收度，計算出其含量。

方國民，任軍. 牛黃上清片質(zhì)量標準的研究. 安徽醫(yī)藥，2003，7（5)：329-330