方法名稱： |
銀翹解毒湯-連翹苷含量測(cè)定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于銀翹解毒湯中連翹苷的含量測(cè)定 |
方法原理： |
本品加開(kāi)水（95 ℃)浸泡提取，經(jīng)液相色譜分離，在277 nm處測(cè)定峰面積，用外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 Agilent 1100 高效液相色譜儀（美國(guó)惠普公司)；UV 檢測(cè)器 色譜條件 色譜柱：C18柱（4.6×200 mm，5 μm)；流動(dòng)相：乙腈-水（25∶75)；流速：1 mL/min；柱溫：室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)：277 nm |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液的制備 取連翹苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含75.0 μg的溶液，即得。 供試品溶液的制備 稱取銀翹解毒湯超微飲片與其傳統(tǒng)飲片各50 g，超微飲片置夾層保溫杯中用開(kāi)水（95 ℃)浸泡二次，第一次用8倍開(kāi)水浸泡20 min，第二次用6倍開(kāi)水浸泡15 min；傳統(tǒng)飲片按湯劑制備方法煎煮二次（加水量與煮沸時(shí)間同超微飲片)，分別過(guò)濾，濾液合并，離心（1000 r/min，3 min)，得樣品K與Y。將樣品K、Y分別定容至500 mL備用。分別吸取樣品液K、Y各35 mL，濃縮至10 mL，加甲醇90 mL超聲15 min，過(guò)濾，濾液以甲醇定容至100 mL，作為供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取連翹苷對(duì)照液以及銀翹解毒湯超微飲片與傳統(tǒng)飲片供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算連翹苷含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
蔡光先，楊永華，陳燕軍等. 銀翹解毒湯超微飲片與傳統(tǒng)飲片的化學(xué)對(duì)比研究. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志.2002，8（6)：5~6 |
