方法名稱： |
清熱靈顆粒-連翹苷含量測定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于清熱靈顆粒中連翹苷的含量測定 |
方法原理： |
本品加甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜分離，在230 nm處測定峰面積，外標(biāo)法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件： |
儀器 SPD - LC10A 型高效液相色譜儀，包括SPD - 10A 紫外可見檢測器（日本島津公司)；Oasis HLB C18 固相萃取小柱（美國Waters 公司，規(guī)格：3 mL 色譜條件 色譜柱：Dikma DiamonsiLTM C18（200 mm ×4.6 mm，5 μm)；流動相：乙腈- 水（30∶70)；流速：1.0 mL/min，檢測波長：230 nm；柱溫：30 ℃ |
試樣制備： |
對照品溶液的制備 準(zhǔn)確稱取以五氧化二磷為干燥劑，減壓干燥至恒重并研細(xì)的連翹苷對照品約10 mg，置于50 mL容量瓶中，加甲醇適量，超聲處理使之溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為0.2 mg/mL的連翹苷對照品溶液。 供試品溶液的制備 取清熱靈顆粒約1.0 g，準(zhǔn)確稱定，加甲醇20 mL，超聲處理20 min，過濾，殘渣以甲醇30 mL分次洗滌，連續(xù)3次，過濾，合并濾液，再置于水浴上蒸干。殘渣再用水溶解，并定量移至25 mL容量瓶中，定容，過濾，混勻，棄去初濾液，取續(xù)濾液備用。準(zhǔn)確量取續(xù)濾液2.5 mL，移入經(jīng)事先活化過的SPE小柱上（依次加甲醇5 mL、水5 mL淋洗)，待液體以約為1滴/s的速度流出后，再依次用水5 mL、20 %甲醇溶液5 mL以1滴/s的流出速度過柱，棄去流出液，最后用50 %甲醇溶液洗脫吸附在柱上的連翹苷，洗脫體積至近5 mL，以50 %甲醇溶液定容（洗脫液收集于5 mL容量瓶中)，以0.45 μm的濾膜過濾，取續(xù)濾液即得。 |
操作步驟： |
分別精密吸取連翹苷對照液以及清熱靈顆粒供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算連翹苷含量。 |
附件： |
點擊下載 (解壓密碼:payment-defi.com) |
備注： |
|
參考文獻： |
況夏，王太. 固相萃取- 高效液相色譜法測定清熱靈顆粒中連翹苷的含量.中國藥房. 2005，16（20)：1574～1575 |
