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一種使用Sepharose4FF凝膠對(duì)細(xì)菌多糖進(jìn)行純化的方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1970779A  
公開(kāi)(公告)日 2007.05.30  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200610048875.4  
申請(qǐng)日期 2006.12.06  
專利名稱 一種使用Sepharose 4FF凝膠對(duì)細(xì)菌多糖進(jìn)行純化的方法  
主分類號(hào) C12P19/04(2006.01)I  
分類號(hào) C12P19/04(2006.01)I;C08B37/00(2006.01)I;C12R1/46(2006.01)N;C12R1/42(2006.01)N;C12R1/21(2006.01)N;C12R1/01(2006.01)N  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 云南沃森生物技術(shù)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 黃 鎮(zhèn);向左云  
地址 650106云南省昆明市高新區(qū)云南省大學(xué)科技園2期A3幢4樓  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 昆明正原專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 劉明哲  
國(guó)省代碼 云南;53  
主權(quán)項(xiàng) 一種使用Sepharose 4FF凝膠對(duì)細(xì)菌多糖進(jìn)行純化的方法,具體步驟是: (1)采用生物反應(yīng)器對(duì)細(xì)菌進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng); (2)于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期殺菌,離心收集上清液; (3)制備粗制多糖; (4)對(duì)粗制多糖進(jìn)行預(yù)處理,用截留分子量10~100kD的超濾膜超濾濃縮至多糖濃度為2~50mg/ml; (5)以2~15%柱體積上樣于Sepharose 4FF凝膠柱,以含0.02~1.0mol/L氯化鈉或氯化鈣的洗脫液洗脫,收集Kd0.5之前的組分; (6)洗脫液加入乙醇至終濃度50-90%沉淀多糖,離心收集多糖沉淀; (7)沉淀分別用無(wú)水乙醇、丙酮各洗滌2次; (8)經(jīng)冷凍干燥,獲得高純度的精制多糖。  
摘要 本發(fā)明一種使用Sepharose 4FF凝膠對(duì)細(xì)菌多糖進(jìn)行純化的方法,屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,其步驟為在對(duì)細(xì)菌多糖進(jìn)行預(yù)處理后,使用Sepharose 4FF凝膠對(duì)細(xì)菌多糖進(jìn)行純化,收集Kd 0.5之前的組分,可獲得純度高,內(nèi)毒素含量低的細(xì)菌多糖。本發(fā)明獲得的純度高、內(nèi)毒素含量低的細(xì)菌多糖適合于制備細(xì)菌多糖疫苗及細(xì)菌多糖結(jié)合疫苗。  
國(guó)際公布  
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