| 公開(公告)號 | CN1306961C |
| 公開(公告)日 | 2007.03.28 |
| 申請(專利)號 | CN200510041858.3 |
| 申請日期 | 2005.03.19 |
| 專利名稱 | 四價輪狀病毒滅活疫苗的制備及應用 |
| 主分類號 | A61K39/15(2006.01)I |
| 分類號 | A61K39/15(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 蘭州生物制品研究所 |
| 發(fā)明(設計)人 | 周 旭 |
| 地址 | 730046甘肅省蘭州市城關區(qū)鹽場路178號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 蘭州中科華西專利代理有限公司 |
| 代理人 | 王學定 |
| 國省代碼 | 甘肅;62 |
| 主權項 | 一種四價輪狀病毒滅活疫苗的制備方法，包括以下工藝步驟： ①細胞的制備：將小牛腎細胞或Vero細胞用胰酶消化分散，加入D-MEM完全培養(yǎng)液在37℃培養(yǎng)至細胞成片，再用無血清D-MEM培養(yǎng)液清洗細胞，用于接種輪狀病毒； ②病毒接種和培養(yǎng)：將G1型、G2型、G3型、G4型輪狀病毒毒種加入10～15ug/ml胰酶，于37℃消化45分鐘，以感染復數(shù)為5～10將G1型、G2型、G3型、G4型輪狀病毒分別接種到步驟①制備的細胞，并在36.5-37.5℃吸附40～60分鐘后吸棄病毒液，再用含1～1.5ug/ml胰酶的無血清D-MEM培養(yǎng)液于33～35℃培養(yǎng)至細胞出現(xiàn)明顯病變時終止； ③病毒收集、濃縮和純化：將上述接種的各病變細胞凍融，高速離心后收集上清液得各病毒原液；通過超濾濃縮上述病毒原液，并以蔗糖密度梯度離心或柱層析純化病毒后即為各單價病毒原液； ④病毒滅活：采用0.05％福爾馬林或1∶4000β-丙內酯滅活上述各單價病毒，除菌過濾后即為單價疫苗原液； ⑤混合上述各單價疫苗原液； ⑥成品的配制：將經混合的單價疫苗原液加入適量的氫氧化鋁，即為成品。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種四價輪狀病毒滅活疫苗的制備方法，該方法將胰酶消化分散的小牛腎細胞或Vero細胞培養(yǎng)成片后以不同的感染復數(shù)分別接種G1、G2、G3、G4型輪狀病毒，用無血清D-MEM培養(yǎng)液至細胞出現(xiàn)明顯病變后收獲病毒液并經濃縮、純化、滅活、混合后加入適量的氫氧化鋁制備而成。本發(fā)明制備的四價輪狀病毒滅活疫苗經動物實驗證明具有良好的免疫原性；經無菌試驗、病毒滴定、滅活試驗、總蛋白含量、硫柳汞含量、氫氧化鋁含量、效力測定、熱穩(wěn)定性試驗、異常毒性檢查、細菌內毒素檢查等檢定完全合格，主要用于預防嬰幼兒輪狀病毒感染性疾病。 |
| 國際公布 |
