| 公開(公告)號 | CN1927884A |
| 公開(公告)日 | 2007.03.14 |
| 申請(專利)號 | CN200510098363.4 |
| 申請日期 | 2005.09.09 |
| 專利名稱 | 防治鴨病毒性肝炎的異源蛋黃抗體的制備方法 |
| 主分類號 | C07K16/10(2006.01)I |
| 分類號 | C07K16/10(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 重慶永健生物技術(shù)有限責任公司 |
| 發(fā)明(設計)人 | 何洪章 |
| 地址 | 402460重慶市榮昌縣學院路158號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 劉繼富;顧晉偉 |
| 國省代碼 | 重慶;85 |
| 主權(quán)項 | 一種雞抗鴨病毒性肝炎蛋黃抗體制備方法，包括下列步驟： (a)將凍干保存的鴨病毒性肝炎病毒以1∶1000稀釋后，稀釋液56℃處理1小時，經(jīng)0.22um微孔濾膜過濾除菌后，接種13-15日齡非免疫鴨胚尿囊腔，37℃孵育，棄去48小時內(nèi)的死亡鴨胚，收集48-96小時內(nèi)的死亡鴨胚，采集尿囊液及羊水； (b)將收獲的尿囊毒液中加入0.1％甲醛溶液，37℃密閉滅活48小時；滅活完成后，按滅活毒液96份，吐溫-80 4份配制，即為制苗用抗原；按油相3份、水相1份的比例取油相、水相攪拌均勻，加入高壓均質(zhì)機中，調(diào)節(jié)壓力為35mpa，乳化制備成鴨病毒性肝炎滅活油乳劑疫苗，并加入1％硫柳汞溶液使之終濃度為萬分之一； (c)以制備的鴨病毒性肝炎滅活油乳劑抗原頸部皮下注射0.5ml/只；2周后，以制備的鴨病毒性肝炎滅活油乳劑抗原頸部皮下注射1.0ml/只，進行強化免疫；間隔2周后用滅活油乳劑抗原再次強化免疫一次，頸部皮下注射2.0ml/只；以后間隔8周進行一次強化免疫，每次頸部皮下注射2.0ml/只； (d)第二次強化免疫后第7天開始，每隔三天抽樣用瓊脂擴散方法測定高免雞蛋蛋黃中抗鴨病毒性肝炎特異抗體效價；蛋黃與生理鹽水按1∶3(V/V)稀釋后，加等體積三氯甲烷萃提，若上清液瓊擴抗體效價達1∶64以上即可集蛋，用于制備鴨病毒性肝炎蛋黃抗體； (e)將蛋殼消毒，打蛋并充分除去蛋清、胚盤和系帶，收集蛋黃；于蛋黃中加入3倍體積的生理鹽水，充分攪拌均勻，然后在蛋黃液中加入與蛋黃等體積的三氯甲烷，充分振蕩混合均勻，室溫作用60分鐘，以3500-4000rpm離心30分鐘，收集上層清液備用； (f)在分離的上清液中加入終濃度為0.05％的甲醛溶液，充分攪拌混勻，37℃保溫密封8-12小時；用0.22μm微孔濾膜過濾除菌，即得瓊擴抗體效價達到1∶32及以上的雞抗鴨病毒性肝炎蛋黃抗體。 |
| 摘要 | 本發(fā)明為一種用于雛鴨病毒性肝炎的預防和治療的蛋黃抗體的制備方法。本發(fā)明改用異源動物雞進行抗鴨病毒性肝炎蛋黃抗體的制備。即用雛鴨鴨病毒性肝炎病毒滅活油乳劑疫苗免疫產(chǎn)蛋雞，從雞蛋蛋黃中提取特異性的免疫球蛋白，用于預防和治療鴨病毒性肝炎疾病。經(jīng)臨床試驗和使用結(jié)果表明：用本方法制備的鴨病毒性肝炎蛋黃抗體用于預防和治療，預防率和治愈率高、藥效期長，藥物效果顯著，且可避免同源抗體垂直傳播疾病的危險。 |
| 國際公布 |
