| 公開(公告)號(hào) | CN1305895C |
| 公開(公告)日 | 2007.03.21 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410002607.X |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.01.13 |
| 專利名稱 | 混合酸酐法合成胸腺五肽的方法 |
| 主分類號(hào) | C07K1/06(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C07K1/06(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 蘭州凱博生物化學(xué)技術(shù)有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 達(dá)朝山;劉大學(xué) |
| 地址 | 730010甘肅省蘭州市高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)創(chuàng)業(yè)服務(wù)中心(張?zhí)K灘575號(hào)) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 甘肅省專利服務(wù)中心 |
| 代理人 | 張克勤 |
| 國(guó)省代碼 | 甘肅;62 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種混合酸酐法合成胸腺五肽的方法，過(guò)程有二肽合成—三肽合成—四肽合成—五肽合成—粗品生成；其特征在于：以N-甲基嗎啉為催化劑，采用氯甲酸乙酯為活化劑，活化被保護(hù)的氨基酸形成高反應(yīng)活性的混合酸酐，與氨基端裸露的氨基酸或肽反應(yīng)來(lái)合成胸腺五肽；各肽合成中均采用N-甲基嗎啉為催化劑，氯甲酸乙酯為活化劑，各肽合成過(guò)程包括混合酸酐的生成—過(guò)濾—減壓濃縮—酸堿洗滌—干燥除水—各肽生成—脫保護(hù)基的過(guò)程，合成五肽后，脫掉保護(hù)基團(tuán)，生成粗品胸腺五肽，再純化；所述被保護(hù)的氨基酸按各肽合成順序是酪氨酸酯與纈氨酸的混合酸酐反應(yīng)得到二肽、天門冬氨酸的混合酸酐與二肽反應(yīng)得到三肽、賴氨酸的混合酸酐與三肽反應(yīng)得到四肽、精氨酸的混合酸酐與四肽反應(yīng)得到五肽粗品，所用氨基酸的2-氨基都采用叔丁氧甲�；�(Boc)保護(hù)，精氨酸的2-氨基由叔丁氧甲�；�(Boc)或芐氧甲�；�(Cbz)保護(hù)，天門冬氨酸的側(cè)鏈羧基采用芐酯保護(hù)，賴氨酸的側(cè)鏈氨基用2-氯芐氧甲�；Ｗo(hù)，精氨酸的側(cè)鏈胍基用硝基保護(hù)，酪氨酸的酚羥基用芐基保護(hù)，羧基用酯基保護(hù)；減壓濃縮—酸堿洗滌—干燥除水過(guò)程為：減壓濃縮干后加入乙酸乙酯，分別用稀鹽酸、碳酸氫鈉和飽和食鹽水洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥；脫保護(hù)基過(guò)程為，加入三氟乙酸脫除叔丁氧甲�；�(Boc)保護(hù)基團(tuán)，減壓濃縮后加入有機(jī)溶劑溶解，有機(jī)溶劑可以是二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯，用冷的氫氧化鈉洗滌有機(jī)溶劑，再用飽和食鹽水洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥后濃縮，再用四氫呋喃或N，N-二甲基甲酰胺溶劑溶解并冷藏備用；所述粗品生成是指合成五肽后，用氟化氫切割—皂化或用催化氫化—三氟乙酸化—皂化脫掉所有保護(hù)基團(tuán)；在粗品生成后的純化過(guò)程為，用制備性高壓液相色譜純化，得到胸腺五肽水溶液，然后冷凍干燥；混合酸酐的生成過(guò)程中的反應(yīng)溫度為-10～-15℃；各肽合成過(guò)程中的反應(yīng)溫度為-15～0℃。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種混合酸酐法液相合成胸腺五肽的方法，它解決了目前胸腺五肽生產(chǎn)中存在的不能大規(guī)模合成胸腺五肽的技術(shù)問(wèn)題。其合成過(guò)程有二肽合成-三肽合成-四肽合成-五肽合成-粗品生成；它是以N-甲基嗎啉為催化劑，采用氯甲酸乙酯為活化劑，活化被保護(hù)的氨基酸形成高反應(yīng)活性的混合酸酐，與氨基端裸露的氨基酸或肽反應(yīng)來(lái)合成胸腺五肽；各肽合成過(guò)程包括混合酸酐的生成-過(guò)濾-減壓濃縮-酸堿洗滌-干燥除水-各肽生成-脫保護(hù)基的過(guò)程，合成五肽后，脫掉保護(hù)基團(tuán)，生成粗品胸腺五肽，再純化；本發(fā)明的合成過(guò)程，避免使用任何昂貴的接肽縮合試劑；最終產(chǎn)物純度高，兼具液相與固相合成法的中間產(chǎn)物最小程度純化和易形成規(guī)模化生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)。 |
| 國(guó)際公布 |
