公開(公告)號
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CN1706937A
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公開(公告)日
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2005.12.14
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申請(專利)號
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CN200410020708.X
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申請日期
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2004.06.09
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專利名稱
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一種海綿細(xì)胞的微載體三維培養(yǎng)方法
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主分類號
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C12N5/06
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分類號
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C12N5/06;C12N11/00
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
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發(fā)明(設(shè)計)人
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張 衛(wèi);趙權(quán)宇;虞星炬;金美芳
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地址
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116023遼寧省大連市中山路457號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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沈陽科苑專利商標(biāo)代理有限公司
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代理人
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許宗富;周秀梅
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國省代碼
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遼寧;21
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主權(quán)項
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一種海綿細(xì)胞的微載體三維培養(yǎng)方法,其特征在于:1)在改進(jìn)人工海水中接種微載體和海綿細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng);改進(jìn)人工海水的水溶液中包括:Na+300~500mM,SO42-5.0~10.0mM,HCO3-0.1~0.5mM,K+5.0~15.0mM,TrisHCl10.0~30.0mM,Cl-300~500mM,Mg2+20~60mM,Ca2+5.0~20mM,SiO32-5~150μM,F(xiàn)e3+30~120μM,Zn2+0.5~4μM,C6H5O73-30~120μM,pH7.6~8.2,PHA的重量濃度為5~2.5%;2)在海綿細(xì)胞培養(yǎng)5~8天后,向上述改進(jìn)人工海水中添加有機(jī)碳源、有機(jī)氮源和維生素C,使它們的濃度分別為5~20μM,形成新的培養(yǎng)液體系;3)在步驟2)之后,每隔2~3天更換培養(yǎng)液體積的50~80%,用改進(jìn)的人工海水替換并添加有機(jī)碳源和氮源使其最終濃度達(dá)到20~50μM,添加維生素C使其最終濃度達(dá)到10~20μM,在此條件下海綿細(xì)胞能進(jìn)行正常生長。
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摘要
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本發(fā)明涉及海洋無脊椎動物細(xì)胞的培養(yǎng),具體地說是一種海綿細(xì)胞的微載體三維培養(yǎng)方法;1)在改進(jìn)人工海水中接種微載體和海綿細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng);改進(jìn)人工海水的水溶液中包括:Na+,SO42-,HCO3-,K+,Tris HCl,Cl-,Mg2+,Ca2+,SiO32-,F(xiàn)e3+,Zn2+,C6H5O73-,pH 7.6~8.2,PHA;2)在海綿細(xì)胞培養(yǎng)5~8天后,向上述改進(jìn)人工海水中添加有機(jī)碳源、有機(jī)氮源和維生素C,形成新的培養(yǎng)液體系;3)在步驟2)之后,每隔2~3天更換培養(yǎng)液,并添加有機(jī)碳源和氮源,維生素C,在此條件下海綿細(xì)胞能進(jìn)行正常生長。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)為:可大規(guī)模生產(chǎn)藥源,可選材料更廣泛,應(yīng)用前景好。
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國際公布
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