公開(公告)號 | CN1657628A |
公開(公告)日 | 2005.08.24 |
申請(專利)號 | CN200410039594.3 |
申請日期 | 2004.02.19 |
專利名稱 | 一種高效篩選目的蛋白的表達載體,其制備方法及用途 |
主分類號 | C12N15/64 |
分類號 | C12N15/64;C12N15/31;C12N15/67;C12N15/62 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所 |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 陳立勇;解志剛;郭寧;沈倍奮 |
地址 | 100850北京市海淀區(qū)太平路27號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | |
代理人 | |
國省代碼 | 北京;11 |
主權(quán)項 | 一種真核表達載體,其特征在于該載體是含有anti-erbB2-scFv-Fc與IL-2基因的融合基因及新霉素抗性基因突變體的雙順反子表達載體。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種高效篩選目的蛋白的表達載體,其制備方法及用途。發(fā)明人通過在含有CMV啟動子和dhfr擴增系統(tǒng)的真核表達載體中引入一個內(nèi)部核糖體進入位點,將anti-erbB2-scFv-Fc基因與IL-2的融合基因與新霉素抗性基因連接。利用PCR方法對Neo基因進行點突變,構(gòu)建成表達載體pCMV-HFI-mNeo。本載體特點在于通過引入IRES使融合蛋白基因和Neo基因在同一個啟動子啟動下共表達;通過對Neo基因的點突變?nèi)趸疦eo基因表達產(chǎn)物活性,從而提高了陽性表達克隆的篩選效率,大大減少了篩選工作量,獲得了目的基因的穩(wěn)定高效表達克隆。 |
國際公布 |