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用于胰島素依賴型糖尿病基因治療中的重組載體及治療性組合物

公開(公告)號 CN1202257C  
公開(公告)日 2005.05.18  
申請(專利)號 CN01104370.9  
申請日期 2001.02.28  
專利名稱 用于胰島素依賴型糖尿病基因治療中的重組載體及治療性組合物  
主分類號 C12N15/85  
分類號 C12N15/85;C12N15/87;A61K48/00;A61P3/10  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2001.1.15 KR 2229/2001  
申請(專利權(quán))人 徐東祥  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 徐東祥  
地址 韓國京畿道  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 永新專利商標(biāo)代理有限公司  
代理人 林曉紅  
國省代碼 韓國;KR  
主權(quán)項(xiàng) 一種制備胰島素表達(dá)載體的方法,其中將胰島素基因和K14啟動(dòng)子基因一起插入pUChsneo,該胰島素基因通過使用以下序列I代表的一對胰島素引物從人基因組DNA中擴(kuò)增,該K14啟動(dòng)子基因通過以下序列II代表的一對K14啟動(dòng)子引物擴(kuò)增:胰島素正向引物:5′CCTGCCTGTCTCCCAGAGCTCTGTCCTTCT3′胰島素反向引物:5′GCAGGGCTGGTTCTAGAGCTTTATTCCATC3′(I)K14啟動(dòng)子正向引物:5′ATTGCTGAAGTTTTGATCTAGACACCTCCA3′K14啟動(dòng)子反向引物:5′CTGAGTGAAGAGAAGGAGCTCGGGTAAATT3′(II)  
摘要 本發(fā)明公開了用于胰島素依賴型糖尿病的基因治療中的重組載體和治療性組合物。以脂質(zhì)體介導(dǎo)方式將具有K14啟動(dòng)子基因的β-半乳糖苷酶表達(dá)載體與果蠅P轉(zhuǎn)座酶表達(dá)輔助載體一起注射進(jìn)皮膚后,測得該酶基因在角質(zhì)形成細(xì)胞層表達(dá)。因具有增強(qiáng)效果和組織特異性,K14啟動(dòng)子用于在角質(zhì)形成細(xì)胞中表達(dá)人胰島素基因,提示了胰島素依賴型糖尿病的新基因治療方法。當(dāng)與P-因子表達(dá)輔助載體組合將具有K14啟動(dòng)子的人胰島素表達(dá)載體注射進(jìn)缺少胰腺β-細(xì)胞的糖尿病小鼠皮膚中時(shí),小鼠血糖水平保持在正常范圍。  
國際公布  
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