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公開(公告)號
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CN1594539A
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公開(公告)日
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2005.03.16
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申請(專利)號
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CN200410041125.5
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申請日期
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2004.06.30
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專利名稱
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降解合成制藥有機(jī)廢水的特效菌株及構(gòu)建方法
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主分類號
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C12N1/00
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分類號
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C12N1/00;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C02F3/34
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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南京大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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程樹培;張徐祥;孫石磊;魏國哲;于洪峰;張力;朱程軍;萬玉秋;李維新;于紅霞;孫成;顧繼東
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地址
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210008江蘇省南京市漢口路22號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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南京蘇高專利事務(wù)所
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代理人
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成立珍
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國省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項(xiàng)
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降解制藥廢水特效菌株，其特征是以親株1白腐真菌(Phanerochaetechrysosporium)，親株2土著細(xì)菌XZ1(Bacillus)，親株3釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)真核細(xì)胞原生質(zhì)體和原核細(xì)胞原生質(zhì)體制備后融合。先制備原生質(zhì)體，并經(jīng)離心后收集、緩沖液清洗后獲得，然后進(jìn)行二次融合。第一次融合：等量的親株1白腐真菌的原生質(zhì)體與親株2土著細(xì)菌XZ1細(xì)胞的原生質(zhì)體混合、并在聚乙二醇、CaCl2、蔗糖配制的誘導(dǎo)液中融合，經(jīng)離心后收集融合產(chǎn)物；第二次融合：上次得到的等量的菌落與親株3釀酒酵母細(xì)胞的原生質(zhì)體混合、在聚乙二醇、CaCl2、蔗糖配制的誘導(dǎo)液中融合，經(jīng)離心后收集融合產(chǎn)物、含蔗糖高滲緩沖液離心清洗后、分別涂布于SIM1鏈霉素Sm培養(yǎng)基、SIM2制霉菌素Nt培養(yǎng)基、SIM3鏈霉素Sm+制霉菌素Nt的雙抗培養(yǎng)基三種固體鑒別培養(yǎng)基上，同時能在三種培養(yǎng)基上長出的菌落為三親跨界融合的保存號為CGMCC.1087的菌落。
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摘要
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降解制藥廢水特效菌株，其構(gòu)建方法是將白腐真菌(Phanerochaetechrysosporium)真核細(xì)胞、土著細(xì)菌XZ1原核細(xì)胞(Bacillus)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)真核細(xì)胞，共三個親株菌的兩界細(xì)胞的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，三親基因在同一個細(xì)胞內(nèi)重組整合，構(gòu)建出基因工程特效菌。本發(fā)明由雙親跨界融合和三親跨界融合兩部分組成。特效菌株含有親株2的基因DNA片段，不同于親株2，也不同于親株1和親株3。特效菌株綜合了三親株優(yōu)勢，利于處理降解制藥廢水。原生質(zhì)體融合不產(chǎn)生新基因，不存在基因污染問題。
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國際公布
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