公開(公告)號
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CN1590560A
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公開(公告)日
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2005.03.09
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申請(專利)號
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CN03152882.1
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申請日期
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2003.09.01
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專利名稱
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一種從復雜組分物質如中藥和化學混合物中高通量篩選、捕獲和分離目標分子的方法
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主分類號
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C12Q1/68
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分類號
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C12Q1/68
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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申請(專利權)人
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王進科;李同祥;陸祖宏
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發(fā)明(設計)人
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王進科;陸祖宏;李同祥
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地址
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210096江蘇省南京市四牌樓2號東南大學吳健雄實驗室
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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代理人
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國省代碼
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江蘇;32
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主權項
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一種從復雜組分物質高通量篩選、捕獲和分離目標分子的新方法,包括:(a)提供雙鏈核酸微陣列芯片,該芯片上排布大量捕獲探針,其中每個探針在芯片上有區(qū)別于其它探針的具體位置,并且每個探針上都有一獨特區(qū)域;(b)將雙鏈核酸微陣列芯片與復雜組分物質接觸;(c)篩選鑒定那些與復雜組分物質發(fā)生相互作用的探針;(d)用所鑒定的發(fā)生相互作用的探針制備親合介質;(e)用鑒定探針制備的親合介質與復雜組分物質接觸;(f)親合介質捕獲和分離復雜組分物質中與鑒定探針發(fā)生相互作用的目標分子。
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摘要
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本發(fā)明提出一種從復雜組分物質如中藥和組合化學分子及其混合物中高通量篩選、捕獲和分離目標分子的新方法。該方法首先針對特定目標的雙鏈核酸結合蛋白特別是序列特異性DNA結合蛋白,如轉錄因子如NF-κB、核受體等,在固相支持物表面制備一種雙鏈核酸微陣列芯片,使其雙鏈核酸探針上嵌合雙鏈核酸結合蛋白的結合位點,用以高通量測定量核酸結合蛋白與雙鏈核酸微陣列芯片上各結合位點的親合性,建立序列核酸結合蛋白與其芯片上各核酸靶點的結合親合性標準參數(shù)體系;再用雙鏈核酸微陣列芯片與復雜組分物質如中藥和組合化學分子及其混合物反應,反應后通過檢測核酸結合蛋白與其芯片上各核酸靶點的結合親合性變化,篩選出那些與標準參數(shù)體系比較結合親合性發(fā)生改變的核酸靶點;將其作為核酸親合介質連接到層析柱表面,制備特異性核酸探針層析柱;再將復雜組分物質如中藥和組合化學分子及其混合物灌柱,用核酸探針捕獲復雜組分物質中與核酸探針特異結合的有效分子;最后經(jīng)洗脫收獲與核酸探針結合的有效分子,進行其化學性質、分子生物學基礎及藥理學研究,開發(fā)成為核酸結合蛋白的核酸靶點特異性候選藥物。該發(fā)明的技術及思想體系,在基礎分子生物學研究,特別是序列特異性DNA結合蛋白(轉錄因子)基因表達調控,以及生物醫(yī)學研究,如序列特異性DNA結合蛋白(轉錄因子)相關疾病藥物作用機理研究和藥物性分子篩選中有廣泛而重要的應用價值。
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國際公布
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