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利用腐質(zhì)霉屬微生物大量生產(chǎn)蛋白南或肽的體系

公開(公告)號(hào) CN1154739C  
公開(公告)日 2004.06.23  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN97198009.8  
申請(qǐng)日期 1997.07.24  
專利名稱 利用腐質(zhì)霉屬微生物大量生產(chǎn)蛋白南或肽的體系  
主分類號(hào) C12N15/74  
分類號(hào) C12N15/74;C12N1/21;C12P21/02;C07K14/37  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1996.7.24 JP 195070/1996  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 明治制果株式會(huì)社  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 守屋達(dá)樹;青柳薰;隅田奈緒美;渡邊學(xué)  
地址 日本東京都  
頒證日 2004.06.23  
國(guó)際申請(qǐng) PCT/JP1997/002560 1997.7.24  
進(jìn)入國(guó)家日期 1999.03.17  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 隗永良  
國(guó)省代碼 日本;JP  
主權(quán)項(xiàng) 表達(dá)載體,包含含有啟動(dòng)子、信號(hào)序列、以及終止子序列的調(diào)控序列,該序列來(lái)自傲慢腐質(zhì)霉(Humicola insolens)的纖維素酶NCE2基因的調(diào)控序列,其中啟動(dòng)子序列是位于質(zhì)粒pEGD01和pMKD01中序列2的第389號(hào)核苷酸的NCE2基因的起始密碼子到Pst I位點(diǎn)區(qū)域的序列,為位于所述起始密碼子上游的1.4kbp區(qū)域的序列或是保持高啟動(dòng)子活性的其變化序列;終止子序列來(lái)自傲慢腐質(zhì)霉纖維素酶NCE1和/或NCE2基因;以及編碼目的蛋白質(zhì)的核苷酸序列,該序列與上述調(diào)控序列可操作地連接。  
摘要 本發(fā)明給出了在屬于腐質(zhì)霉Humicola屬的微生物,尤其是在Humicola insolens中可能大量生產(chǎn)蛋白質(zhì)的表達(dá)體系,特別是給出了宿主-載體體系以及利用該體系制造蛋白質(zhì)的方法。構(gòu)建含有來(lái)自Humicola insolens的纖維素酶NCE1基因或NCE2基因的調(diào)控序列,即啟動(dòng)子、信號(hào)序列、以及終止子的表達(dá)載體,并利用該載體。例如,利用該表達(dá)載體,于Humicola insolens中可以極高效率地生產(chǎn)纖維素酶NCE4,每升培養(yǎng)液可生產(chǎn)4.5g以上的NCE4。  
國(guó)際公布 WO1998/003667 日 1998.1.29  
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