公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1895312A
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公開(kāi)(公告)日
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2007.01.17
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200610016926.5
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申請(qǐng)日期
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2006.06.07
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專利名稱
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一種刺五加的檢測(cè)方法
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主分類號(hào)
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A61K36/254(2006.01)I
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分類號(hào)
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A61K36/254(2006.01)I;G01N27/447(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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由天艷;周曉光
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地址
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130022吉林省長(zhǎng)春市人民大街5625號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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長(zhǎng)春科宇專利代理有限責(zé)任公司
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代理人
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馬守忠
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國(guó)省代碼
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吉林;22
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主權(quán)項(xiàng)
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一種刺五加的檢測(cè)方法,其特征在于將毛細(xì)管電泳電化學(xué)法用于指紋鑒別不同產(chǎn)地的刺五加以及刺五加的不同部位,其步驟和條件如下: (1)緩沖溶液的配制 直接混合NaH2PO4和Na2B4O7的水溶液,并用0.20mol L-1HCl或0.20molL-1NaOH調(diào)節(jié)其pH值為5.0-9.0; (2)草藥刺五加中活性成分標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備及其循環(huán)伏安實(shí)驗(yàn) 草藥刺五加的主要活性成分是異秦皮啶、綠原酸和蘆丁,它們分別用甲醇溶解成濃度為3-8mol L-1的溶液; 活性成分標(biāo)準(zhǔn)品溶液的循環(huán)伏安實(shí)驗(yàn)過(guò)程是: 將33μm碳纖維微盤電極(CFE)在分別含有異秦皮啶、綠原酸和蘆丁的NaH2PO4和Na2B4O7混合溶液中循環(huán)掃描,考察其循環(huán)伏安行為; (3)檢測(cè)條件的優(yōu)化,并在此優(yōu)化條件下進(jìn)行重現(xiàn)性、檢測(cè)限和線性范圍的考察 在0.45-1.35V間變化檢測(cè)電位、5.0×10-3-8.5×10-3mol L-1和5.0×10-3-9.0×10-3mol L-1間變化NaH2PO4和Na2B4O7的濃度、5.0-9.0間變化緩沖溶液pH值、8-35s間變化進(jìn)樣時(shí)間和5-17.5kV間變化分離電壓考察對(duì)峰電流、遷移時(shí)間、分離度和分離效率的影響; (4)草藥樣品溶液的制備 用帶有20-80目篩子的植物粉碎機(jī)粉碎草藥樣品,稱取0.3-0.8g的草藥樣品,用甲醇水浴超聲15-30min,之后傾出上清夜,此萃取過(guò)程再重復(fù)1-3次;最后,萃取液減壓蒸餾近干,用甲醇溶解殘?jiān)⒍ㄈ萦?-8mL的甲醇中,操作前,所有的樣品溶液均用0.22μm的纖維素酯膜過(guò)濾并稀釋到所需要的濃度直接進(jìn)樣分析; (5)刺五加CE-ED指紋圖譜的獲得 刺五加CE-ED指紋圖譜的獲得是在步驟(3)中所獲得的最佳條件下進(jìn)行電泳分析得到的; (6)對(duì)比刺五加標(biāo)準(zhǔn)混合溶液和刺五加實(shí)際樣品中活性成分的峰高確定刺五加實(shí)際樣品中活性成分的含量; (7)對(duì)比所獲得的CE-ED指紋圖譜,分別從幾個(gè)不同的指紋片段鑒別草藥刺五加的不同部位以及不同產(chǎn)地的刺五加莖。
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摘要
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本發(fā)明提供了一種刺五加的檢測(cè)方法,是通過(guò)高效、快速和靈敏的毛細(xì)管電泳電化學(xué)檢測(cè)手段進(jìn)行鑒別分析的方法。此方法結(jié)合了簡(jiǎn)單的甲醇超聲萃取和毛細(xì)管電泳電化學(xué)檢測(cè)分析方法,通過(guò)對(duì)比活性成分的含量及所獲得的毛細(xì)管電泳電化學(xué)指紋圖譜,基于峰數(shù)、峰高及峰高比值鑒別了草藥刺五加的不同部位以及不同產(chǎn)地的刺五加。本法實(shí)現(xiàn)了對(duì)中草藥刺五加內(nèi)在質(zhì)量的綜合評(píng)價(jià)和整體性質(zhì)的全面控制。
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國(guó)際公布
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