| 公開(公告)號(hào) | CN1857351A |
| 公開(公告)日 | 2006.11.08 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200610065445.3 |
| 申請(qǐng)日期 | 2006.03.21 |
| 專利名稱 | 一種抗腫瘤的藥物組合物及其制備方法 |
| 主分類號(hào) | A61K36/258(2006.01)I |
| 分類號(hào) | A61K36/258(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;G01N30/90(2006.01)I;G01N30/02(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 云南天秀植物科技開發(fā)有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 李曉明;仲 行 |
| 地址 | 650217云南省昆明市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)經(jīng)開路3號(hào)科技創(chuàng)新園B26室 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京太兆天元知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 張 韜 |
| 國(guó)省代碼 | 云南;53 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種治療腫瘤的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物是由如下方法制成： 原料藥：三七提取物10-50重量份 冬蟲夏草菌絲體菌粉30-100重量份； 工藝步驟：取5-15目三七粗粉，用40-100％乙醇回流提取1-4次，每次1-3小時(shí)，收集提取液，過濾，濾液回收乙醇，至無乙醇味后，真空濃縮1.5-2小時(shí)，濃縮液加入等體積蒸餾水，攪拌均勻，過濾，濾液過大孔吸附樹脂柱吸附；用2-4倍量樹脂床體積蒸餾水洗去水溶性雜質(zhì)，吸附人參皂苷的樹脂柱備用；將上述吸附樹脂柱用20-50％乙醇洗脫，20-50％乙醇用量為1-5倍量樹脂床體積，主要分離去除原人參三醇組皂苷，根據(jù)需要另行處理；用薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，其中的薄層色譜法是：展開劑為30-100∶10-50∶2-20的氯仿∶甲醇∶水下層；顯色劑：5-20％硫酸乙醇溶液；當(dāng)薄層色譜上出現(xiàn)原人參二醇組皂苷斑點(diǎn)后，停止用20-50％乙醇洗脫，改用30-100％乙醇洗脫，并收集洗脫液；用0.5-2％活性炭加熱回流0.5-2小時(shí)脫色，過濾去除活性炭，濾液過大孔陽、陰離子交換柱，進(jìn)一步脫色脫鹽除雜，并用30-100％乙醇洗脫樹脂吸附的原人參二醇組皂苷，回收乙醇，真空濃縮，真空干燥，粉碎，收集原人參二醇組皂苷約為提取物投料量的3-4％；取上述純化的原人參二醇組皂苷粉溶解于30-70％醋酸、20-50％枸櫞酸、20-50％草酸、20-50％丙二酸、0.5-2％鹽酸或0.5-2％硫酸的水或乙醇溶液中，控制反應(yīng)條件：酸濃度為1％-55％，水解溫度為20℃-100℃，水解時(shí)間為0.5小時(shí)-10小時(shí)，進(jìn)行酸水解，反應(yīng)完成后加入與水解轉(zhuǎn)化液等體積的蒸餾水，用6％氫氧化鈉溶液中和至中性，收集水解產(chǎn)物的沉淀，用10倍量蒸餾水，分2-3次洗沉淀，真空干燥，粉碎，備用，收率為投料原人參二醇組皂苷的30-40％；將水解產(chǎn)物溶解于5-10倍量50-140％乙醇中，以60℃-70℃加熱，回流加快溶解，過濾，濾液用1％活性炭加熱回流0.5-2小時(shí)脫色，過濾去除活性炭，濾液過大孔陽、陰離子交換柱，進(jìn)一步脫色脫鹽除雜，并用30-100％乙醇洗脫樹脂，回收乙醇至總體積的1/4-1，冷卻，放置結(jié)晶，真空抽濾，收集結(jié)晶，真空干燥，粉碎；用高效液相色譜法測(cè)定人參皂苷Rh2和Rg3的含量；人參皂苷Rh2含量為24.84％，人參皂苷Rg3含量為44.44％；收率約為原人參二醇組皂苷投料量的4-5％；將采集的冬蟲夏草帶回實(shí)驗(yàn)室，采用單孢子分離法和組織塊分離法分離；冬蟲夏草菌用PDA培養(yǎng)，10-20℃培養(yǎng)，根據(jù)冬蟲夏草菌的菌落特征，經(jīng)過多次挑取接種后，在培養(yǎng)基上未見其他菌落生長(zhǎng)，說明菌種已經(jīng)純化過程，得到冬蟲夏草真菌；冬蟲夏草真菌按每袋培養(yǎng)基0.3kg接入1g菌種的比例，使其在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，即分離得到冬蟲夏草菌菌種菌落；菌落在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)緩慢，菌落紫褐色，緊實(shí)，背面褐色；菌絲無色，分隔，光滑，分生孢子梗無色，單生或簇生與無色球形細(xì)胞組成的小子座；菌落圓形，邊緣整齊，致密；用接種環(huán)將菌種接入PDA培養(yǎng)基，在火焰上將環(huán)端燒紅滅菌，然后將有可能伸入試管的其余部分，均用火燒過滅菌；將灼燒過的接種環(huán)伸入菌種管，先使環(huán)接觸沒有長(zhǎng)菌的培養(yǎng)基部分，使其冷卻；待環(huán)冷卻后沾取少量菌或袍子，然后將接種環(huán)移出接種管，在火焰旁迅速將沾有菌種的接種環(huán)伸入另一支待接斜面試管；從斜面培養(yǎng)基的底部向上部作“Z”形來回密集劃線；取出接種環(huán)，灼燒試管口，并在火焰旁將棉塞塞上；10-20天后，再把試管培養(yǎng)基上的真菌接入固體或液體發(fā)酵培養(yǎng)基，保持10～15℃培養(yǎng)；固體培養(yǎng)基為大米與水的比例為0.8-1.2∶0.9～1.2，每升培養(yǎng)基中還要加入蛋白胨10-20克，蔗糖180-220克，牛肉膏20-30克，磷酸二氫鉀3-7克，PH5-8；當(dāng)菌絲充滿整個(gè)培養(yǎng)基時(shí)，將菌絲分離、烘干即為菌絲體成品，菌絲體粉碎即冬蟲夏草菌絲體菌。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種抗腫瘤的藥物組合物及其制備方法，該藥物組合物主要由三七提取物和冬蟲夏草菌絲體組成。本發(fā)明另一目的在于提供該藥物組合物制劑的抗腫瘤的用途。 |
| 國(guó)際公布 |
