公開(公告)號
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CN101100665A
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公開(公告)日
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2008.01.09
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申請(專利)號
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CN200610041239.9
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申請日期
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2006.07.28
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專利名稱
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動物通用型重組α干擾素的制備方法
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主分類號
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C12N15/09(2006.01)I
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分類號
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C12N15/09(2006.01)I;C12N15/21(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C07K14/56(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;A61K38/21(2006.01)N;A61K9/19(2006.01)N;A61P31/12(2006.01)N
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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王明麗
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發(fā)明(設(shè)計)人
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王明麗
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地址
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230000安徽省合肥市梅山路安醫(yī)大微生物教研室
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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安徽合肥華信知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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余成俊
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國省代碼
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安徽;34
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主權(quán)項
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動物通用型重組α干擾素的制備方法,依次進行以下步驟: (1)、構(gòu)建克隆載體: 目的基因為: CGGGCTGTGAGGAAATACTTCCACAGACTCACCCTCTATCTGCAAGAGAAGAGCTACAGCCCCTGTGCCTGGG AGATCGTCAGGGCAGAAGTCATGAGATCCTTCTCTTCCTCCAGAAACCTGCAAGACAGACTCAGGAAGAAGGA GAAGGATCAGGCTATCTCTGTGCTCCACGAGATGCTCCAGCAGTGCCTCAACCTCTTCTACACAGAGCACTCG TCTTTGCAGAAGGTTCAGACCATCTCTGTGCTCCACGAGGTGACCCAGCACACCTTCCAGCTCTTCAGCCTGG AGGAATTCTGCACGGGACTTGATTGGCAGCTGACCCGCCTGGAAGCCTGTGTCATGCAGGAGCAGGAGGCGCA GGCCCTCTCTGTGGTCCACGTGATGACCCAGAAGGTCTTCCACCTCTTCTGCCCGGACACGTGCAACCACCTT CGCCCCCAGGATGCCACCTTCTCTCACGACAGCCTCCAGCTCCTCCGGGACATGGCTCCCACACTACCCCAGC TGTGCCCACAGCACAACGCGTCTTGCTCCTTCAACGACACCATCCTGGACACCAGCAACACCCGGCAAGCCGA CAAAACCACCCACGACATCCTTCAGCACCTCTTCAAAATCCTCAGCAGCCCCAGCACTCCAGCCCACTGGAAC GACAGCCAACGCCAAAGCCTCCTCAACCGGATCCACCGCTACACCCAGCACCTCGAGCAATGCTTGGACAGCA GCGACACGCGCTCCCGGACGCGATGGCCTCGCAACCTTCACCTCACCATCA 特異性引物:上游:5’-CGGGCTGTGAGGAAATACT-3’ 下游:5’-TGATGGTGAGGTGAAGGTT-3’ 克隆載體:pMD18-T simple vector (2)、構(gòu)建表達載體: 表達載體:PET-28a (3)、重組蛋白的表達: 挑取載體構(gòu)建成功的重組表達菌進行擴增、放大培養(yǎng),并加入誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)表達; (4)、鑒定重組蛋白; (5)、純化重組蛋白,得到粗制品干擾素。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種動物通用型重組α干擾素的制備方法,系采用基因工程技術(shù),將已知的豬、禽、犬和牛等7種動物α干擾素序列進行比較,人工合成7種α干擾素出現(xiàn)頻率較高的氨基酸分配到各自相應(yīng)的位置,并對個別位置進行了修改和修飾,得到通用型α干擾素的氨基酸序列,與表達載體PET-28a進行連接,并在大腸桿菌中成功表達。經(jīng)培養(yǎng),誘導(dǎo)、復(fù)性、純化、除菌、分裝和凍干等工藝制成動物通用型重組α干擾素凍干粉針劑。本發(fā)明制備工藝簡單,易于工業(yè)化生產(chǎn),經(jīng)凍干后易運送和保藏。產(chǎn)品質(zhì)量可靠。動物通用型重組α干擾素動物機體后,具有療效好、安全可靠和無毒副作用等特點?捎糜谥委熑毿〔《静〖柏i、禽、牛等動物病毒性腹瀉等疾病,是一種廣譜抗病毒制劑。
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國際公布
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