公開(公告)號
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CN101100664A
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公開(公告)日
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2008.01.09
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申請(專利)號
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CN200610041237.X
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申請日期
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2006.07.28
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專利名稱
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重組犬α型干擾素的制備方法
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主分類號
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C12N15/09(2006.01)I
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分類號
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C12N15/09(2006.01)I;C12N15/21(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C07K14/56(2006.01)I;A61K38/21(2006.01)N;A61K9/19(2006.01)N;A61P31/12(2006.01)N
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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王明麗
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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王明麗
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地址
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230000安徽省合肥市梅山路安醫(yī)大微生物教研室
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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安徽合肥華信知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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余成俊
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國省代碼
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安徽;34
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主權(quán)項(xiàng)
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重組犬α型干擾素的制備方法,是依次進(jìn)行以下步驟: (1)、構(gòu)建克隆載體: 目的基因?yàn)椋篴tggccctgc cctgctcctt ctcggtggcc ctggtgctgc tcagctgcca ctccctgtgctgtctggctt gcgacctgcc cgacacccac agcctgcgca actggagggt cctgacgctc ctgggacagatgaggagact ctccgccagc tcttgtgacc actacaccac tgactttgcc ttccccaagg aactgtttgatggccagcgg ctccaggagg cgcaagccct ctctgtggtc cacgtgatga cccagaaggt cttccacctcttctgcacga acatgtcctc tgctccttgg aacatgaccc tcctggggga attgtgctcg gggctctctgagcagctgga tgacctggat gcctgtcccc tgcaggaggc agggctggcc gagacccccc tcatgcatgaagactccacc ctgaggacct acttccaaag gatctccctc tacctgcaag acaggaacca cagcccgtgtgcctgggaga tggtccgagc agaaatcggg agatccttct tctccttgac catcttgcaa gaaagagtaaggaggaggaa atga 特異性引物:上游:AAT TTG CCA CCT GCC CGA CA 下游:GAT CTT TCC TCC TCC TGA TTC TTT C 克隆載體:pMD18-T simple vector (2)、構(gòu)建表達(dá)載體: 表達(dá)載體:PET-28a (3)、重組蛋白的表達(dá): 挑取載體構(gòu)建成功的重組表達(dá)菌進(jìn)行擴(kuò)增、放大培養(yǎng),并加入誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)表達(dá); (4)、鑒定重組蛋白; (5)、純化重組蛋白,得到粗制品干擾素。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種重組犬α型干擾素的制備方法,系將特異性引物PCR擴(kuò)增犬α型干擾素的目的基因,與表達(dá)載體PET-28a進(jìn)行連接,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,使其高效表達(dá)犬α型干擾素,經(jīng)高度純化后除菌、分裝和凍干等工藝制成重組犬α型干擾素凍干粉針劑。本發(fā)明制備工藝簡單,易于工業(yè)化生產(chǎn),經(jīng)凍干后易運(yùn)送和保藏。產(chǎn)品質(zhì)量可靠。重組犬α型注射犬機(jī)體后,具有療效好、安全可靠和無毒副作用等特點(diǎn)?捎糜谥委熑(xì)小病毒病、病毒性腹瀉等疾病,是一種廣譜抗病毒制劑。
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國際公布
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