公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN101139568A
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公開(kāi)(公告)日
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2008.03.12
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN200710035499.X
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申請(qǐng)日期
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2007.08.03
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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抗癌抗菌基因工程活性肽的生產(chǎn)方法
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主分類(lèi)號(hào)
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C12N1/21(2006.01)I
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分類(lèi)號(hào)
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C12N1/21(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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湖南師范大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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夏立秋;鄒先瓊;丁學(xué)知;張友明;孫運(yùn)軍;黃 璠;莫湘濤
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地址
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410081湖南省長(zhǎng)沙市岳麓區(qū)麓山路36號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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長(zhǎng)沙星耀專(zhuān)利事務(wù)所
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代理人
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寧星耀;寧 岡
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國(guó)省代碼
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湖南;43
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主權(quán)項(xiàng)
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一種抗癌抗菌基因工程活性肽的生產(chǎn)方法,其特征在于,包括以下步驟: (1)采用大腸桿菌的偏愛(ài)密碼子將Ap1及Ap2基因密碼子進(jìn)行優(yōu)化; (2)PCR分別合成抗菌肽基因Ap1和Ap2; (3)選用PCR對(duì)表達(dá)載體進(jìn)行改造,構(gòu)建載體pETΔt: (4)將Ap1和Ap2分別克隆進(jìn)pETΔt表達(dá)載體,構(gòu)建抗菌肽Ap1和Ap2的重組質(zhì)粒pETΔt1及pETΔt2; (5)構(gòu)建多順?lè)醋颖磉_(dá)載體pETΔt21,以共表達(dá)抗菌肽Ap1及Ap2; (6)將所述重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)入大腸桿菌DH10B,構(gòu)建抗癌抗菌工程菌,實(shí)現(xiàn)抗菌肽的異源表達(dá); (7)異源表達(dá)抗菌肽Ap1和Ap2的純化。
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摘要
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本發(fā)明公開(kāi)了一種抗癌抗菌基因工程活性肽的生產(chǎn)方法,其包括以下步驟:(1)采用大腸桿菌的偏愛(ài)密碼子將Ap1及Ap2基因密碼子進(jìn)行優(yōu)化;(2)PCR分別合成抗菌肽基因Ap1和Ap2;(3)選用PCR對(duì)表達(dá)載體進(jìn)行改造,構(gòu)建載體pETΔt:(4)將Ap1和Ap2分別克隆進(jìn)pETΔt表達(dá)載體,構(gòu)建抗菌肽Ap1和Ap2的重組質(zhì)粒pETΔt1及pETΔt2;(5)構(gòu)建多順?lè)醋颖磉_(dá)載體pETΔt21,以共表達(dá)抗菌肽Ap1及Ap2;(6)將所述述重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)入大腸桿菌DH10B;(7)異源表達(dá)抗菌肽Ap1和Ap2的純化。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單,生產(chǎn)成本低,所得產(chǎn)品抗癌抑菌活性高。
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國(guó)際公布
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