(一)嗜酸性粒細(xì)胞計數(shù)
嗜酸性粒細(xì)胞參與Ⅰ型變態(tài)反應(yīng),因此嗜酸性粒細(xì)胞增多可作為Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的輔助診斷指標(biāo),而且可作為療效判定的指標(biāo)之一。
嗜酸性粒細(xì)胞計數(shù)可用白細(xì)胞分類計數(shù)法,也可以用直接計數(shù)法,目前多采用后者。該類細(xì)胞的胞漿顆粒中富含堿性氨基酸和堿性蛋白,其等電點(diǎn)為pH11,因此呈嗜酸性,易與陰離子結(jié)合而被染色。常用的染色液含伊紅、石炭酸和福爾馬林,該溶液可溶解紅細(xì)胞和其他白細(xì)胞,增加背景的清晰度,使嗜酸性粒細(xì)胞易于識別。
(二)嗜堿性粒細(xì)胞計數(shù)
嗜堿性粒細(xì)胞亦參與型變態(tài)反應(yīng),其計數(shù)方法主要是直接計數(shù)法。嗜堿性粒細(xì)胞胞漿顆粒中肝素的硫酸根容易與陽離子染料結(jié)合而著色,現(xiàn)在常用的酸性染色液包括0.1%EDTA、阿利新藍(lán)、氯代十六烷基吡啶和氯化鑭等。該染液能使紅細(xì)胞和其他白細(xì)胞溶解,使嗜酸性粒細(xì)胞易于區(qū)別。
外周血嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)大于33/mm3判為增高,大于50/mm3為顯著增高。本試驗可作為Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的篩選試驗,陽性率可達(dá)60%~70%;而且可作為療效考查的輔助指標(biāo)。
(三)嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒試驗
正常嗜堿性粒細(xì)胞內(nèi)含有大量嗜堿性顆粒,很容易被陽離子堿性染料甲苯胺藍(lán)或阿利新藍(lán)分別染成紫紅色或藍(lán)色,極易辨認(rèn)和計數(shù)。當(dāng)加入過敏原或抗IgE抗體后,與細(xì)胞表面的IgE結(jié)合而使細(xì)胞將顆粒脫出,細(xì)胞不再著色;從染色細(xì)胞數(shù)的減少可以判斷脫顆粒的情況。本法可分為玻片法和試管法。玻片法操作稍繁鎖,而且孔間誤差較大;試管法用血細(xì)胞計數(shù)板觀察結(jié)果,既方便又省時,重復(fù)性也較好,適于普及。
本法一RAST和皮膚試驗的符合率都很高,可用于尋找過敏原、研究脫敏治療的機(jī)制及判定脫敏治療的療效。
www.med126.com(四)其他檢測方法
1.致敏T細(xì)胞檢測檢查T細(xì)胞總體反應(yīng)狀態(tài)和對某種抗payment-defi.com/job/原的致敏狀態(tài)對判斷Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)有重要價值,具體檢測方法見第二十一章。
2.淋巴因子的檢測淋巴因子在Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制中起重要作用,所以檢測淋巴因子對變態(tài)反應(yīng)的研究和臨床方面都有一定意義。
3.抗血細(xì)胞抗體的檢測血細(xì)胞抗體是Ⅱ型變態(tài)反應(yīng)的主要介質(zhì),檢測抗血細(xì)胞抗體對Ⅱ型變態(tài)反應(yīng)的診斷有重要的意義,具體方法和臨床分析參見血液學(xué)檢驗教材。
還有許多檢測方法與變態(tài)反應(yīng)相關(guān),例如冷抗體試驗、抗基底膜抗體檢測和血小板有關(guān)檢測等,這些可參見本書自身免疫等有關(guān)章節(jié),本章不予贅述。