藥理學實驗研究中實驗動物的選擇與應用

　�。�六)作用于膽堿受體和腎上腺素受體的藥物實驗

　　膽堿受體有M和N兩種，當M受體興奮時，表現(xiàn)為心率減慢，心收縮力減弱，血壓下降，胃腸道平滑肌收縮，瞳孔縮小，唾液分泌增加，支氣管平滑肌收縮等，已知典型的M受體阻滯藥阿托品等能阻滯上述作用。欲確定一個未知藥是否作用于M膽堿受體，其作用性質是興奮、抑制或阻斷，可選離體豚鼠回腸、兔的瞳孔、兔的唾液腺分泌、大鼠或貓的血壓、離體蛙心和離體兔右心房等實驗，與已知藥匹魯卡品或阿托品對照，即可獲得明確結論。N-膽堿受體分為N₁和N₂兩種。N₁膽堿受體興奮時，植物神經(jīng)節(jié)興奮及腎上腺髓質分泌。在阿托品化貓，凡不具有血管收縮作用而能使血壓升高的藥物，初步可認為其作用部位在N1膽堿受體。N2膽堿受體興奮時骨骼肌收縮，可采用水蛭背肌或蛙腹直肌標本實驗，即能得到結果。醫(yī)學全在.線提供

　　二苯羥乙酸奎寧酯（Quinuclidiny1Benzilate,QNB)是一個M-受體阻滯藥，它能與M-膽堿受體緊密結合，維持時間較長，為研究M-膽堿受體提供了一個有效的工具。節(jié)后擬膽堿藥或節(jié)后抗膽堿藥都能與M-膽堿受體結合，因此均可降低³H-QNB的結合率。常選用豚鼠的回腸作此實驗。此外，還可選用豚鼠的心臟、肺臟、腦及脾臟，這些組織勻漿均具有與³H-QNB結合的M-膽堿受體。但在肝臟、腎臟及隔肌則不存在與³H-QNB結合的M受體。

　　腎上腺素受體有α和β兩種，當α受體興奮時，表現(xiàn)為皮膚、粘膜及內(nèi)臟壓管收縮，胃腸道平滑肌松弛，瞳孔散大，瞬膜收縮，子宮收縮等。已知典型的α受體阻滯藥酚妥拉明和妥拉蘇林等能阻斷上述作用。常選用離體兔主動脈條、離體豚鼠或大鼠輸精管、離體貓脾條、離體大白鼠胃底條、離體兔空腸等作α受體作用實驗。β受體興奮時，表現(xiàn)為心率加快，心收縮力加強，傳導加速，骨骼肌血管和冠狀動脈擴張，胃腸道平滑機松弛，支氣管擴張，糖原和脂肪分解等。由于β受體又分β₁、β₂兩種，對于這兩種亞型受體作用的觀察，一般是以心臟效應作為觀察β₁受體作用，而以氣管、支氣管效應作為觀察β₂受體作用。已知典型的β受體阻滯藥心得安等能阻斷上述作用。常選用離體蛙心、離體原位蛙心排出量、兔心灌注、在位貓（或兔)心實驗、兔（豚鼠)離體心房實驗、離體大白鼠子宮、離體豚鼠氣管片等作β受體作用實驗。

　　未妊娠兔的離體子宮對α受體興奮藥十分敏感，可使之強烈收縮，故可用于鑒定α受體興奮藥或阻滯藥。脂肪組織存在β受體，凡能興奮β受體的藥物均能引起游離脂肪酸的釋放增加。如預先加入β受體阻滯藥，則可使游離脂肪酸的釋放量明顯減少，甚至完全阻斷，故此法亦用來鑒定作用于β受體的藥物。常選用不饑餓的雄性大白鼠，麻醉下取其副睪脂肪墊作實驗。子宮平滑肌收縮為α受體興奮反應，目前常選用兔子宮平滑肌膜與³H-DHE（即³H-Dihydrocryptne,是一個α受體阻滯藥)進行體外培養(yǎng)，³H-DHE與子宮平滑肌膜上α受體結合，25℃不超過17分鐘，即能完全達到結合，而且結合穩(wěn)定性較好，至少可維持39分鐘，常用來鑒定α受體。

　　（七)骨骼肌松弛藥實驗

　　在進行神經(jīng)肌接點阻斷藥試驗研究時，動物品種的選擇是十分重要的，因神經(jīng)肌接點阻斷藥的效應有明顯的動物種屬差異，只有選用在反應性質和程度與人相似的動物進行實驗，所得結果才對臨床用藥有較高的參考價值。

　　不同種動物對同一種神經(jīng)肌接點阻滯藥的反應不同，如貓、狗、兔、大白鼠對十烴季銨和筒箭毒的敏感性各不相同，其間差異見圖10-8、表10-30所示。不同種屬動物對神經(jīng)肌接點阻斷藥反應的差異不僅表現(xiàn)在作用強度上，而且反應在作用性質上，如貓對琥珀酰膽堿、十烴季銨的反應與人近似，呈單純?nèi)�極化型阻斷作用，而在兔、豚鼠、大白鼠常表現(xiàn)為雙相阻斷作用。雞對十烴季鋟特別敏感，大白鼠對筒箭毒敏感，人對十烴季銨與筒箭毒的反應介于貓對狗之間而與貓近似。雖然蛙、兔、小雞、小白鼠等動物在神經(jīng)肌接點阻斷藥的試驗研究上各有應用價值，如蛙可在不用人工呼吸的條件下作用于觀察神經(jīng)肌接點阻斷藥的作用，小雞可用于區(qū)別去極化型阻斷藥與非去極化型阻斷藥，兔垂頭法可用于觀察神經(jīng)肌接點阻斷藥的效應和鑒定其效價，小白鼠用于神經(jīng)肌接點阻斷藥的初篩，但以貓對神經(jīng)肌接點阻斷藥的的反應與人最近似，故貓是必不可少的試驗動物，但也不是一切試驗均需要在貓身上進行。

圖10-3不同種實驗動物對十烴季銨和筒箭毒的敏感性

表10-30　一些神經(jīng)肌接點阻斷藥對人、貓、大白鼠的相對效價*

　　 *每格中上面數(shù)字是以筒箭毒用為1m算出的相對強度。插號中數(shù)字為產(chǎn)生90-95%神經(jīng)肌接點阻斷作用所需劑量。

三、心血管系統(tǒng)藥理實驗中的選擇與應用

　　（一)血壓測量

　　插管直接測壓法：在研究中經(jīng)常應用動物急性血壓試驗來分析藥物等對循環(huán)系統(tǒng)的影響，常用的動物有狗、貓、家兔和大白鼠。猴、羊、豚鼠、小鼠、雞、鳥和蛙的血壓值和急性測壓法雖有報告，但極少用于藥物對血液循環(huán)影響的常規(guī)研究。各種動物的血壓值可參看表10-31。

表10-31　各種動物的血壓值

　　 大白鼠血壓除對個別藥物（如毒扁豆堿)反應異常外，對絕大多數(shù)的升壓和降壓物質的反應都和人或大動物（如狗、貓)是一致的，并且反應十分靈敏，目前它是檢定體液或組織中去甲腎上腺素等升壓物質含量的常用動物之一。大白鼠來源容易解決，較經(jīng)濟、用藥量少、所占工作面小。缺點是動物小，操作較因難，血管較細小，易發(fā)生血液凝固，故須預先注射肝素抗凝。用狗作實驗優(yōu)點很多，如血壓恒定，較大白鼠、家兔等小動物更接近人體，對藥物反應靈敏并與人基本一致；血管和神經(jīng)較粗，管壁彈性強，便于手術操作和適用于分析藥物對循環(huán)系統(tǒng)的作用機制；心搏力量強，能描繪出完好的血壓曲線；用作藥物篩選時，可反復應用。缺點是來源較困難，人體貴，不適用于需要動物數(shù)量較多的實驗。貓用于血壓試驗時除有與狗相同的優(yōu)缺點外，特別值得指出的是更適用于藥物對循環(huán)系統(tǒng)作用機制的分析，因為貓不僅有瞬膜，便于分析藥物對交感神經(jīng)節(jié)和節(jié)后部分的影響，而且易于制備脊髓貓以排除脊髓以上的中樞神經(jīng)系統(tǒng)對血壓的影響。此外，貓體重較狗輕（實驗可用1.8～2.5kg體重的貓)，用藥量較省。家兔來源容易，性情溫和，故亦常用血壓試驗。但并不理想，因為家兔為草食動物，個體間血壓差異大，對藥物反應不及上述各種動物恒定和靈敏，較脆弱，尤其是長毛大耳家兔易死亡，故它不適用于血壓試驗，血管較小和心搏力量較弱，插管內(nèi)易發(fā)生血凝塊。而且約有20～30%的家兔在頸動脈上向甲狀腺分出的一根小動脈，碰到這一情況，宜將此分枝反線結扎剪斷，否則在其上方插入動脈插管后，當檢壓計加壓或開放動脈夾時，較大量的枸櫞酸鈉可經(jīng)過此側技，造成家兔深吸氣和血壓激烈波動，枸櫞酸鈉倒入心臟而死亡。

　　不插管（間接)測壓法：在不插管測壓法中最常用的動物是狗、大白鼠和家兔。大白鼠不插管測壓法，常選用大白鼠尾容積測壓法、鼠尾搏動投影響測壓法和鼠腳測壓法。狗不插管測壓法選用頸動脈皮橋法、脛動脈間接測壓法和股動脈穿刺測壓法。家兔不插管測壓常選用頸動脈皮橋測壓法和兔耳測壓法。

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