免疫細(xì)胞化學(xué)在病理學(xué)中的應(yīng)用最為廣泛,并取得了很大成果。
一、病毒抗原定位
免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)十分適合于病毒和病毒抗原在組織培養(yǎng)和機(jī)體細(xì)胞內(nèi)的生長繁殖定位的觀察。
1.核內(nèi)病毒定位犬肝炎,乙型肝炎核心抗原(HBcAg),shope乳頭狀瘤,腺病毒IV型等病毒定位于細(xì)胞核內(nèi)。
2.先核后漿定位水痘、流感(甲、乙)、雞瘟、假狂犬病、單純皰疹、腺病毒2,3,4,5,7型,多型瘤、勞斯探氏肉瘤病毒,先在核復(fù)制,隨后在胞漿中定位。
3.先漿后核定位痘苗、脊髓灰質(zhì)炎、麻疹等病毒是先在漿中復(fù)制,后進(jìn)入細(xì)胞核。
4.核漿同時(shí)定位犬瘟熱、麻疹和小鼠白血病病毒等。
5.胞漿內(nèi)定位腮腺炎、新城疫、仙臺病毒、流感、口蹄疫、鸚鵡熱、狂犬病、小鼠脫足病、痘苗、墨內(nèi)山谷腦炎、馬腦炎、埃及101病毒、黃熱、乙型腦炎、痘病毒、天花等病毒。
二、病毒感染過程
用免疫細(xì)胞化學(xué)方法可以看到病毒從宿主的細(xì)胞到細(xì)胞,叢一個(gè)部位到另一個(gè)部位的擴(kuò)散過程,如用免疫熒光技術(shù)看到了犬肝炎病毒的血行擴(kuò)散;犬瘟熱病毒的淋巴和血行擴(kuò)散。免疫熒光雙重染色法用以觀察雙重病毒感染,如蜱傳染毒(TBE)和麻疹病毒同時(shí)感染羊胚腎細(xì)胞,看到雙重感染細(xì)胞中病毒抗原和核酸的分布不同于單種病毒感染者。
三、腫瘤與病毒
用免疫細(xì)胞化學(xué)可以觀察腫瘤病毒和細(xì)胞,病毒抗原和腫瘤抗原之間的互相關(guān)系。如在不能查出傳染病毒的腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了病毒抗原;在典型的肉瘤細(xì)胞胞漿中發(fā)現(xiàn)了勞斯(Rous)氏肉瘤病毒;對EB病毒與非洲淋巴瘤、鼻咽癌和白血病等的關(guān)系進(jìn)行了有價(jià)值的研究,并發(fā)現(xiàn)了與Eb 病毒感染有關(guān)的兩類抗原,調(diào)查了某些疾病病人和正常人血清中抗EB病毒抗體的分布情況。王文亮等在原發(fā)性肝癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)和核心抗體。
四、病毒計(jì)數(shù)
五、病毒的快速診斷
免疫細(xì)胞化學(xué)為病毒感染性疾病的快速診斷開創(chuàng)了一個(gè)廣闊的道路(參見表16-2),最先用免疫熒光法作流感病毒快速診斷,證明有較高的特異性。隨后,對流行性乙型腦炎,脊髓灰白質(zhì)炎、呼吸道和肺炎腺病毒、皰疹病毒等進(jìn)行了臨床快速診斷,提高了診治效果。近年,利用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測EB病毒IgA抗體診斷鼻咽癌取得突破性成果,對于早期診治鼻咽癌作出了重大貢獻(xiàn)。在早期診斷流行性出血熱方面,免疫細(xì)胞化學(xué)方法更顯示了其優(yōu)越性,利用感染流行性出血熱病毒的細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)本,可以在發(fā)病的早期查出IgM抗體,作出早期快速診斷。檢測患者血清中的抗體和效價(jià),更有利于病毒感染性疾病的防治,也可直接檢查病變中的病毒。
表16-2 免疫細(xì)胞化學(xué)在病毒學(xué)的應(yīng)用
疾病 | 檢出對象 | 標(biāo)本 | 方法 | 敏感性 | 特異性 | 意義 |
各種立克次體病 | 抗體 | 血清 | IIF | 高 | 高 | 診斷 |
抗原 | 病變組織 | DIF | 中~高 | 高 | 流病 | |
調(diào)查 | ||||||
呼吸道病毒感染 | 抗(IgM,IgG,IgA)病毒(RS,流感甲、乙副流感1,3,4,6b,腺病毒組、麻疹、腮腺炎、風(fēng)疹) | 血清、腦脊液、其它體液、鼻咽部洗液、呼吸道分泌物、病變組織、活檢及尸檢材料、組織培養(yǎng)材料 | IIF | 高 | 高 | 診斷 |
IIF | 中~高 | 中~高 | 同上 | |||
DIF | 診斷 | |||||
病毒性肝炎 | HBsAg | 血清、組織 | DIF | 高 | 高 | 輔診 |
HBV | IIF | |||||
HBcAg | 血清、組織 | IIF | 高 | 高 | 輔診 | |
DIF | ||||||
HAV | HA Ag | 肝活檢 | IIF | 高 | 高 | 研究 |
皰疹病毒感染 | ||||||
單純皰疹 | 抗原 | 皮膚刮屑 | IIF | 高 | 高 | 診斷 |
巨細(xì)胞病毒感染 | 抗體 | 血清 | IIF | 高 | 高 | 診斷 |
ACIF | ||||||
帶狀皰疹 | 抗體 | 血清 | IIF ACIF | 高 | 高 | 輔診 |
EB病毒感染 | 抗體 | 血清 | IIF | 高 | 低 | 輔診 |
狂犬病 | 抗原 | 犬腦 | DIF | 高 | 高 | 受傷人確診 |
抗體 | 血清 | IIF | 中 | 中 | 診斷 | |
蟲媒病毒感染 | 抗體 | 血清 | IIF | 高 | 高 | 診斷和流
|
馬腦炎 | 病調(diào)查 | |||||
登革、黃熱圣路易腦炎 |
抗體 |
血清 |
IIF |
高 |
中 |
同上 |
乙型腦炎 |
抗體 |
血清 |
IIF |
高 |
高 |
診斷 |
無菌性腦炎 |
抗體 |
血清 |
IIF |
高 |
高 |
診斷 |
出血熱、拉賽熱 |
抗體 |
血清 |
IIF |
高 |
高 |
診斷流病 |
AIDS病毒 |
抗體 |
血清 |
IIF |
高 |
高 |
調(diào)查 |
注:ACIF:抗補(bǔ)體免疫熒光法:DIF:直接免疫熒光;IIF:間接免疫熒光(引自:黃策:免疫熒光和熒光免疫,1983)