一)慢性毒性試驗(yàn)期限 一般認(rèn)為工業(yè)毒理學(xué)慢性試驗(yàn)動(dòng)物染毒6個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間；而環(huán)境毒理學(xué)與食品毒理學(xué)則要求實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒1年以上或2年。也有學(xué)者主張動(dòng)物終生接觸外來化合物才能全面反映外來化合物的慢性毒性效應(yīng)，以及求出閾劑量或無作用劑量。 但是，也有學(xué)者認(rèn)為大鼠為進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)動(dòng)物，接觸受試化合物1年以上不一定必要。多次經(jīng)驗(yàn)證明延長(zhǎng)接觸1年以上，大鼠也不再出現(xiàn)新的毒性效應(yīng)(致癌試驗(yàn)除外)。例如有報(bào)道在122種化合物中，大鼠連續(xù)接觸3個(gè)月之后才出現(xiàn)毒性效應(yīng)的只有3種(占2.46%)，其它化合物均在3個(gè)月內(nèi)已出現(xiàn)毒性效應(yīng)。因此認(rèn)為以大鼠為試驗(yàn)對(duì)象時(shí)連續(xù)接觸外來化合物90天，即可確定受試化合物的長(zhǎng)期無作用水平。但是，這種觀點(diǎn)還存有爭(zhēng)論。因此在食品及環(huán)境毒理學(xué)中進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)，接觸外來化合物的時(shí)間仍以2年為好。 （二)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)環(huán)境 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 慢性毒性試驗(yàn)選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的條件與亞慢性毒性試驗(yàn)相同。但實(shí)驗(yàn)動(dòng)物最好為純系甚至同窩動(dòng)物均勻分布于各劑量組。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡應(yīng)較小，大鼠和小鼠應(yīng)為初斷奶者，即小鼠出生后3周，體重10~12g；大鼠出生后3~4周，體重50~70g。性別要雌雄各半。 2、動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境 慢性毒性試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)條件和飼養(yǎng)環(huán)境與亞慢性毒性試驗(yàn)相同。 （三)接觸途徑 慢性毒性試驗(yàn)多為經(jīng)口與經(jīng)呼吸道接觸。經(jīng)呼吸道接觸，每日接觸時(shí)間，依試驗(yàn)要求而定。工業(yè)毒物的試驗(yàn)通常每日吸入4～6小時(shí)。環(huán)境污染物一般要求每日吸入8小時(shí)或更長(zhǎng)。 （四)劑量的選擇與分組 為制定外來化合物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)而進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)時(shí)，一般設(shè)3個(gè)染毒劑量組和1個(gè)對(duì)照組，必要時(shí)另設(shè)一個(gè)溶劑對(duì)照組，即無作用劑量組、閾劑量組、發(fā)生比較輕微毒性效應(yīng)的劑量組(此為最高劑量組)。以求出明確的劑量－反應(yīng)關(guān)系。 染毒組劑量的選擇可參考三組數(shù)據(jù)。一是以亞慢性閾劑量為出發(fā)點(diǎn)，即以亞慢性閾劑量或其1/5 ~1/2劑量為慢性毒性試驗(yàn)的最高劑量，以這一閾劑量的1/50~1/10為慢性毒性試驗(yàn)的預(yù)計(jì)閾劑量組，并以其1/100為預(yù)計(jì)的慢性無作用劑量組；一是以急性毒性的LD50劑量為出發(fā)點(diǎn)，即以LD50 的1/10劑量為慢性試驗(yàn)的最高劑量。以LD50 的1/100為預(yù)計(jì)慢性閾劑量，以LD50 的1/1000為預(yù)計(jì)的無作用劑量組。各染毒劑量組之間的劑量間距應(yīng)當(dāng)大些，有利于求出劑量-反應(yīng)關(guān)系，也有助于排除實(shí)驗(yàn)動(dòng)物個(gè)體敏感性差異。組間劑量差一般以5~10倍為宜，最低不小于兩倍。 （五)觀察指標(biāo) 觀察指標(biāo)的選擇，應(yīng)以亞慢性毒性試驗(yàn)的觀察指標(biāo)為基礎(chǔ)。其中包括體重、食物攝取、臨床癥狀、行為、血象和血液化學(xué)、尿的性狀及生化成分以及重點(diǎn)觀察在亞慢性毒性試驗(yàn)中已經(jīng)顯現(xiàn)的陽性指標(biāo)。一些觀察指標(biāo)變化甚微，為此應(yīng)注意三點(diǎn)：一是試驗(yàn)前應(yīng)對(duì)一些預(yù)計(jì)觀察指標(biāo)，尤其是血、尿常規(guī)及重點(diǎn)測(cè)定的生化指標(biāo)進(jìn)行正常值測(cè)定，廢棄個(gè)體差異過大的動(dòng)物；二是在接觸外來化合物期間進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察的各項(xiàng)指標(biāo)，應(yīng)與對(duì)照組同步測(cè)定；三是各化驗(yàn)測(cè)定方法應(yīng)精確、可靠、且進(jìn)行質(zhì)量控制。 應(yīng)重視病理組織學(xué)的檢查。凡試驗(yàn)期間死亡的動(dòng)物，都應(yīng)做病理組織學(xué)檢查。 | 
