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2 結(jié)果
2.1 行為學(xué)表現(xiàn)：生理鹽水對照組大鼠活動(dòng)正常,無癲癇樣發(fā)作行為表現(xiàn)。槐定堿致癇組大鼠腹腔注射槐定堿后,大鼠由活動(dòng)狀態(tài)逐漸變得安靜,隨后出現(xiàn)呆滯,部分動(dòng)物出現(xiàn)呼吸急促，經(jīng)(8.46±1.62)min的潛伏期后,大鼠逐漸出現(xiàn)癲癇樣發(fā)作表現(xiàn)。開始出現(xiàn)須動(dòng)、點(diǎn)頭、咀嚼樣動(dòng)作，尾巴翹起,濕狗樣抖動(dòng), 伴流涎,呈陣發(fā)性,至0.5h左右開始有面肌抽動(dòng)、雙前肢抬起陣攣或單肢抽搐,隨后出現(xiàn)姿勢失衡，跌倒，陣攣抽搐，繼之發(fā)生全身強(qiáng)直，大鼠口吐白沫，嘴唇、四肢皮膚發(fā)紺，甚至尿失禁，持續(xù)(36.84±5.69)min，反復(fù)發(fā)作,抽搐緩解后，大鼠可自由活動(dòng)，2h 后大部分動(dòng)物停止發(fā)作，點(diǎn)燃率達(dá)100%(10/10)，達(dá)到Ⅳ級以上發(fā)作的成功率為80%(8/10)，2只死亡，死亡率為20%。經(jīng)苯巴比妥鈉干預(yù)后，槐定堿致癇大鼠主要為0級和Ⅰ級癇性發(fā)作表現(xiàn)，癲癇樣發(fā)作潛伏期延長至(35.83±6.65) min(P<0.05)，如表1、2所見。表1 槐定堿對大鼠癇樣發(fā)作潛伏期表2 槐定堿對大鼠癲癇發(fā)作程度的影響醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站payment-defi.com
2.2 電鏡觀察
2.2.1 生理鹽水對照組：大鼠海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)神經(jīng)細(xì)胞核膜、核仁結(jié)構(gòu)清晰，胞核內(nèi)染色質(zhì)分布均勻，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器豐富，可見完整的線粒體、高爾基體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng);突觸結(jié)構(gòu)正常，突觸間隙清楚;毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞核呈長橢圓形，核膜結(jié)構(gòu)清晰，染色質(zhì)均勻，見圖1-2(目錄后)。
2.2.2 槐定堿致癇組：槐定堿致癇后大鼠海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)神經(jīng)細(xì)胞核嚴(yán)重固縮,核膜內(nèi)陷，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,有大量的突觸，突觸間隙模糊，可見毛細(xì)血管數(shù)量多，部分毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞核固縮，毛細(xì)血管壁增厚，見圖3-4(目錄后)。
2.2.3 苯巴比妥鈉+槐定堿組：大鼠海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)神經(jīng)細(xì)胞核膜雙層結(jié)構(gòu)較清楚。大多數(shù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常，少部分細(xì)胞有灶性細(xì)胞核固縮，見圖5(目錄后)。
3 討論
3.1 槐定堿致癇大鼠模型的建立:SRI是從豆科槐屬植物苦豆子中分離提純出來的一種生物堿，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明,SRI能夠顯著拮抗戊巴比妥鈉引起的催眠作用,具有明顯的中樞興奮作用[3]。在本實(shí)驗(yàn)中，我們觀察了槐定堿引起大鼠癲癇發(fā)作的行為表現(xiàn)及癲癇發(fā)作的潛伏期、發(fā)作程度、發(fā)作持續(xù)時(shí)間。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：槐定堿組大鼠經(jīng)(8.46±1.62)min的潛伏期后出現(xiàn)癲癇樣發(fā)作，可出現(xiàn)凝視、濕狗樣抖動(dòng)、陣發(fā)性頭面部肌肉抽搐,如眨眼、咀嚼、流涎,類似人類癲癇的自動(dòng)癥,繼之前肢陣攣、后肢站立,并出現(xiàn)全面強(qiáng)直陣攣發(fā)作,最終出現(xiàn)癲癇持續(xù)狀態(tài)。從發(fā)作表現(xiàn)來講,類似于人類的復(fù)雜部分性發(fā)作,之后繼發(fā)為全面性發(fā)作，即發(fā)作由I、II、III級(Racine分級,部分性發(fā)作)向IV、V級(Racine分級,全身性發(fā)作)發(fā)展,其中 I級和II級之間會(huì)有交叉，III級和IV級之間也有交叉。點(diǎn)燃率達(dá)100%，死亡率為20%。經(jīng)傳統(tǒng)的抗癲癇藥苯巴比妥鈉干預(yù)后，槐定堿致癇大鼠僅表現(xiàn)為0級和Ⅰ級癇性發(fā)作，且發(fā)作潛伏期延長。提示槐定堿致癲癇模型是一簡便、穩(wěn)定、與人類癲癇相似的急性癲癇模型，此模型在行為學(xué)上具有以下優(yōu)點(diǎn):① 制作簡便、成本低、致癇潛伏期短,致癇率高，死亡率低。② 致癇過程清晰,癇性發(fā)作的分級容易確認(rèn)，并在解除癇性發(fā)作后狀態(tài)良好。
