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胎膜具有一定內(nèi)分泌和保持羊水內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的功能，在整個(gè)妊娠期為胎兒保護(hù)和選擇的屏障。胎膜分為羊膜和絨毛膜，其中絨毛膜包括中間層、絨毛中胚層和滋養(yǎng)層。而羊膜與滋養(yǎng)層間充斥著細(xì)胞外基質(zhì)(extra cellular matrix, ECM)。ECM是維持胎膜緊張度的重要成分，是抵抗胎兒運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的壓力、胎盤生長(zhǎng)及羊水量增加等必不可少的結(jié)構(gòu)。目前，研究理論認(rèn)為[2]，若ECM降解加速，會(huì)使胎膜結(jié)構(gòu)紊亂，胎膜抗張力、強(qiáng)度的能力下降，最終導(dǎo)致胎膜早破。
E26轉(zhuǎn)錄因子1(E26 transformation specific1, Ets1)是轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子家族最基本的成員之一，它是編碼導(dǎo)致ECM降解和重塑的蛋白酶等許多基因所必需的轉(zhuǎn)錄因子[3]。本研究旨在探討Ets1與PROM的關(guān)系。
1 材料與方法
1.1 一般資料
選取西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科2007年1月至2007年7月住院自然分娩及剖宮產(chǎn)分娩的胎膜早破(PROM)患者75例[其中足月胎膜早破(TPROM)40例，未足月胎膜早破(PPROM)35例]，年齡(27.1±3.4)歲，孕次1.33±0.66;足月無(wú)產(chǎn)兆擇期剖宮產(chǎn)患者70例(其手術(shù)指征分別為：臀位8例;頭盆不稱28例;巨大兒7例;高齡初產(chǎn)5例;社會(huì)因素22例)，年齡(27.5±4.1)歲，孕次1.47±0.75，作為對(duì)照組。兩組均為初產(chǎn)婦，單胎，無(wú)內(nèi)外科合并癥及病理性產(chǎn)科并發(fā)癥，近期無(wú)外傷和性交等明顯誘因，兩組患者年齡及孕次均符合正態(tài)分布，且二者比較差異無(wú)顯著性(P>0.05)。兩組患者于產(chǎn)后或術(shù)后取破口處全層胎膜組織1.0cm×1.5cm，生理鹽水清洗至透明，立即置入含40g/L多聚甲醛的0.1mol/L PBS(pH 7.4)溶液中固定，并將標(biāo)本置于該固定液中4℃下2h。梯度酒精脫水，二甲苯透明，常規(guī)石蠟包埋。
1.2 主要試劑
Ets1鼠抗人多克隆抗體(克隆號(hào)SC350)為SantaCruz公司產(chǎn)品，工作濃度為1∶25。SP免疫組化試劑盒及DAB顯色試劑盒均購(gòu)自北京中杉生物技術(shù)有限公司。
1.3 方法
采用免疫組化中敏感性高的親和組織化學(xué)技術(shù)：酶標(biāo)鏈親和素生物素技術(shù)(SP)法。以PBS代替第一抗體作為陰性對(duì)照，以胎膜各層部分細(xì)胞胞漿和(或)胞核出現(xiàn)棕色顆粒狀物質(zhì)視為陽(yáng)性染色。
1.4 結(jié)果判定
Ets1蛋白主要著色于細(xì)胞核和(或)胞漿。以染色強(qiáng)度與陽(yáng)性染色細(xì)胞百分率的乘積作為半定量標(biāo)準(zhǔn)。高倍鏡下每張切片選擇10個(gè)有代表性的視野，每個(gè)視野記數(shù)100個(gè)細(xì)胞。①染色強(qiáng)度計(jì)分：0分為無(wú)色，1分為淡黃色，2分為棕黃色，3分為黃褐色;②按陽(yáng)性染色細(xì)胞百分率計(jì)分。0分為陰性，1分為陽(yáng)性細(xì)胞0%～25%，2分為25%～50%，3分為51%～75%，4分為>75%。兩項(xiàng)得分相乘結(jié)果為其結(jié)果。按積分高低分為：“-”積分為0分;“+/-”積分1～2分;“+”：積分3～4分;“”：積分4～5分;“”：積分≥6分。“+”，“”，“”判定為陽(yáng)性，“-”，“+/-”，判定為陰性醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站payment-defi.com。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，顯著性檢驗(yàn)采用單因素方差分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
