2.4 大蒜素對(duì)細(xì)胞周期影響流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,10 μg/ml大蒜素作用12 h,Hela細(xì)胞凋亡率為16.73%;作用24 h細(xì)胞凋亡率為24.03%。細(xì)胞周期均發(fā)生了明顯的變化,主要表現(xiàn)為G0/G1期細(xì)胞減少,G2/M期細(xì)胞增加,而S期細(xì)胞無(wú)明顯變化。
2.5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)Bcl2和Bax表達(dá)結(jié)果顯示,10 μg/ml大蒜素作用12和24 h,可降低癌基因蛋白Bcl2表達(dá)(P<0.01),而促進(jìn)Bax表達(dá) (P<0.01)。見(jiàn)表2。表2 10 μg/ml大蒜素誘導(dǎo)后不同時(shí)間Hela細(xì)胞Bcl2和Bax表達(dá)
3 討論
本研究采用的大蒜素主要含三硫二丙烯,選擇人宮頸癌Hela細(xì)胞進(jìn)行抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的研究,并初步探討了其作用機(jī)制。
細(xì)胞周期在腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)調(diào)控中具有重要作用,通過(guò)改變細(xì)胞周期來(lái)阻止腫瘤細(xì)胞的增殖已受到人們關(guān)注[6-8]。本研究發(fā)現(xiàn),大蒜素作用后G1期Hela細(xì)胞明顯減少,G2/M期相對(duì)增多。其原因是大蒜素抑制G2/M期,使多數(shù)細(xì)胞不能通過(guò)M期向G1期的轉(zhuǎn)變,導(dǎo)致G1期細(xì)胞減少,使大量細(xì)胞停滯在M期,無(wú)法完成正常的有絲分裂,提示大蒜素對(duì)Hela細(xì)胞有周期特異性抑制作用;大蒜素對(duì)Hela細(xì)胞M期有阻滯作用,對(duì)臨床應(yīng)用大蒜素防治宮頸癌,尤其與周期特異性化療藥物輔助應(yīng)用治療宮頸癌具有重要的理論意義。Bcl2家族在細(xì)胞凋亡中起著重要的作用,其家族成員包括抑制凋亡蛋白Bcl2、Bclxl等,促凋亡蛋白Bax、Bbad等。Bcl2和Bax分別可以同源二聚體形式存在,二者之間可以形成異源二聚體。Bax的表達(dá)增多時(shí),BaxBax的同源二聚體便誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;而B(niǎo)cl2的表達(dá)增多時(shí),Bax和Bcl2形成更為穩(wěn)定的異源二聚體來(lái)抑制細(xì)胞凋亡。Bcl2/Bax的比率可以調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的速率[9]。本實(shí)驗(yàn)證明經(jīng)大蒜素處理的Hela細(xì)胞,Bax表達(dá)升高而B(niǎo)cl2水平明顯降低。提示大蒜素可通過(guò)降低Bcl2/Bax的比率誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡。
【參考文獻(xiàn)】
1 Xiao D,Lew KL,Kim YA,et al.Diallyl trisulfide suppresses growth of PC3 human prostate cancer xenograft in vivo in association with Bax and Bak induction.Clin Cancer Res,2006,12:68366843.
2 Li N,Guo R,Li W,et al.A proteomic investigation into a human gastric cancer cell line BGC823 treated with diallyl trisulfide.Carcinogenesis,2006,27:12221231.
3 Zhou Z,Tau HL,Xu BX,et al.Microarray analysis of altered gene expression in diallyl trisulfidetreated HepG2 cells.Pharmacol Rep,2005,57:818823醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站payment-defi.com.
4 王惠蘭,張賀玲,袁芳,等.大蒜素單獨(dú)及與順鉑聯(lián)合對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的影響.實(shí)用婦產(chǎn)科,2004,11:349310.
5 王惠蘭,劉影,張曉茗,等.大蒜素與順鉑單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)宮頸癌裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的影響.中華婦產(chǎn)科雜志,2006,41:566567.
6 Nagata S.Apoptosis by death factor.Cell,1997,88:355365.
7 Cohen GM.Caspases:the executioners of apoptosis.Biochem J,1997,326:116.
8 Alhasan SA,Ensley JF,Sarkar FH.Genistein elicits pleiotropic molecular effects on head and neck cancer cells.Clin Cancer Res,2001,7:41744181.
9 Ina K,Itoh J,F(xiàn)ukushima K,et al.Resistance of Crohn’s desease Tcells to multiple apoptotic signals is associated with a bcl2/Bax mucosal imbalance.J Immunol,1999,163:10811090.
醫(yī)學(xué)論文范文:大蒜素對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞增殖影響及其作用機(jī)制