三磷酸腺苷二鈉原料藥—總核苷酸的測(cè)定—分光光度法

本方法采用分光光度法測(cè)定三磷酸腺苷二鈉原料藥中總核苷酸的含量。

本方法適用于三磷酸腺苷二鈉原料藥。

供試品加0.1mol/L磷酸緩沖液制成供試液，置紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，于259nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，計(jì)算出其含量。

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)

1.磷酸緩沖液（0.1mol/L)

取取磷酸氫二鈉35.8g，加水至1000mL，無(wú)水磷酸二氫鉀13.6g，加水至1000mL，二液互

調(diào)pH值至7.0。

2. 供試品溶液的制備

精密稱(chēng)取供試品適量，加0.1mol/L磷酸緩沖液使溶解并制成每1mL中含20µg的溶液，即得供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至稱(chēng)取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

取供試品溶液照紫外分光光度法，于波長(zhǎng)259nm處測(cè)定吸收度，按C₁₀H₁₄N₅Na₂O₁₃P₃的吸收系數(shù)（E^1%_1cm)為279計(jì)算，即得。

注：分光光度法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對(duì)照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測(cè)定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計(jì)算含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部，p.24。