銀杏葉片－萜類內(nèi)酯的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定銀杏葉片中萜類內(nèi)酯的含量。

本方法適用于中成藥銀杏葉片。

本品粉末加甲醇超聲處理，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過，取續(xù)濾液回收甲醇，殘?jiān)�加水溶解，用乙酸乙酯提取�?shù)次，回收乙酸乙酯提取液，殘?jiān)�加甲醇溶解、定容，搖勻，溶液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用蒸發(fā)光散射檢測器，計(jì)算含量。

1. 甲醇

2. 正丙醇

3. 四氫呋喃

1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按白果內(nèi)酯峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：正丙醇 四氫呋喃 水＝1 15 84

2.2柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約相當(dāng)于萜類內(nèi)酯19.2mg的粉末，精密稱定，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

分別精密稱取白果內(nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品和銀杏內(nèi)酯C對照品適量，加甲醇制成每1mL各含1mg、1mg、1mg、0.5mg的混合溶液。或取已標(biāo)示白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C含量的銀杏葉對照提取物0.15g，精密稱定，加水10mL，照供試品溶液的制備方法，自‘置水浴中溫?zé)崾谷苌ⅰ�起，同法制成對照提取物溶液�?o:p>

3. 供試品溶液的制備

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約相當(dāng)于萜類內(nèi)酯19.2mg的粉末，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率33kHz)20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20 mL，回收甲醇，殘?jiān)�加�?0 mL，置水浴中溫?zé)崾谷苌�，�?%鹽酸溶液2滴，用乙酸乙酯振搖提取4次（15 mL，10 mL，10 mL，10 mL)合并提取液，用5%醋酸鈉溶液20 mL洗滌，分取醋酸鈉液，用乙酸乙酯10 mL洗滌，合并乙酸乙酯提取液及洗液，用水洗滌2次，每次20 mL，合并水液，用乙酸乙酯10 mL洗滌，合并乙酸乙酯液，回收至干，殘?jiān)�用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液（或?qū)φ仗崛∥锶芤?5mL、20mL和供試品溶液20mL，注入高效液相色譜儀，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程分別計(jì)算白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p597。