公開(公告)號 | CN1490332A |
公開(公告)日 | 2004.04.21 |
申請(專利)號 | CN03141675.6 |
申請日期 | 2003.07.17 |
專利名稱 | 重組人IA-2抗原的制備方法 |
主分類號 | C07K14/435 |
分類號 | C07K14/435;C12N15/12;C12P19/34;C12P21/00 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 上海市內分泌代謝病研究所 |
發(fā)明(設計)人 | 羅敏 |
地址 | 200025上海市瑞金二路197號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 上海東方易知識產權事務所 |
代理人 | 許瑞德 |
國省代碼 | 上海;31 |
主權項 | 重組人IA-2抗原的制備方法,包括步驟1:IA-2表達型重組質粒的構建;步驟2:IA-2重組蛋白的誘導表達;步驟3:IA-2重組蛋白的分離、親和層析和透析純化;其特征在于:所述的步驟1是從胎腦中克隆人IA-2胞內結構域(包括氨基酸606~979)的編碼基因;以嵌套式PCR擴增該編碼基因,實現(xiàn)Pinpoint Xa-IA-2表達型重組質粒的構建;所述的步驟2是將含重組質粒的JM109菌經(jīng)IPTG誘導培養(yǎng),得到IA-2重組蛋白;所述的步驟3是將IA-2重組蛋白經(jīng)分離、親和層析和透析純化,獲得生物素;疘A-2融合蛋白。 |
摘要 | 重組人IA-2抗原的制備方法,包括從胎腦中克隆人IA-2胞內結構域(包括氨基酸606~979)的編碼基因;以嵌套式PCR擴增該編碼基因,實現(xiàn)PinpointXa-IA-2表達型重組質粒的構建;將含重組質粒的JM109菌經(jīng)IPTG誘導培養(yǎng),得到IA-2重組蛋白;IA-2重組蛋白經(jīng)分離、親和層析和透析純化,獲得生物素;疘A-2融合蛋白,可以直接作為抗原,用于IA-2抗體的鏈親和素固相酶免檢測技術。 |
國際公布 |