公開(公告)號
|
CN1487086A
|
公開(公告)日
|
2004.04.07
|
申請(專利)號
|
CN03137202.3
|
申請日期
|
2003.05.26
|
專利名稱
|
表達(dá)人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子的酵母重組株及rhGM-CSF的純化方法
|
主分類號
|
C12N15/63
|
分類號
|
C12N15/63;C12N15/81;C12N1/19;C12N15/12;C12N15/27;C12P21/02;C07K14/535;C07K1/36;//(C12N1/19,C12R1∶84)
|
分案原申請?zhí)? |
|
優(yōu)先權(quán)
|
|
申請(專利權(quán))人
|
海南國棟藥物研究所
|
發(fā)明(設(shè)計)人
|
梁國棟;周鵬;夏中寧;蒲廣西
|
地址
|
571101海南省?诔俏魅世锲氯A南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué)海口校區(qū)教學(xué)綜合樓7層
|
頒證日
|
|
國際申請
|
|
進(jìn)入國家日期
|
|
專利代理機構(gòu)
|
|
代理人
|
|
國省代碼
|
海南;66
|
主權(quán)項
|
一種表達(dá)重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子的分泌型表達(dá)載體,其特征在于,該載體含有:重組的rhGM-CSF序列,其被插入pGAPZα-A之GAP啟動子/α-factor信號肽下游位點,刪除Kex2(Lys-Arg)位點之后的Ste13位點(Glu-Ala-Glu-Ala)和啟始密碼子ATG,構(gòu)建成rhGM-CSF分泌型表達(dá)載體。
|
摘要
|
本發(fā)明公開了一種重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的分泌型表達(dá)載體和一種簡易純化方法,用該分泌型表達(dá)載體轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞,以及用上述表達(dá)載體的畢赤氏酵母重組工程菌株發(fā)酵表達(dá)rhGM-CSF的方法。本發(fā)明采用酵母分泌表達(dá)系統(tǒng)取代大腸桿菌包涵體表達(dá)系統(tǒng),目標(biāo)蛋白rhGM-CSF不需要復(fù)性,其生物比活性可達(dá)到3.4×107單位/毫克蛋白,低毒副作用;因此,本發(fā)明的方法制得的rhGM-CSF不僅產(chǎn)率高,而且純化工藝簡便、成本低、產(chǎn)品毒副作用低。
|
國際公布
|
|