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重組體BMP-2的生產(chǎn)

公開(公告)號 CN1484651A  
公開(公告)日 2004.03.24  
申請(專利)號 CN01821777.X  
申請日期 2001.11.27  
專利名稱 重組體BMP-2的生產(chǎn)  
主分類號 C07K14/51  
分類號 C07K14/51;C12N15/67;A61K38/18  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2000.11.29 DE 10059336.4  
申請(專利權(quán))人 斯?fàn)柕鞍踪|(zhì)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計)人 R·魯?shù)婪?E·施沃茨;G·赫爾  
地址 德國哈雷  
頒證日  
國際申請 PCT/EP01/13840 2001.11.27  
進入國家日期 2003.07.04  
專利代理機構(gòu) 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 吳亦華  
國省代碼 德國;DE  
主權(quán)項 重組地制備TGF-β超家族的生物活性蛋白質(zhì)的方法,其特征在于,(a)一種蛋白質(zhì),其末端由一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的前序列或部分所述前序列組成,該氨末端與此種或另一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的成熟區(qū)域連接,該蛋白質(zhì)與成熟BMP-2至少有35%同源性,在至少部分蛋白質(zhì)能以包含體的形式而獲得的條件下將所述蛋白質(zhì)于原核生物中進行表達;(b)分離包含體并在變性條件下溶解;(c)將從包含體中溶解的、變性的、單體的和無生物活性的蛋白質(zhì)復(fù)性,使之通過折疊和二聚體化能夠形成可溶的、有生物活性的構(gòu);和(d)如果必要,在復(fù)性之后經(jīng)蛋白質(zhì)水解將成熟蛋白質(zhì)從其前體形式中釋放出來。  
摘要 為了重組生產(chǎn)一種TGF-β超家族的生物活性蛋白質(zhì),將蛋白質(zhì)在原核生物中表達。該被表達蛋白質(zhì)的氨末端由一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的前序列或其部分組成,將該蛋白質(zhì)或另一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的成熟區(qū)域連接到該蛋白質(zhì)上,所連接上的蛋白質(zhì)具有和成熟BMP-2至少35%的同源性。蛋白質(zhì)的表達在至少有一部分蛋白質(zhì)以包含體的形式而獲得。分離出包含體,并在變性條件下溶解。從包含體中溶解的、變性的、單體的和無生物活性的蛋白質(zhì)經(jīng)過折疊和二聚體化變性形成可溶的、有生物活性的構(gòu)象,必要時,在復(fù)性之后將成熟蛋白質(zhì)從其前體形式中經(jīng)蛋白水解而釋放出來。  
國際公布 WO02/44203 德 2002.6.6  
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