公開(公告)號
|
CN1484651A
|
公開(公告)日
|
2004.03.24
|
申請(專利)號
|
CN01821777.X
|
申請日期
|
2001.11.27
|
專利名稱
|
重組體BMP-2的生產(chǎn)
|
主分類號
|
C07K14/51
|
分類號
|
C07K14/51;C12N15/67;A61K38/18
|
分案原申請?zhí)? |
|
優(yōu)先權(quán)
|
2000.11.29 DE 10059336.4
|
申請(專利權(quán))人
|
斯?fàn)柕鞍踪|(zhì)有限公司
|
發(fā)明(設(shè)計)人
|
R·魯?shù)婪?E·施沃茨;G·赫爾
|
地址
|
德國哈雷
|
頒證日
|
|
國際申請
|
PCT/EP01/13840 2001.11.27
|
進入國家日期
|
2003.07.04
|
專利代理機構(gòu)
|
中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標(biāo)事務(wù)所
|
代理人
|
吳亦華
|
國省代碼
|
德國;DE
|
主權(quán)項
|
重組地制備TGF-β超家族的生物活性蛋白質(zhì)的方法,其特征在于,(a)一種蛋白質(zhì),其氨末端由一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的前序列或部分所述前序列組成,該氨末端與此種或另一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的成熟區(qū)域連接,該蛋白質(zhì)與成熟BMP-2至少有35%同源性,在至少部分蛋白質(zhì)能以包含體的形式而獲得的條件下將所述蛋白質(zhì)于原核生物中進行表達;(b)分離包含體并在變性條件下溶解;(c)將從包含體中溶解的、變性的、單體的和無生物活性的蛋白質(zhì)復(fù)性,使之通過折疊和二聚體化能夠形成可溶的、有生物活性的構(gòu)象;和(d)如果必要,在復(fù)性之后經(jīng)蛋白質(zhì)水解將成熟蛋白質(zhì)從其前體形式中釋放出來。
|
摘要
|
為了重組生產(chǎn)一種TGF-β超家族的生物活性蛋白質(zhì),將蛋白質(zhì)在原核生物中表達。該被表達蛋白質(zhì)的氨末端由一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的前序列或其部分組成,將該蛋白質(zhì)或另一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的成熟區(qū)域連接到該蛋白質(zhì)上,所連接上的蛋白質(zhì)具有和成熟BMP-2至少35%的同源性。蛋白質(zhì)的表達在至少有一部分蛋白質(zhì)以包含體的形式而獲得。分離出包含體,并在變性條件下溶解。從包含體中溶解的、變性的、單體的和無生物活性的蛋白質(zhì)經(jīng)過折疊和二聚體化變性形成可溶的、有生物活性的構(gòu)象,必要時,在復(fù)性之后將成熟蛋白質(zhì)從其前體形式中經(jīng)蛋白水解而釋放出來。
|
國際公布
|
WO02/44203 德 2002.6.6
|