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動物生化學(xué)重要技術(shù)(離心技術(shù))

來源:本站原創(chuàng) 更新:2011-11-24 執(zhí)業(yè)獸醫(yī)考試論壇



二 離心機(jī)的性能及用途
離心機(jī)可按轉(zhuǎn)速的大小(機(jī)頭的額定最高轉(zhuǎn)速)分為低速離心機(jī)、高速離心機(jī)、和超速離心機(jī)三種類型。根據(jù)用途不同可分為分析型離心機(jī)和制備型離心機(jī)。
(一)低速離心機(jī)
低速離心機(jī)的最大額定轉(zhuǎn)速一般為4000r/min,且連續(xù)可調(diào),相對離心力最大可達(dá)5000g~6000g。根據(jù)處理樣品的容量大小,低速離心機(jī)可分為錐型臺式低速離心機(jī)和方型臺式電動離心機(jī)。此類離心機(jī)體積小,重量輕,容量較大,能自動控制工作時(shí)間,操作簡單,使用方便。適用于醫(yī)院化驗(yàn)室、生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行定性分析:血漿、血清、尿素、疫苗制造等。另外還有水平型桶式低速離心機(jī)、大容量立式低速離心機(jī)。也有部分廠家生產(chǎn)了帶冷凍系統(tǒng)的大容量低速離心機(jī)。這類離心機(jī)往往用于樣品的初級分離制備,并和高速及超速離心機(jī)配合使用而成為最后制備高純度樣品的主要研究和生產(chǎn)手段。對于生物制品的生產(chǎn),大容量冷凍離心機(jī)可直接用于分離最后產(chǎn)品。醫(yī),學(xué),全,在,線,提,供payment-defi.com由于這類離心設(shè)備有大容量的水平及角度轉(zhuǎn)頭,裝有強(qiáng)大的可調(diào)控的制冷系統(tǒng),使它對于生物樣品如病毒、核酸、蛋白、激素及血液組分的分離特別有效和必不可少。大容量冷凍離心機(jī)還可直接用于瓶裝、袋裝樣品的離心,為實(shí)驗(yàn)室大量樣品的分離提供了條件。
(二)高速離心機(jī)
高速離心機(jī)的最大額定轉(zhuǎn)速為20000r/min左右,最大相對離心力可達(dá)45000g,由
于運(yùn)轉(zhuǎn)速度高,一般配備冷凍控溫裝置。高速離心機(jī)適用于各種生物細(xì)胞、病毒、血清蛋白等有機(jī)物、無機(jī)物溶液、懸浮液及膠體溶液等樣品的分離、濃縮、提取等制備工作,是細(xì)胞和分子水平研究的基本工具。高速離心機(jī)主要由驅(qū)動和速度控制系統(tǒng)、冷凍系統(tǒng)、真空系統(tǒng)、操作系統(tǒng)組成。
高速離心機(jī)的速度控制系統(tǒng)和溫度控制系統(tǒng)都優(yōu)于低速離心機(jī)。如某些全自動高速冷凍離心機(jī)的速度控制系統(tǒng)采用IC電路,結(jié)構(gòu)簡單,性能穩(wěn)定,且在IC速度自動控制電路內(nèi),專門設(shè)有超速保護(hù)電路,安全可靠;而溫度控制系統(tǒng)則用SCR元件,通過兩個(gè)熱敏元件,檢測離心室溫度及環(huán)境溫度,對離心室溫度進(jìn)行自動控制。
高速離心機(jī)轉(zhuǎn)頭種類很多,常有角度轉(zhuǎn)頭、甩平轉(zhuǎn)頭、水平插入式轉(zhuǎn)頭、連續(xù)離心轉(zhuǎn)頭、間歇轉(zhuǎn)頭等種類。由于高速離心機(jī)轉(zhuǎn)速較高,離心力較大,對離心轉(zhuǎn)頭的強(qiáng)度要求也較高,多采用超硬鋁、鍛鋁或不銹鋼加工制成,且要經(jīng)過滿載超速爆炸試驗(yàn),安全系數(shù)很高。高速離心機(jī)的離心管通常以塑料及聚丙烯、聚乙烯、聚碳酸酯或硼硅酸玻璃、硼硅酸塑料等制成。實(shí)際工作中可按照不同的要求選擇使用各種離心管。
小容量臺式高速離心機(jī),機(jī)型輕小,操作方便,樣品量小,離心力大,自動平衡,速度可調(diào),性能穩(wěn)定,安全可靠?煞旁谝话銓(shí)驗(yàn)臺、冷庫、低溫冰箱中使用,適用于實(shí)驗(yàn)室小量樣品液沉淀濃縮,是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中使用的基本設(shè)備。
(三)超速離心機(jī)
超速離心機(jī)可分為分析用超速離心機(jī)和制備用超速離心機(jī)兩種。制備用超速離心機(jī)最高額定轉(zhuǎn)速在55 000~83 000r/min之間,最大相對離心力在6×105g左右。利用超速離心轉(zhuǎn)頭高速旋轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的巨大離心力可對細(xì)胞器、病毒、生物大分子進(jìn)行分離、濃縮、精制,并可用于測定蛋白質(zhì)、核酸的相對分子質(zhì)量等。超速離心機(jī)的運(yùn)轉(zhuǎn)速度高,產(chǎn)生的離心力場極強(qiáng),對離心機(jī)的材料及各項(xiàng)質(zhì)量要求極高。先進(jìn)的制備用超速離心機(jī),裝有先進(jìn)的光學(xué)系統(tǒng)附屬設(shè)備,密度梯度形成收集器,用于區(qū)帶操作的各種加樣、聚樣器,密度梯度泵,積分儀等。儀器的自動化程度高,功能齊全。
分析用超速離心機(jī)一般都裝備有特殊設(shè)計(jì)的轉(zhuǎn)頭、控制系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng),可以直接觀察了解和分析樣品的沉降情況。利用特殊配備的數(shù)據(jù)處理機(jī)自動計(jì)算S(沉降系數(shù))、Mr(相對分子質(zhì)量)。分析用超速離心機(jī)主要用于生物大分子的相對分子質(zhì)量測定,估價(jià)樣品純度和檢測生物大分子構(gòu)象的變化等。


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