課程名稱

臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)學(xué)

授課題目（章節(jié)或主題)

血液分析儀原理及應(yīng)用

授課教師

吳曉蔓

所屬二級(jí)學(xué)院

檢驗(yàn)系

所屬教研室

臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)

職稱

教授

授課時(shí)間

2008年4月1 日第6周 星期二 第 1～2節(jié)第1 次課

授課時(shí)數(shù)

8學(xué)時(shí)

授課班級(jí)

  檢驗(yàn) 專業(yè)（本科√  �？啤�)2005   級(jí)   1，2，3   班

教學(xué)課型

理論課√ 實(shí)驗(yàn)課□ 習(xí)題課□ 討論課□ 實(shí)習(xí)（踐)課□  其它□

教材名稱、作者、出版社及出版時(shí)間

臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ) 熊立凡主編 人民衛(wèi)生出版社 2007第四版

教學(xué)目標(biāo)與要求：

掌握

1．試述血液分析儀檢測(cè)白細(xì)胞的原理，列舉白細(xì)胞檢測(cè)參數(shù)

2．VCS檢測(cè)血細(xì)胞的特點(diǎn)。

3．血液分析儀檢測(cè)白細(xì)胞分類、網(wǎng)織紅細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、網(wǎng)織血小板有哪些特殊細(xì)胞染色法

4． 簡(jiǎn)述三分群血液分析儀細(xì)胞檢測(cè)的主要原理。

熟悉

1．DHSS檢測(cè)血細(xì)胞有何特點(diǎn)？

2．射頻電導(dǎo)法可檢測(cè)細(xì)胞的哪些特征？

3．簡(jiǎn)述流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞的主要原理。

4．血液分析儀應(yīng)用分光光度法何種原理、檢測(cè)何種物質(zhì)？

5．MAPSS檢測(cè)血細(xì)胞具有何特點(diǎn)？

6．血液分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)分別應(yīng)用哪些原理？

了解

1.流式細(xì)胞術(shù)Mie光散射理論。

2.簡(jiǎn)述激光散射法系統(tǒng)的基本組成。

3.血液分析儀應(yīng)用哪兩大類溶血?jiǎng)�檢測(cè)血紅蛋白？各有何特點(diǎn)？

4.試列舉血液分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞的原理及檢測(cè)參數(shù)。

5.血液分析儀檢測(cè)血小板的原理及檢測(cè)參數(shù)

主要知識(shí)點(diǎn)、重點(diǎn)與難點(diǎn)：

主要知識(shí)點(diǎn)：

1．血液分析儀檢測(cè)白細(xì)胞的原理，列舉白細(xì)胞檢測(cè)參數(shù)

2．VCS檢測(cè)血細(xì)胞的特點(diǎn)。

3．血液分析儀檢測(cè)白細(xì)胞分類、網(wǎng)織紅細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、網(wǎng)織血小板有哪些特殊細(xì)胞染色法

4．簡(jiǎn)述三分群血液分析儀細(xì)胞檢測(cè)的主要原理。

重點(diǎn)與難點(diǎn)：

血液分析儀檢測(cè)白細(xì)胞的原理

血液分析儀檢測(cè)白細(xì)胞分類、網(wǎng)織紅細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、網(wǎng)織血小板有哪些特殊細(xì)胞染色法

簡(jiǎn)述三分群血液分析儀細(xì)胞檢測(cè)的主要原理。

教學(xué)方法（請(qǐng)打√選擇)：

講授法√　 討論法√ 　演示法□　 自學(xué)輔導(dǎo)法□　 　練習(xí)法(習(xí)題或操作) □　讀書指導(dǎo)法□

ＰＢＬ（以問題為中心的教學(xué)法)□　　案例法□　 其他□

教學(xué)媒體（請(qǐng)打√選擇)：

教材√  板書√  實(shí)物□  標(biāo)本□  掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□   錄像√   CAI（計(jì)算機(jī)輔助教學(xué))□

教學(xué)過程設(shè)計(jì)（包括講授內(nèi)容、講授方法、時(shí)間分配、媒體選用、設(shè)計(jì)等)：

第二節(jié) 檢測(cè)參數(shù)和結(jié)果顯示

一、檢測(cè)參數(shù)

血液分析儀檢測(cè)參數(shù)的類別包括：臨床報(bào)告參數(shù)、異常報(bào)警或研究參數(shù)、儀器內(nèi)部監(jiān)測(cè)參數(shù)3類。

任何血液分析儀總體目標(biāo)有2個(gè)：一是篩檢和直接報(bào)告正常檢驗(yàn)結(jié)果標(biāo)本，二是在出現(xiàn)異常檢驗(yàn)結(jié)果時(shí)，直接向檢驗(yàn)人員報(bào)警。

報(bào)警是指所檢測(cè)的標(biāo)本不能滿足儀器軟件系統(tǒng)的定義或不能滿足實(shí)驗(yàn)室（用戶)建立的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。

 二、結(jié)果顯示

血液分析儀檢測(cè)標(biāo)本后，結(jié)果顯示通常有3類形式：數(shù)據(jù)、圖形（直方圖和散點(diǎn)圖)和報(bào)警（圖形、符號(hào)或文字)。

（一)數(shù)據(jù)

   （二)圖形

1．直方圖 

（1)白細(xì)胞直方圖：出現(xiàn)異常直方圖時(shí)，常伴隨相應(yīng)部位的警報(bào)信號(hào)，異常直方圖出現(xiàn)曲線形態(tài)改變的通常含義如下：

1)淋巴細(xì)胞峰左側(cè)區(qū)域異常

2)淋巴細(xì)胞峰與單個(gè)核細(xì)胞峰之間區(qū)域異常

3)單個(gè)核細(xì)胞區(qū)與中性粒細(xì)胞峰之間區(qū)域異常

4)中性粒細(xì)胞峰右側(cè)區(qū)域異常：可能中性粒細(xì)胞絕對(duì)增多

5)出現(xiàn)多部位警報(bào)：表示同時(shí)存在2種或2種以上的異常

（2)紅細(xì)胞直方圖   多種異常紅細(xì)胞直方圖

（3)血小板直方圖

2．散點(diǎn)圖  不同型號(hào)血液分析儀由于應(yīng)用光散射原理有較大不同，因此，即使是正常紅細(xì)胞、白細(xì)胞或血小板的散點(diǎn)圖表達(dá)形式也有明顯區(qū)別。

（三)報(bào)警

1．報(bào)警概念 

（1)報(bào)警來源。

（2)報(bào)警有效性。

（3)報(bào)警形式：主要有圖形、符號(hào)或文字3種。

（4)報(bào)警內(nèi)容。各類血液分析儀常見報(bào)警內(nèi)容見表3-6。

2．標(biāo)本因素。

第三節(jié)  血液分析儀檢測(cè)結(jié)果顯微鏡涂片復(fù)檢規(guī)則

   2002年，國(guó)際著名血液檢驗(yàn)專家Berend Houwen發(fā)起研究關(guān)于血液分析儀全血細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則。2005年，國(guó)際血液學(xué)組織提出了顯微鏡復(fù)檢的41條建議性標(biāo)準(zhǔn)，得到中國(guó)血液檢驗(yàn)學(xué)界的密切關(guān)注。表3-7、表 3-8、表3-9、表3-10是復(fù)檢規(guī)則的細(xì)節(jié)。

第四節(jié)  質(zhì)量保證、儀器校準(zhǔn)和性能評(píng)價(jià)

一、質(zhì)量保證

（一)分析前質(zhì)量保證是血液分析儀質(zhì)量保證的前提條件 

需要抓好以下環(huán)節(jié)：

1．有合格檢驗(yàn)人員 

2．有合適的檢測(cè)環(huán)境 

3．有合格的血液分析儀 

4．有合格的配套試劑 

5．有合格的檢測(cè)標(biāo)本 

（二)分析中質(zhì)量保證是血液分析儀質(zhì)量保證的必要條件 

1．儀器啟動(dòng) 

2．室內(nèi)質(zhì)控 

3．標(biāo)本檢測(cè) 

4．儀器清潔 

（三)分析后質(zhì)量保證是血液分析儀質(zhì)量保證的充分條件 

1．實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果分析 

（1)分析有密切關(guān)聯(lián)的檢測(cè)參數(shù)之間的關(guān)系：

（2)確定需要顯微鏡血涂片復(fù)核的標(biāo)本：

2．結(jié)合臨床情況作相關(guān)分析 

3．定期征求臨床對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià) 

4．記錄和報(bào)告難以解釋的檢測(cè)結(jié)果 

二、儀器校準(zhǔn)

美國(guó)NCCLS于1999年發(fā)布H38-P“血液自動(dòng)分析儀的校準(zhǔn)和質(zhì)量控制建議標(biāo)準(zhǔn)”文件，規(guī)定了血液分析儀的校準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)，其要點(diǎn)如下：

（一)建立儀器檢測(cè)參數(shù)基線 

1．選擇用于檢測(cè)不精密度的標(biāo)本

2．檢測(cè)不精密度 

3．評(píng)估基線不精密度 

4．校準(zhǔn)品特征 

5．記錄校準(zhǔn)結(jié)果 

6．定值可信限 

7．驗(yàn)證特殊檢測(cè)項(xiàng)目 

（二)室內(nèi)質(zhì)控目的和方法 

1．用穩(wěn)定血制品進(jìn)行質(zhì)控 

（1)質(zhì)控品使用頻率：

（2)重復(fù)檢測(cè)質(zhì)控品：

（3)質(zhì)控方法學(xué)：

（4)結(jié)果解釋：

2．用患者全血檢測(cè)結(jié)果質(zhì)控

（1)配對(duì)比較：

（2)加權(quán)浮動(dòng)均值法（X_B)：

（3)監(jiān)測(cè)參考范圍：

（4)監(jiān)測(cè)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：

 3．室間質(zhì)量評(píng)估  是評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)檢測(cè)準(zhǔn)確性的獨(dú)立方法。

三、性能評(píng)價(jià)

（一)血液分析儀總體評(píng)價(jià) 

（二)血液分析儀性能評(píng)價(jià) 

1．稀釋效應(yīng)（effect of dilution)

2．精密度（precision

3．?dāng)y帶污染率（carryover) 

4．可比性（comparability) 

表3-15   解決血液分析儀法與常規(guī)方法檢測(cè)結(jié)果之間差異的參考方法

5．準(zhǔn)確度（accuracy)

6．標(biāo)本老化（sample ageing) 

7．儀器對(duì)異常標(biāo)本和干擾物的靈敏度 

（三)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)性能評(píng)價(jià) 

1992年，NCCLS發(fā)布NCCLS-H20“白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)（百分率)參考方法和儀器方法評(píng)價(jià)”文件，建議用已知不精密度和偏倚的白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)參考方法評(píng)價(jià)血液分析儀的白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)性能（靈敏度和特異性)。評(píng)價(jià)血液分析儀的方法與常規(guī)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)方法相比，更接近于最佳條件。

第五節(jié)  方法學(xué)評(píng)價(jià)

三分群血液分析儀，僅依據(jù)細(xì)胞體積的大小，將血細(xì)胞分為紅細(xì)胞、血小板和白細(xì)胞，將白細(xì)胞分成三群，這種分類準(zhǔn)確性不夠。由于價(jià)廉，目前三分群血液分析儀還用于經(jīng)濟(jì)條件較差的地區(qū)

提倡采用五分類血液分析儀。聯(lián)合應(yīng)用光學(xué)和電學(xué)多種原理、結(jié)合多項(xiàng)化學(xué)染色等技術(shù)的血液分析儀，將檢測(cè)血細(xì)胞的體積、細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)顆粒綜合分析后作出細(xì)胞分類，這種檢測(cè)分類法，準(zhǔn)確性比電阻抗法大大提高。

最高檔的血液分析儀仍不能全部滿足檢出有臨床病理意義的異常細(xì)胞的需要；各類血液分析儀尚不具備人腦識(shí)別紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板等各種細(xì)胞形態(tài)的全面判斷綜合能力。

血液分析儀還只能主要用作健康篩檢，尚不能完全代替人工用顯微鏡對(duì)各類血細(xì)胞（特別是骨髓細(xì)胞、異常細(xì)胞等)的識(shí)別和分類檢查，為了血液分析儀檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性和臨床診斷價(jià)值，面對(duì)異常檢測(cè)結(jié)果，還需進(jìn)一步用顯微鏡復(fù)檢進(jìn)行驗(yàn)證。

提問、課堂討論等師生互動(dòng)的設(shè)計(jì)：

1.簡(jiǎn)述三分群血液分析儀細(xì)胞檢測(cè)的主要原理？

2．血液分析儀檢測(cè)白細(xì)胞應(yīng)用哪些原理？試列舉盡可能多的檢測(cè)參數(shù)？

3．血液分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞應(yīng)用哪些原理？試列舉盡可能多的檢測(cè)參數(shù)？

4．血液分析儀檢測(cè)血小板應(yīng)用哪些原理？試列舉盡可能多的檢測(cè)參數(shù)？

5．什么是VCS？檢測(cè)血細(xì)胞各具有何特點(diǎn)？

6．什么是MAPSS？檢測(cè)血細(xì)胞具有何特點(diǎn)？

7．什么是DHSS？檢測(cè)血細(xì)胞具有何特點(diǎn)？

教學(xué)小www.med126.com結(jié)、復(fù)習(xí)思考及作業(yè)題布置：

1. 高級(jí)職稱考試網(wǎng)血液分析儀有哪幾類結(jié)果顯示形式？

2．簡(jiǎn)述三分群血液分析儀白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板直方圖的表達(dá)特點(diǎn)？

3．哪些因素可影響正常細(xì)胞直方圖？

4．2005年，國(guó)際血液學(xué)組織發(fā)布的血液分析儀顯微鏡復(fù)檢規(guī)則有幾條？

5．簡(jiǎn)述紅細(xì)胞參數(shù)RDW、IRF、CHr臨床意義？

6．簡(jiǎn)述血小板參數(shù)MPV、IPF臨床意義？

教學(xué)中的創(chuàng)新點(diǎn)（加強(qiáng)基礎(chǔ)與臨床聯(lián)系、外語運(yùn)用、啟發(fā)學(xué)生思維、指導(dǎo)學(xué)生自學(xué)、介紹學(xué)科新進(jìn)展等方面)：

加強(qiáng)基礎(chǔ)與臨床聯(lián)系、 介紹學(xué)科新進(jìn)展、提出理論聯(lián)系實(shí)際，檢驗(yàn)結(jié)果必須結(jié)合臨床表現(xiàn)等

參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻(xiàn)等)：

1. 叢玉隆 ,王淑娟主編:《今日臨床檢驗(yàn)學(xué)》, 中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社,1997年。  

2．叢玉隆 ,樂家新，秦小玲，楊宏偉，王丹玲主編:《血細(xì)胞分析技術(shù)與臨床》,天津科學(xué)技術(shù)出版社, 2002年。

教研室

意 見

符合教學(xué)要求，同意。

教研室主任簽章： 年　　月　　日

教學(xué)后記（即教學(xué)實(shí)施情況總結(jié)分析，在課程結(jié)束后填寫)

血液分析儀是臨檢基礎(chǔ)中發(fā)展較快的內(nèi)容，本教材新增的內(nèi)容很多，也非常前沿。本內(nèi)容為8學(xué)時(shí)，但時(shí)間較緊，內(nèi)容太多，也比較重要，在以后的教學(xué)中可適當(dāng)增加課時(shí)。