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人工牛黃—膽酸的測定—紫外可見分光光度法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫中心 藥學論壇 人工牛黃—膽酸的測定—紫外可見分光光度法
方法名稱:
人工牛黃—膽酸的測定—紫外可見分光光度法
應用范圍:

本方法采用分光光度法測定人工牛黃中膽酸的含量。

本方法適用于由牛膽粉、膽酸、豬去氧膽酸、牛黃酸、膽紅素、膽固醇、微量元素等制成的人工牛黃。

方法原理:
供試品用60%冰醋酸溶液超聲提取,續(xù)濾液中加入糠醛溶液,混勻,置于冰浴中,取出,加入一定量硫酸溶液,水浴加熱后迅速移至冰浴中,放置,取出。供試品溶液置紫外可見分光光度計, 于波長605nm處測定吸收度,計算其膽酸的量。
試劑:

1. 60%冰醋酸溶液

2. 糠醛溶液(1→100)

3. 硫酸溶液(取硫酸50mL與水65mL混合)

儀器設備:

可見分光光度計

試樣制備:

對照品溶液的制備

取膽酸對照品12.5mg,精密稱定,置25mL量瓶中,加60%冰醋酸溶液使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,制成每1mL含膽酸0.5mg的溶液。

操作步驟:

1. 標準曲線的繪制

精密量取對照品溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL與1mL,分別置具塞試管中,各試管加入60%冰醋酸溶液稀釋成1.0 mL,再分別加新制的糠醛溶液(1→100)1.0 mL,搖勻,在冰浴中放置5分鐘,精密加入硫酸溶液(取硫酸50mL與水65mL混合)13 mL,混勻,在70℃ 水浴中加熱10分鐘,迅速移至冰浴中,放置2分鐘,以相應的試劑為空白,照分光光度法,在605nm波長處測定吸光度,以吸收度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線。

2. 供試品的測定

取本品0.1g,精密稱定,置50 mL量瓶中,加60%冰醋酸溶液適量,超聲處理5分鐘,用60%冰醋酸溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過,棄去初濾液,精密量取續(xù)濾液各1mL,分別置甲、乙兩個具塞試管中,于甲管中加新制的糠醛溶液1mL,乙管中加水1mL作空白,分別搖勻,在冰浴中放置5分鐘,精密加入硫酸溶液(取硫酸50mL與水65mL混合)13 mL,混勻,在70℃ 水浴中加熱10分鐘,迅速移至冰浴中,放置2分鐘,以相應的試劑為空白,照分光光度法,在605nm波長處測定吸光度,從標準曲線上讀出供試品溶液中含膽酸的重量,計算。

參考文獻:

中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學工業(yè)出版社,2005年版,一部,p.4。

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