方法名稱(chēng)： |
西藏紅豆杉—紫杉醇的含量測(cè)定—HPLC-DAD |
應(yīng)用范圍： |
用于西藏紅豆杉不同部位中紫杉醇的含量測(cè)定 |
方法原理： |
本品粉末用甲醇超聲提取，濃縮，三氯甲烷提取后，經(jīng)液相色譜儀分離，在230nm處測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
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儀器設(shè)備 Agilent1100高效液相色譜儀(高壓二元泵、恒溫柱溫箱、 DAD檢測(cè)器、手動(dòng)進(jìn)樣器、在線脫氣機(jī))。 | 色譜條件 色譜柱：Aphenomenexluna C18 柱 ( 250×4.60mm i.d，5um) ；柱溫:30 ℃；流動(dòng)相：甲醇-水 (60∶40) ；流量：1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm；進(jìn)樣量: 10μL。 |
試樣制備： |
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對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取紫杉醇標(biāo)準(zhǔn)品1.00mg，定容于1ml甲醇中，稀釋得 0.100mg·ml-1濃度的甲醇溶液。 | 供試品溶液的制備 精密稱(chēng)取樣品 2.0g，置于圓底燒瓶中，加入甲醇 20ml，置于超聲清洗器中于50℃超聲振蕩提取60分鐘，甲醇液過(guò)濾，濾渣和濾紙復(fù)加20ml 甲醇，在相同條件下超聲提取4分鐘，再次過(guò)濾后，濾渣和濾紙?jiān)偌?0ml甲醇，在相同條件下超聲提取20分鐘，合并濾液，減壓蒸干后，殘?jiān)?0ml氯仿，超聲振蕩30分鐘，過(guò)濾，取氯仿層，回收氯仿，于殘?jiān)屑由僭S甲醇，超聲萃取，甲醇液離心，上層清液以甲醇定容至1ml 。葉提取物經(jīng)自制氧化鋁柱，用氯仿洗脫非極性成分后，甲醇洗脫，濃縮，以甲醇定容至1ml，定容后的甲醇液經(jīng) 0.45μN(yùn)elon濾膜過(guò)濾，濾液供 HPLC分析用。 |
操作步驟： |
精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，依上述色譜條件測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
林鵬程，高東紅，馬孝賢.西藏紅豆杉不同部位紫杉醇含量的分布研究.青海師專(zhuān)學(xué)報(bào)(教育科學(xué)) .2003，（6)：87～88 |
