方法名稱： |
紅豆杉組織培養(yǎng)物—紫杉醇的測定—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于紅豆杉組織培養(yǎng)物中紫杉醇含量的測定 |
方法原理： |
本品細(xì)粉用三氯甲烷-甲醇（6∶4)回流提取提取，經(jīng)液相色譜儀分離，在227nm測定，外標(biāo)法計算紫杉醇的含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件： |
儀器設(shè)備 LC-9A 型高效液相色譜儀(日本島津公司)；CR-9A記錄儀。 色譜條件 色譜柱：Sh im Pack CLC-ODS；流動相：甲醇-乙腈-水(25∶24∶41)；流速：1mL/m in；檢測波長：227 nm。 |
試樣制備： |
對照品溶液制備 精確稱取紫杉醇標(biāo)準(zhǔn)品，配成1mg/mL 的甲醇溶液，作為對照品貯備液。 供試品溶液的制備 取紅豆杉組織培養(yǎng)物3～ 5 g，60℃烘干至恒重，粉碎，過60 目篩。用三氯甲烷-甲醇（6∶4)回流提取數(shù)次，提取液減壓濃縮，石油醚脫脂后，經(jīng)減壓真空低溫干燥至恒重。準(zhǔn)確稱取樣品適量，加流動相溶解，配制成濃度為0. 3mg/mL的待測溶液，即得供試品溶液。 |
操作步驟： |
精密吸取對照液以及供試品溶液1Oμl，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。計算含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
孫 ，胡正海，成小飛等. 利用高壓液相色譜法測定紅豆杉組織培養(yǎng)物中紫杉醇的含量. 西北大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版).1999，29（2)：159～161 |
