方法名稱： |
西藏紅豆杉—紫杉醇的測定—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于西藏紅豆杉中紫杉醇含量的測定 |
方法原理： |
本品細粉用甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜儀分離，在227nm測定，外標(biāo)法計算紫杉醇的含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件： |
儀器設(shè)備 Agilentl100高效液相色譜儀；DAD檢測器；Agilentl100工作站。 色譜條件 色譜柱：Kromasil-C18 (250mm×4.6mm，5μm)；流動相：甲醇-水（65 ：35 )；流速：0.8mL·min-1 ；檢測波長：227nm；柱溫：35℃。 |
試樣制備： |
對照品溶液制備 準(zhǔn)確稱取對照品紫杉醇1.0mg，置于1.0mL容量瓶中，以甲醇溶解并定容，配制成相應(yīng)濃度的對照品儲備液，將對照品儲備液稀釋100倍，即得對照品溶液（濃度為0.01mg/ml)。 供試品溶液的制備 準(zhǔn)確稱取粉碎至80目的樣品5g，加入甲20mL，超聲提取1h，抽濾，以甲醇洗滌濾渣2次，每次1mL. 濾渣重復(fù)上述操作，所得濾液與前一次濾液合并，回收大部分溶劑后，與2g中性氧化鋁吸附混合，干燥1小時裝入預(yù)先裝填好的中性氧化鋁(10g)小柱上，用氯仿100%淋洗至流出液無色，然后用三氯甲烷-甲醇(100 ：5) 洗脫至綠色帶至柱底層止，溫水浴揮干，殘渣用甲醇溶解并定容至2mL，即得供試品溶液. |
操作步驟： |
精密吸取對照液以及供試品溶液1Oμl，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。計算含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻： |
吳江，盧永昌，朱小. 固相萃取—反相高效液相色譜法測定西藏紅豆杉葉中紫杉醇的含量. 青海師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版).2006，3：71～73 |
